NGAL对大鼠肾脏缺血再灌注损伤作用机制的体内研究

目的:观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatisase-associated lipocalin,NGAL)对大鼠缺血再灌注肾损伤(I/R)的作用机制。方法:通过切除一侧肾脏,夹闭对侧肾蒂45min的方法来建立大鼠I/R模型。雄性SD大鼠随机分为对照组、I/R组、缺血再灌注给药组(NGAL组),对照组、I/R组、NGAL组实验结束时分别用HE染色观察3组动物肾组织病理变化;再灌注24h后测血肌酐(Scr)和尿素氮(Bun),TUNEL观察肾小管上皮细胞凋亡情况,免疫组化检测Bax与激活的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3,CC3)的表达;Western Blot技术检测凋亡蛋白Fas、Bcl-2表达的变化。结果:与I/R组比较,NGAL组Scr、Bun分别为(63.400±11.908vs121.857±17.151)μmol/L、(14.840±2.868vs28.557±6.434)mmol/L,肾小管上皮细胞凋亡数量减少(7.800±1.924vs15.400±3.049);NGAL组肾组织Fas mRNA(2.34±0.51vs6.84±2.34)表达降低、Bax蛋白[(7.440±1.640)%vs(15.456±1.955)%]表达降低、CC3蛋白[(3.171±0.321)%vs(7.291±1.059)%]表达降低、Bcl-2蛋白(6.91±1.64vs5.30±1.48)表达升高(P<0.05)。结论:NGAL对大鼠I/R的肾小管上皮细胞有保护作用,其作用与减少细胞凋亡、改变凋亡蛋白的表达,从而减轻组织损伤,发挥肾脏保护作用有关。

血液透析联合血液灌流治疗慢性肾衰竭并发继发性甲状旁腺功能亢进临床观察

目的探讨终末期肾衰竭患者运用维持性血液透析和血液透析联合血液灌流治疗慢性肾衰竭并发继发性甲状旁腺功能亢进(简称甲旁亢)的临床效果及对患者营养状况、肾功能、血压、C-反应蛋白(CRP)等的影响。方法将44例慢性肾衰竭并发继发性甲旁亢维持性血液透析患者随机分为常规血液透析组和血液透析联合血液灌流组,记录入组前两组患者透前收缩压、舒张压,透后收缩压、舒张压,透前血红蛋白、清蛋白、肌酐、尿素氮,血清钙、磷、甲状旁腺激素、β2-微球蛋白(β2-MG)、CRP水平,6个月后重复检查,记录结果。结果两组患者透析6个月后,透前收缩压、舒张压,透后收缩压、舒张压、清蛋白、血清钙、CRP基线情况相似,差异无统计学意义(P>0.05)。血液透析联合血液灌流组血红蛋白水平较治疗前升高,血清磷、甲状旁腺激素、β2-MG水平较血液透析组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血液透析联合血液灌流能更好地降低血清磷、甲状旁腺激素、β2-MG水平,改善慢性肾衰竭并发继发性甲旁亢症状,同时还能改善患者贫血状态。

高磷对血管平滑肌钙化的影响及骨保护素干预作用

目的研究高磷对大鼠血管平滑肌细胞(RVSMC)钙化的影响和骨保护素(OPG)mRNA表达的影响,及骨保护素对高磷诱导RVSMC钙化的作用及其相关机制。方法用不同的试剂培养RVSMC,分别为正常磷组(Pi1.4mmol/L)、高磷组(Pi2.0mmol/L、Pi2.6mmol/L)、凋亡抑制组(Pi2.6mmol/L+ZVAD.FMK0.1μmol/L,Pi2.6mmol/L+ZVAD.FMK1.0μmol/L,Pi2.6mmol/L+ZVAD.FMK2.0μmol/L)、骨保护素组(Pi2.6mmol/L+OPG1μg/ml,Pi2.6mmol/L+OPG10μg/ml,Pi2.6mmol/L+OPG100μg/ml)。全自动生化仪比色法测定钙含量,BCA法测定蛋白含量,用蛋白含量标化钙含量。同时行VonKossa染色观察细胞钙化情况。用半定量PCR(RT-PCR)法检测RVSMCOPGmRNA的表达。流式细胞仪测定各组的细胞凋亡量。结果①培养3天,6天,9天时,高磷组(Pi2.0mmol/L,Pi2.6mmol/L)与Pi1.4mmol/L相比,RVSMC钙沉积较多(P<0.05);②培养第6天时,Pi2.6mmol/L+ZVAD.FMK0.1μmol/L组的钙沉积与Pi2.6mmol/L组相比无统计学差异,而Pi2.6mmol/L+ZVAD.FMK1.0μmol/L,Pi2.6mmol/L+ZVAD.FMK2.0μmol/L组与Pi2.6mmol/L组相比,RVSMC钙沉积较少(P<0.05)。Pi2.6mmol/L+OPG10μg/ml、Pi2.6mmol/L+OPG100μg/ml组与Pi2.6mmol/L组相比,细胞钙沉积较少(P<0.05)。Pi2.6mmol/L+OPG100μg/ml与Pi2.6mmol/L相比,细胞钙沉积明显降低(P<0.01);③VonKossa染色显示:Pi1.4mmol/L组钙化不明显;Pi2.6mmol/L组细胞有大量黑色颗粒沉积;而Pi2.6mmol/L+OPG100μg/ml组较少。培养第6天时,Pi2.6mmol/L组与Pi2.0mmol/L组;Pi2.0mmol/L,Pi1.4mmol/L相比,OPGmRNA表达较多(P<0.05)。培养第6天时,Pi2.6mmol/L与Pi1.4mmol/L相比,细胞凋亡量较多(P<0.05);Pi2.6mmol/L+OPG100μg/ml与Pi2.6mmol/L相比细胞凋亡量较少(P<0.05)。结论高磷可能通过诱导RVSMC凋亡而导致钙化,骨保护素对高磷诱导的RVSMC钙化有保护作用,此作用与其降低RVSMC凋亡有关。

产后溶血性尿毒症综合征1例临床分析

产后溶血性尿毒症综合征（Postpartum Hemol-ytic Uremic Syndrome,简称PHUS）是一种微血管病变所致的临床综合征。PMUS近年来发病率呈上升趋势,早期诊断和及时治疗对于降低其死亡率至关重要。本文报告1例PHUS经行日间连续性肾脏替代治疗（DCRRT）抢救成功，并探讨有关诊治体会。

流程警示图在预防居家腹膜透析患者并发腹膜炎中的应用

目的探讨应用流程警示图预防居家腹膜透析患者并发腹膜炎的效果。方法方便性抽样选取2010年9月至2011年9月上海交通大学附属第一人民医院松江分院收治的居家腹膜透析患者58例,按随机数字表法将患者分为对照组26例与观察组32例,对照组患者实行常规护理,观察组患者在常规护理的基础上向其发放居家腹膜透析流程警示图。结果观察组患者发生腹膜炎的例数少于对照组,对腹膜透析治疗的满意度高于对照组(均P<0.01)。结论流程警示图的应用可以提高腹膜透析患者的生活质量,减轻患者痛苦,提高患者的满意度。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对大鼠肾脏缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞的保护作用

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）对大鼠缺血再灌注损伤。肾脏肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及机制。方法建立大鼠肾脏缺血再灌注模型，雄性SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注模型组、NGAL组；HE染色观察3组大鼠肾组织病理变化；TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡；实时定量PCR、Western印迹法检测凋亡蛋白fas、bcl－2的表达变化。结果与缺血再灌注模型组比较，NGAL组肾小管上皮细胞凋亡数量显著减少[（8．6＋3．4）／HP比（20．8±3．7）／HP，P〈0．05]；NGAL组肾组织fasmRNA（2．34＋0．51比6．84±2．34，P〈0．05）、fas蛋白（0．65±0．05比0．95±0．08，P〈0．05）表达显著下调，bcl-2蛋白（0．33±0．05比0．24±0．03，P〈0．05）表达显著上调，但bcl－2mRNA表达无明显改变。结论NGAL对大鼠缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞有保护作用，其作用可能与减少细胞凋亡、改变凋亡蛋白的表达有关。

解毒理脉汤治疗热毒炽盛型脓毒症的临床研究

目的探讨解毒理脉汤治疗热毒炽盛型脓毒症患者的临床效果。方法采用前瞻性随机对照研究方法,选择上海交通大学附属第一人民医院重症医学科和松江分院重症医学科2019年3月至2020年4月收治的符合热毒炽盛型脓毒症诊断标准的患者,按照随机数字表法分为常规治疗组和解毒理脉汤组。两组患者均按照指南给予常规治疗;解毒理脉汤组在常规治疗基础上增加解毒理脉汤口服治疗,每日1剂,治疗14 d。记录两组患者入组28 d存活情况,治疗前及治疗7 d的急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评分(SOFA)、凝血功能指标、感染指标、炎性因子以及器官功能指标变化;同时记录两组患者预后。结果观察期间共收治259例感染或临床诊断感染患者,排除不符合Sepsis-3诊断标准、年龄>80岁或<18岁、恶性肿瘤多处转移、自身免疫系统疾病、重症监护病房(ICU)住院时间<24 h、急性活动性消化道出血及资料不全者,最终共纳入100例患者,常规治疗组和解毒理脉汤组各50例。治疗前两组患者凝血功能指标、感染指标、炎性因子、器官功能指标水平差异均无统计学意义。治疗7 d后,与常规治疗组比较,解毒理脉汤组患者凝血功能、感染指标、炎性因子均明显改善〔D-二聚体(mg/L):2.2(1.8,8.5)比4.0(1.5,8.7),纤维蛋白原(Fib,g/L):3.7(3.4,4.3)比4.2(3.7,4.3),纤维蛋白原降解产物(FDP,mg/L):7.2(5.4,10.2)比13.2(9.2,15.2),降钙素原(PCT,μg/L):0.4(0.2,2.9)比0.5(0.2,0.9),C-反应蛋白(CRP,mg/L):50.1(9.5,116.0)比75.1(23.5,115.2),白细胞介素-6(IL-6,ng/L):31.6(21.6,81.0)比44.1(14.0,71.3),均P<0.05〕,且B型脑钠肽(BNP)和肾损伤因子-1(KIM-1)水平明显降低〔BNP(ng/L):261.1(87.5,360.3)比347.3(128.8,439.4),KIM-1(μg/L):0.86(0.01,1.40)比1.24(1.05,1.57),均P<0.05〕。与常规治疗组相比,解毒理脉汤组治疗后出现新的器官功能衰竭患者比例更低(30.0%比50.0%,P<0.05);两组患者28 d病死率差异虽无统计学意义(P>0.05),但解毒理脉汤组28 d病死率较常规治疗组更低(18.0%比24.0%)。结论在指南方案的指导下联合中药解毒理脉汤治疗热毒炽盛型脓毒症,能有效改善患者的凝血功能指标,减轻心脏和肾脏损伤,降低炎性因子水平,减少治疗后出现新的器官功能衰竭的风险。