脓毒症大鼠血清对内皮细胞的影响

目的研究脓毒症大鼠血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响,探讨脓毒症的发病机制。方法12只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组和脓毒症组。采用盲肠结扎穿孔术制备大鼠脓毒症模型。术后6 h采血收集血清和血浆,采用鲎试剂法定量测定血浆脂多糖(LPS)水平,酶联免疫吸附试验测定血清肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6水平。并将血清与HUVEC孵育8 h后分别应用活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,采用Hoechst 33342/碘化丙啶荧光染色计算细胞坏死率,并应用细胞划痕实验测定0、12、24 h的细胞间残存距离。结果脓毒症组LPS、TNF-α及IL-6水平均显著高于假手术组(P值均<0.01)。脓毒症组血清刺激HUVEC后8 h的细胞活力显著低于假手术组(P<0.01)。脓毒症组血清刺激HUVEC后的细胞坏死率显著高于假手术组(P<0.01)。孵育12和24 h后,脓毒症组的细胞间残存距离均显著大于假手术组(P值均<0.01)。结论脓毒症大鼠血清中LPS、细胞因子的水平显著升高,对血管内皮细胞有明显的杀伤抑制作用。