耐紫杉醇肺原位小鼠移植瘤模型的建立和鉴定

目的建立肺原位移植耐紫杉醇肿瘤动物模型以及耐药机制的研究。方法利用本实验室已经获得的耐紫杉醇肺癌细胞株(A549-Taxol),测定其耐药指数和细胞对抗癌药物的敏感性后,采用穿刺法将约为每毫升5×10^(6)细胞注入小鼠肺部,3周后统计存活率以及成瘤率并且观察小鼠状态。RT-PCR和Western Blot技术检测肿瘤中耐药基因GST-π、P-gp170和MMP-7的mRNA和蛋白质的表达情况。结果A549-Taxol肺癌细胞的耐药指数为508倍;GST-π、P-gp170和MMP-7耐药蛋白表达明显升高(P<0.001),且A549-Taxol组肺癌细胞的侵袭能力显著高于A549组。用5×10^(6)细胞量进针5 mm的注射入肺部的存活率与成瘤率分别为100%和85%,成瘤后免疫组化显示耐药蛋白在A549-Taxol组裸鼠中明显表达,且耐药蛋白高于A549裸鼠组。结论GST-π、P-gp170和MMP-7的表达与肺癌紫杉醇耐药相关,初步建立了耐紫杉醇的肺癌原位动物模型,耐药细胞对紫杉醇的耐药性保持稳定并可用于后续的实验研究。

药对蛇床子—补骨脂对乳腺癌骨转移裸鼠生存时间与骨损伤的影响

目的研究药对蛇床子—补骨脂对裸鼠乳腺癌骨转移生存时间、破骨细胞活性及骨损伤的影响,探讨该药对治疗乳腺癌骨转移的最佳配伍关系。方法用左心室注射MDA-MB-231BO细胞法对裸鼠进行造模,观察蛇床子—补骨脂药对(2.56 g/只)的作用,以唑来膦酸(0.2 mg/kg)作为阳性对照药。将84只裸鼠模型随机分为A、B组,每组42只,每组再随机分为模型组、唑来膦酸组和蛇床子—补骨脂4∶0、0∶4、1∶3、2∶2、3∶1组,每组6只,实验B组另配正常组裸鼠6只。实验A组观察不同配比药对干预后各组模型的生存时间;实验B组不同配比药对干预6周后取材,TRACP染色观察各组破骨细胞的形态和数量,检测骨转移灶M-CSF、PTHrP的基因与蛋白的表达。结果各干预组均能显著延长裸鼠模型的生存时间(P<0.05,P<0.01),中药组以2∶2配伍最好,疗效接近唑来膦酸组;各干预组均可在一定程度上抑制乳腺癌骨转移裸鼠骨转移组织中破骨细胞的活性(P<0.05,P<0.01),中药组以2∶2配伍最好,疗效接近唑来膦酸组;各干预组均可不同程度地下调M-CSF、PTHrP的基因与蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),中药组以2∶2配伍最好。结论基于温肾法的蛇床子—补骨脂药对可以抑制乳腺癌骨转移,该药对最佳疗效配伍比例可能是2∶2。

β-榄香烯对紫杉醇耐药肺癌细胞的抑制作用及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:研究β-榄香烯对紫杉醇耐药肺腺癌细胞A549/Taxol的抑制作用及其对Wnt/β-catenin信号转导通路的影响。方法:采用浓度梯度诱导法制备紫杉醇耐药肺腺癌细胞株A549/Taxol。以不同浓度β-榄香烯作用于A549/Taxol细胞48 h,采用CCK8法检测细胞增殖;实时定量PCR法检测多药耐药基因(MDR1)及β-catenin、Survivin基因的mRNA表达;Western blot法检测A549/Taxol细胞P糖蛋白(P-gp)及β-catenin、Survivin的蛋白表达。结果:与对照组比较,β-榄香烯呈浓度相关性抑制A549/Taxol细胞增殖;β-榄香烯(20、40、80μg/ml)作用48 h后,A549/Taxol细胞MDR1、β-catenin、Survivin mRNA及蛋白表达水平均明显下降(P<0.01)。结论:β-榄香烯可能通过下调β-catenin、Survivin mRNA及其蛋白的表达,影响Wnt/β-catenin信号转导通路,发挥抑制A549/Taxol细胞增殖的作用;β-榄香烯对肺腺癌细胞紫杉醇耐药性具有拮抗作用,该作用可能通过抑制Wnt/β-catenin信号转导通路实现。

肺移植后闭塞性细支气管炎免疫学发病机制及治疗新策略

尽管肺移植相关医学技术发展迅速,但肺移植后慢性免疫排斥导致的移植物失功,临床表现为闭塞性细支气管炎,仍是制约患者长期生存率最主要因素。闭塞性细支气管炎发生的主要病因是同种异体移植免疫排斥反应。因此诱导机体免疫耐受是目前减轻同种异体移植排斥,提高移植物长期生存率的主要方法。本文将就肺移植后慢性免疫排斥发生的机制,及诱导肺移植免疫耐受的策略进行综述。