磁性纳米簇标记小鼠胚胎干细胞的体外研究

通过制备表面带正电荷（Cationic Magnetic Nanoclusters，CMNCs）和负电荷（Anionic Magnetic Nanoclusters，AMNCs）的磁性纳米簇，分别在体外对小鼠胚胎干细胞（mouse Embryonic Stem Cells，mESC）进行标记．采用Prussianblue染色、电镜观察鉴定2种磁性纳米簇对mESC标记率的结果表明：CMNCs细胞标记组铁浓度在0．03～0．09mmol／L和AMNCs细胞标记组铁浓度在0．3～0．9mmol／L时，90％以上细胞被标记，透射电镜可见磁性纳米簇颗粒位于胞浆中．用7-AAD和CCK-8试剂盒分别检测标记后mESC的活力和增殖能力，结果显示：CMNCs细胞标记组在低于0．3mmol／L浓度标记后，对mESC的增殖能力与正常未标记组比较，差异无统计学意义（P〉0．01）；AMNCs细胞标记组在高于0．06mmol／L浓度标记时与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）．与AMNCs相比，CMNCs在mESC标记方面表现出了优良的特性．

干细胞微环境的体外模拟

背景:细胞外基质是组织微环境的重要组分,为维持细胞功能提供了关键的生化和物理信号。目的:对体外模拟骨髓干细胞微环境的研究进展进行综述,着重于介绍体外再造细胞外基质。方法:应用计算机检索Pubmed(1999-01/2010-10)、Embase(1999-01/2010-10)数据库中关于干细胞微环境的文章,以"mesenchymal stem cells;extracellular matrix;niche;growth factor modulation;culture in vitro"为检索词进行检索。初检得到321篇文献,根据纳入标准选择关于干细胞微环境的23篇文献进行综述。结果与结论:骨髓源性的细胞外基质培养体系能保持间充质干细胞的特性,对纯化这些细胞和形成更多数量的同质间充质干细胞提供了便利。使用3D合成材料建立一个独特的骨架,包被组织特异性的间充质干细胞蛋白,并添加正确的生长因子组合,有利于调控间充质干细胞的分化方向。

体外模拟干细胞微环境培养扩增脐血及脐带基质源性间充质干细胞

背景:建立稳健的扩增体系,在体外扩增时最大限度地获得治疗剂量的干细胞数,同时保存干细胞的特性是临床实验室亟待解决的问题。目的:建立体外模拟干细胞微环境细胞外基质扩增脐血间充质干细胞及脐带间充质干细胞的方法,并与传统的2-D培养体系比较。方法:建立体外模拟干细胞微环境细胞外基质,体外分离脐血间充质干细胞及脐带间充质干细胞后分别接种到细胞外基质及传统的2-D塑料培养体系,分别从细胞计数及细胞表面标志物的变化,评估两种扩增体系对脐血间充质干细胞及脐带间充质干细胞体外扩增的优劣。结果与结论:使用骨髓源性的细胞外基质培养体系单位时间脐血间充质干细胞及脐带间充质干细胞产量是2-D体系的4～6倍,并且流式细胞仪检测显示细胞外基质体系能更好地保持干细胞的表面标记。因此,3-D较2-D培养系更接近生理环境,已建立的骨髓源性细胞外基质培养体系能保持间充质干细胞的特性,为短时间内快速获取更大数目同质、高活性的间充质干细胞提供了可能。