药用真菌桑黄总黄酮测定方法研究

采用NaNO2-Al(NO3)3比色法及紫外比色法对不同桑黄提取物中总黄酮的含量进行了测定,并对其进行了定性分析。定性分析结果表明桑黄提取物中含有黄酮类化合物,两种测定方法的方法学考察的各项指标均符合要求,均可作为桑黄中黄酮含量的测定方法。

金耳子实体体外抗肿瘤和免疫活性部位的筛选研究

为系统地筛选金耳子实体的活性部位,本论文首次采用系统溶剂法分别用氯仿、乙酸乙酯和乙醇等极性不同的有机溶剂依次提取,残渣风干后再分别用冷水(80℃)、热水(100℃)、3%草酸铵和5%氢氧化钠依次提取,并对各提取物进行了体外抗肿瘤和免疫活性的测试。体外抑制肿瘤细胞增殖模型试验结果表明,氯仿提取物对肿瘤细胞株L1210和SW 620的抑制作用效果最好(P<0.05);小鼠脾淋巴细胞的体外免疫增殖试验结果表明,冷水提取物和热水提提取物的刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖活性相当,仅次于氢氧化钠提取物的活性,草酸铵提取物的活性最差(P<0.05)。

金耳菌丝体醇提物体外抗肿瘤抗病毒活性研究

采用体外肿瘤细胞株(小鼠白血病细胞株L1210、人乳腺癌细胞株MCF-7和人肠腺癌细胞株SW620)的增殖抑制试验模型和抗病毒(流感甲型病毒和疱疹病毒)的筛选模型,对3个金耳(Tremella aurantialba)菌株菌丝体醇提物活性进行比较研究。抗肿瘤试验结果表明,3种提取物材料在高浓度(200μg/mL)时,对3个供试肿瘤细胞株的细胞增殖均有明显的抑制作用,其中以YK的抑制活性最高(对L1210、SW620和MCF-7的抑制率分别为89.4%,75.0%和64.1%);在中浓度(50μg/mL)时,均表现出一定的抑制作用;而在低浓度(10μg/mL)时,则均无明显的抑制作用。抗流感甲型病毒和抗疱疹病毒试验结果表明,只有YK对流感甲型病毒表现有抗病毒活性,但此活性较弱。

灵芝中性三萜类成分的抗肿瘤作用

从灵芝(Ganoderma lucidum)子实体中分离纯化得到中性三萜部分,经HPLC检测发现主要有8个峰,与灵芝三萜酸性部分的峰基本不重叠。灵芝中性三萜部分对多种肿瘤细胞的增殖有抑制作用,并观察到可诱导肠癌SW620细胞凋亡。

桑黄多糖中3-O-甲基-半乳糖的分析鉴定

目的:对桑黄多糖中的未知糖组分进行分析鉴定。方法:从桑黄子实体中经过提取分离纯化得到水溶性多糖纯品Piw-1,经三氟乙酸完全水解后用高效阴离子交换色谱检测出含5种单糖,其中4种分别为岩藻糖、半乳糖、葡萄糖和木糖,1种在单糖标准品对照中未找到。将 Piw-1乙酰化后进一步用 GC-MS 进行分析,同时用^(13)C NMR 的 DEPT-135图谱对Piw-1中的未知单糖组分进行鉴定。结果:用离子色谱、气质联用及核磁共振的分析手段鉴定了含有3-0-甲基-半乳糖的桑黄多糖的糖组成。结论:Piw-1中含有3-0-甲基-半乳糖组分。

猴头菌多糖的3-O-甲基-甲基戊糖的鉴定

目的:对猴头菌多糖中的3-O-甲基-甲基戊糖组分进行鉴定。方法:从猴头菌子实体中经过提取分离纯化得到纯品HEPF1,经三氟醋酸水解后用硼氢化钠还原,然后对其进行乙酰化,以单糖标准品做对照,用 GC-MS 进行分析,同时用^(13)CNMR 的 DEPT-135对 HEPF1中的3-O-甲基-甲基戊糖组分进行鉴定。结果:建立了毛细管气相色谱-质谱联用鉴定含有3-O-甲基-甲基戊糖的猴头菌多糖成分的方法。结论:HEPF1中含有3-O-甲基-甲基戊糖组分。

金耳子实体不同提取物的抗氧化性和对PC12细胞氧化损伤的保护作用

采用不同极性的溶剂对金耳子实体进行连续提取分离,利用化学发光法和H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤保护模型,对提取得到的氯仿相、乙酸乙酯相、乙醇相等部位进行体外抗氧化活性和氧化损伤保护作用的测定。结果表明:氯仿相具有较强的抗氧化活性,三种提取部位对H_2O_2自由基的清除作用均高于对超氧自由基的清除作用;乙醇相对由H_2O_2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用最强,且呈现明显的浓度依赖性。金耳子实体的氯仿相是其抗氧化活性的主要有效部位,乙醇相是保护PC12细胞氧化损伤的主要有效部位。

北虫草体外抗病毒、抗肿瘤活性部位的筛选

目的:采用系统溶剂法对北虫草子实体提取分离,并对各提取部位进行抗病毒和抗肿瘤活性研究。方法:采用CPE法进行体外抗病毒(抗流感甲型病毒和抗疱疹病毒)实验,按Reed-Muench法计算各提取部位的药物半数有毒质量浓度(TC50)、半数抑制浓度(IC50)和选择指数(SI),观察各提取部位的抗病毒活性;用Alamar Blue法,采用体外肿瘤细胞株K562和MCF-7的增殖抑制实验模型,研究北虫草子实体的抗肿瘤活性。结果:抗病毒实验结果表明,氯仿相(CMCl)具有抗疱疹病毒HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ的活性,CMCl对HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ病毒的半数抑制质量浓度(IC50)分别为194.01μg/mL和173.34μg/mL,选择指数(SI)分别为:>1.29和>1.44;3个部位均没有抗流感甲型病毒活性。抗肿瘤实验结果表明,北虫草3个部位提取物,在中、高质量浓度(50、200μg/mL)时,对抑制K562的增殖都有一定的活性,活性高低为:乙醇相(CMEtOH)>氯仿相(CMCl)>乙酸乙酯相(CMEtOAc);3个部位相比较,仅CMCl对人乳腺癌细胞株MCF-7具有抑制活性,在10、50、200μg/mL的抑制率分别为(9.6±3.0)%、(46.1±8.9)%和(68.5±9.2)%,呈现明显的质量浓度依赖性。结论:在北虫草3个部位中,CMCl是抗肿瘤和抗病毒活性较高的活性部位,值得进一步开发利用。

核磁共振技术在食用菌多糖结构分析中的作用

食用菌多糖具有多种生物活性。研究多糖的结构有助于揭示多糖的构效关系。多糖的结构包括一级结构和空间结构。阐述了核磁共振波谱技术(尤其是2D-NMR)在多糖结构鉴定中的作用,提供了多糖链中单糖残基的组成、单糖残基的连接位置和连接顺序、糖环构型和糖苷键构型等结构上的信息。核磁共振波谱技术在多糖结构分析中将发挥着越来越重要的作用。

毛头鬼伞富铬深层发酵条件的优化

在筛选出最佳发酵培养基的基础上,对毛头鬼伞富铬深层发酵培养条件进行了优化.以有机铬产量为主要指标,筛选出的最佳发酵培养条件为:CrCl3·6H2O的添加量为200mg/L,培养基初始为自然pH,接种量为8%～10%,装液量为80mL/250mL三角瓶,转速100r/min,26℃恒温培养5d,有机铬的产量达1597.88μg/100mL发酵液,铬富集率达9.09%.

七种食(药)用菌的超滤分级分离

运用超滤技术对7种食（药）用菌多糖水提液进行分级分离,将提取物分成〉5×10^5Da、1×10^5～5×10^5Da、1×10^4～1×10^5Da、〈1×10^4Da 4个不同分子量段的部分,计算不同部分的得率,探讨超滤分离食（药）用菌多糖的可行性。

金耳多糖的分离纯化及其化学结构的研究

金耳(Tremella aurantialbaBandoni et Zang)是我国稀有的珍贵食用菌和药用菌,具有化痰、止咳、定喘、调气、平肝阳之功效。多糖作为金耳的主要生理活性成分之一,具有增强免疫、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗血栓和抗氧化等作用。但由于技术手段的落后,金耳多糖的化学研究比较滞后,其药理活性的研究也主要集中于粗多糖的研究,对均一多糖的化学结构分析和生物活性还很少涉及,这种状况对合理开发和利用金耳多糖产品造成很大影响。该研究对金耳子实体多糖进行了提取、分离纯化、结构鉴定、分子修饰和生物活性研究,为更好地开发金耳资源提供可靠的理论依据。

北虫草醇提物体外抗肿瘤和抗病毒活性的比较研究

采用体外人肠腺癌细胞株SW620和人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖抑制试验模型和抗病毒（抗流感甲型病毒和抗疱疹病毒）的筛选模型,对北虫草[Cordyceps militaris（L.ex）Link]七个菌株（CM1-CM7）的菌丝体醇提物（CME1-CME7）的抗肿瘤、抗病毒活性进行了比较研究。抗肿瘤试验表明,在中、高浓度时（50μg/mL、200μg/mL,七个醇提物CME1~CME7对SW620和MCF-7的增殖均有一定的抑制活性,其中CME7活性最高（66.0±2.3）%,与阳性对照5-Fu（69.1±4.5）%抑制活性相当。抗病毒试验表明,七个菌株的醇提物中,仅CME7和CME6具有抗流感甲型病毒活性,半数有毒浓度（TC50）分别为288.68μg/mL和〉500μg/mL,选择指数（SI）分别为2.23和〉3.87;七个菌株的醇提物均未表现出对疱疹病毒HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ的抗性。因此,在七个菌株中,CME7的抗肿瘤活性和抗病毒活性均较好,有必要对其进一步研究研究和开发。

金耳醇提物体外抗氧化和PC12损伤修复作用的比较研究

采用化学发光法和H2O2诱导PC12氧化损伤修复模型,对三种金耳菌丝体醇提物的抗氧化活性及PC12细胞氧化损伤的修复作用进行研究与比较。结果显示:三种醇提物均有良好的抗氧化活性,其中YK抗氧化活性最高,对H2O2清除率的IC50为28.66μg/mL,YK在相同浓度下对H2O2自由基的清除作用高于对超氧自由基的清除作用;三种醇提物对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤都有修复作用,其中YK修复效果最好,当浓度为10μg/mL,50μg/mL和200μg/mL时,修复率分别为30.8%,40.6%和56.1%,呈现明显的浓度依赖性。