大孔纤维素亲和膜在生化制剂纯化中的应用

目的：采用膜亲和色谱这一新型纯化分离手段，结合膜分离过程的高速度和亲和吸附的高灵敏度进行水系溶液中内毒素的吸附去除工作，以求建立一种方便实用的内毒素去除方法。方法：选取优质滤纸为原料，交联后制成纤维素膜，分别用静态和动态两种方法制备出含有组氨酸和粘多菌素的亲和膜。结果：以组氨酸为配基的亲和膜，其吸附效果可使滤液中的内毒素水平低至０５ＥＵ·ｍｌ－１以下，可满足一般医药卫生方面的要求；以粘多菌素Ｂ为配基的亲和膜，其吸附能力好于组氨酸亲和膜，对自来水和药物中天然内毒素的去除率在９５％以上。结论：亲和膜堆对内毒素的去除效果与文献报道的柱亲和色谱法相当。但在成本、效率。

犬纤维化肝贮脂细胞的分离、培养和鉴定

改良一种分离肝贮脂细胞（Ｉｔｏ）的方法。结扎犬胆总管，制备肝纤维化模型；用 ６０ ｇ／ Ｌ聚蔗糖校正比重为１．０７７的淋巴细胞分离液，使其比重为１．０５３，采用单层密度梯度离心法分离犬纤维化肝贮脂细胞。结果：所获得的该种细胞在３２８ ｎｍ紫外光激发下出现自发荧光，呈ｄｅｓｍｉｎ免疫组化阳性染色，电镜观察显示其胞质中有较多脂滴，细胞核形状极不规则。结论：分离所得的细胞为贮脂细胞；本工作简化了贮脂细胞的分离方法，使其既方便又经济实用，分离效率也较高。

高效液相测定胆汁结合胆汁酸方法的改进

液相色谱法(HPLC)测定胆汁酸具有分离效能高、分析速度快、流动相可选择范围宽、灵敏度高及仪器化程度高优点[1].既往的实验方法常常因为分离时间较长或条件要求高,限制了大批样品测定的临床应用.我们通过综合既往胆汁样品处理方法以及测定条件,调整流动相pH值、极性、柱温等,缩短分离时间,为胆汁样品的大批量测定创造条件.

胃癌组织端粒合成酶活性及其临床意义

目的测定胃癌组织中的端粒会成酶活性，阐明端粒合成因与胃法之间的关系。方法切取22例胃癌患者的肿瘤组织及癌分组织，提取端粒合成酶来合成端位的重复片断，用PCR方法扩增，再通过ELISA的方法测定端粒片断含量，以了解端位合成酸的活性．结果胃癌组织的端粒合成酶活性明显高于癌旁组织；胃癌的病期越晚其端粒合成酶活性越高；有淋巴结转移的胃癌组织其端粒合成酶活性明显高于无淋巴结转移者；胃癌分化程度越低，端粒合成酶活性越高．结论端粒合成酶在胃癌组织中的活性明显升高，其活性高低可以作为胃癌病期的辅助诊断，胃癌端粒合成酶活性的测定对胃癌的治疗有指导意义。

离散因子/肝细胞生长因子cDNA转染对肝癌SMMC7721细胞生长和转移的影响

目的 通过离散因子／肝细胞生长因子（ｓｃａｔｔｅｒ ｆａｃｔｏｒ／Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ＳＦ／ＨＧＦ）ｃＤＮＡ转染肝癌ＳＭＭＣ７７２１细胞来探讨ＳＦ／ＨＧＦ对肝癌生长和转移的影响。方法 用脂质体法进行基因转染，以ＥＬＩＳＡ和ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＳＦ／ＨＧＦ及其受体ｃ－ｍｅｔ的表达，通过生长曲线、划痕实验比较转染前后细胞的增长状况及细胞的运动能力。以转染前后细胞分别接种裸鼠，观察移植瘤的生长及转移情况。结果 转染后细胞表达ＳＦ／ＨＧＦ的量为６９４ｐｇ／ｍｌ，其受体ｃ－ｍｅｔ量未见明显变化；转染后细胞增殖明显加快，运动能力增强，并伴明显的形态学变化。初步动物实验显示转染后细胞生长较快，瘤组织中有瘤栓形成，并在肺内发现转移灶。结论 ＳＦ／ＨＧＦ在肝癌细胞中的高表达能促进肝癌细胞生长、侵袭及转移。