大鼠胰岛分离条件的优化

目的:优化大鼠胰岛分离纯化的条件,为胰岛移植实验奠定基础。方法:通过胆总管灌注胶原酶P来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果的影响。双硫腙染色鉴定胰岛,丫啶橙/碘丙啶染色鉴定胰岛细胞活率,糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛功能。结果:胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果有重要影响。1mg/ml胶原酶P在37℃静止消化45分钟条件下,胰岛分离效果最佳,效果较其他酶浓度和消化时间条件下好(P＜0．05)。体重350g的大鼠的胰岛收获量778．33±80．21IEQ/胰腺,而体重250g的大鼠的胰岛收获量655．00±56．56 IEQ/胰腺(P＜0．05)。优化条件下分离的胰岛其纯度＞90%,胰岛细胞活率＞90%,低糖(2．8mmol/L)、高糖(16．7mmol/L)刺激胰岛素释放分别为(5．40±1．75)mIU/L/30IEQ,(12．27±2．55)mIU/L/30IEQ(P＜0．05),刺激指数为2．33±0．29。结论:胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重影响胰岛分离结果,优化分离条件可改善大鼠胰岛分离结果。

肾移植术后口服伐昔洛韦预防巨细胞病毒性肺炎的观察

目的探讨口服伐昔洛韦(valaciclovir)预防肾移植术后巨细胞病毒(CMV)性肺炎的有效性和安全性。方法前瞻性研究121例肾移植的临床资料,其中供、受者血清CMV-IgG均为阳性(D+R+组)肾移植63例,供者血清CMV-IgG阳性、受者血清CMV-IgG阴性(D+R-组)肾移植58例。上述两组受者随机再分为预防组和对照组,预防组口服伐昔洛韦,对照组不给予抗病毒药物。观察肾移植术后1年内CMV性肺炎的发生率。结果预防组的受者对口服伐昔洛韦有良好的耐受性。预防组CMV性肺炎发生率为8.06%,对照组为22.03%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对供者血清CMV-IgG阳性、受者血清CMV-IgG阴性或供、受者血清CMV-IgG均为阳性的肾移植,受者预防性口服伐昔洛韦可以安全有效地降低术后CMV性肺炎的发生率。

髓质海绵肾患者肾移植一例

髓质海绵肾（MSK）又称髓质集合管扩张症，系指一侧或双侧肾内单个或多个锥体内集合管的囊性扩张，普通人群中发病率为1／20000～1／5000，其临床表现不典型，早期易误诊，在少儿阶段发病并出现肾衰竭者较少见^[1]。本文报道1例少儿髓质海绵肾的诊治经过及肾移植治疗效果。

血红素氧合酶-1基因转染对大鼠胰岛培养的影响

目的探讨血红素氧合酶-1基因(HO-1)转染对培养的大鼠胰岛功能的影响。方法用携带人HO-1基因和增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的腺病毒载体转染大鼠胰岛,转染后48 h,以EGFP及人HO-1蛋白的表达来确定转染结果,放免法测定各组胰岛在低糖(2.8 mmol/L)、高糖(16.7 mmol/L)刺激下胰岛素释放量,并计算刺激指数(SI)。结果大鼠胰岛培养7 d后,其低糖、高糖刺激下胰岛素释放量明显低于新鲜胰岛[(4.57±0.40比(6.47±0.55)mIU/L/30 IEQ,(9.63±0.71)比(14.93±1.17)mIU/L/30 IEQ,P<0.05];培养7 d的各组胰岛在低糖刺激时胰岛素释放量差异无统计学意义(P>0.05),但HO-1组胰岛在高糖刺激时胰岛素释放量明显高于EG- FP组和对照组[(12.50±2.17)mlU/L/30 IEQ,(8.87±0.65)mlU/L/30 IEQ,(9.63±0.71)mIU/L/30 IEQ,P<0.05];HO-1组SI也高于EGFP组和对照组[(2.21±0.02),(2.08±0.05),(2.11±0.03),P<0.05]。结论HO-1基因转染能对体外培养的大鼠胰岛功能起到保护作用。

显性调控下免疫细胞局部微环境的特征

目的 观察显性调控过程中细胞因子谱系的动态变化及不同刺激强度的影响作用 ,归纳显性调控作用下免疫反应局部微环境的特征。方法 分离外周血单个核细胞 ,采用不同组合刺激 ,以ELISA、RT PCR检测细胞因子表达水平。结果 ELISA结果显示 :IL 2、IL 4、IL 12分泌受到抑制 ,在整个观察期中 ,无论单刺激组还是共刺激组与未接受IL 10干预的对照组比较 ,IL 4、IL 12皆呈现显著差异 ,IL 2分泌在单刺激组抑制显著 ,IFN γ仅表现为明显抑制 ,无统计学差异 ,IL 10促进TGF β1的合成与分泌 ,在单刺激时增加明显 ,而在共刺激组 ,只在反应 72h才显著增加。在基因水平 ,被测细胞因子呈现相似的结果。结论 显性调控的建立主要通过IL 10抑制IL 12和IL 4过度表达 ,防止免疫应答在早期产生特定的和特异的单极化免疫效应。