儿科常见病毒感染实验诊断方法的新进展

病毒是儿科临床感染性疾病的主要病原。现代分子生物学、免疫学等学科的发展为病毒学的实验诊断不断带来创新。在病毒抗原和核酸检测方面，聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法得到进一步的使用，并发展巢式ＰＣＲ和定量ＰＣＲ，探索ＰＣＲ与酶联免疫吸附试验、免疫荧光抗体测定和核酸杂交技术的结合及用单克隆抗体快速检测特异性病毒抗原。在测定血清抗体方面，主要是在抗原的选择、制备方面有新的改进。

地塞米松、甲状腺素对大鼠胎肺表面活性物质影响及机制的初步研究

本文用大鼠胎肺组织块无血清培养观察地塞米松（Ｄｅｘ）、甲状腺素（Ｔ＿４）对大鼠胎肺表面活性物质（ＰＳ）的作用特点。Ｄｅｘ效应在胚胎１８、１９天最显著，并随Ｄｅｘ浓度增加而增高，但高浓度Ｄｅｘ对胎肺糖皮质激素受体（ＧＣＲ）有向下调节作用。Ｔ＿４可促进ＰＳ增加，并与Ｄｅｘ有协同作用，对胎肺ＧＣＲ有向上调节作用。本文为临床合理应用Ｄｅｘ或联合Ｔ＿４预防新生儿呼吸窘迫综合征提供实验基础。

柴芩清热微型灌肠剂对腺病毒抑制作用的研究

目的在于探索治疗小儿病毒性呼吸道感染的药物。本研究采用细胞培养、同位素掺入的方法 ,观察柴芩清热微型灌肠剂对腺病毒的作用。结果表明 ,该制剂对多种型别的腺病毒均有一定的抑制作用 ,有效剂量为 6 .6 mg/ L ,高浓度的药物对宿主细胞有毒性作用 ,并明显抑制 Hela细胞 DNA的合成。

大豆磷脂联合维生素E预防大鼠肺出血和水肿的研究

本实验应用雄性大鼠静脉注射肾上腺素造成肺出血、水肿（PH、PE）模型，以及应用静脉注射大豆磷脂（PC）联合维生素E（VE）进行预防的研究。结果显示：PC＋VE能降低死亡率，降低血清脂质过氧化物（LPO），支气管肺泡灌洗液（BALL）中蛋白质及磷脂，肺指数；肺组织切片中肺水肿、出血明显改善，其效果优于单独应用PC。

黄芪对缺血大鼠心肌钙及脂质过氧化物的影响

利用异丙肾上腺素造成大鼠心肌缺血模型，观察黄芪对红细胞、心肌钙及脂质过氧化物的影响，发现黄芪能减轻由于缺血引起的心肌细胞、心肌组织和红细胞内的钙积聚，并能保护红细胞膜钙泵功能；能增加心肌组织超氧化物歧化酶的活力，减少氧自由基损伤。提示黄芪可减轻缺血心肌细胞内钙超载，达到保护心肌的作用。

上海地区急性呼吸道感染患儿病毒病原学研究

目的 探讨上海地区近 5年来急性呼吸道感染患儿病毒病原和支原体病原感染状况。方法 采用系列呼吸道病毒单克隆抗体桥联酶标法或聚合酶链反应技术 ,对上海地区 5年中的急性呼吸道感染患儿 5 496例标本进行病毒学或肺炎支原体 -DNA检测。结果 检出病毒阳性 2 2 5 7例 ,阳性率 41 0 7%以上 ,肺炎支原体 -DNA检出率 16 2 % (5 72 / 35 38)。结论 连续 5年中上海地区有 2次急性呼吸道病毒感染发病高峰 (1994年和 1998年 ) ,病毒性感染流行季节主要在每年 1～ 2月和 11～

新生儿血清维生素E低值的临床探讨:附4595例测定值分析

4595例新生儿血清维生素E(VE)测定发现,VE低值(<2.32μmol/L)473例(11.5％),早产、足月高危儿(窒息、肺炎)VE低值发生率显著高于足月正常儿。本文提出,宜将VE低值视作亚临床型VE缺乏症;将VE低值高发群体视作潜在性亚临床型VE缺乏症。这些婴儿于出生后1～3月内,必须给予适量的VE补充。

地塞米松和肺成纤维细胞对大鼠胎肺表面活性物质合成的影响

为提高ＤＥＸ对新生儿呼吸窘迫综合征（ＮＲＤＳ）的防治，本文研究了地塞米松（ＤＥＸ）促进肺表面活性物质（ＰＳ）合成的作用机制。用分离培养的２０天大鼠胚胎肺泡Ⅱ型细胞为材料，观察了单独用ＤＥＸ、用与不用ＤＥＸ刺激后的成纤维细胞条件培养液（ＤＥＸＦＣＭ、ＦＣＭ）对肺泡Ⅱ型细胞ＰＳ中磷脂合成及特异性肺表面活性物质蛋白质ＳＰＢ、ＳＰＣｍＲＮＡ表达的影响。结果表明，ＤＥＸ本身及未用ＤＥＸ刺激的ＦＣＭ对肺泡Ⅱ型细胞的上述三种指标均没有影响，而ＤＥＸ刺激后的ＤＥＸＦＣＭ使这三个指标有不同程度的增加效应。

儿童营养性贫血流行病调查及干预措施

铁缺乏是最常见的营养缺乏症及营养性贫血的重要病因,已列为我国儿童四大常见病之一。重点进行防治,并在铁的微量实验室指标、铁缺乏的分期诊断、母婴铁代谢、缺铁的非血液学表现、动物模型等方面作了较深入研究,推动了防治研究的深化。现就国内营养性缺铁性贫血的流行病调查、群体普查指标及标准、干预措施作简略介绍。一、流行病调查近年由于对本病的重视,全国各地贫血患病率调查众多。因地区、人群、筛查标准的不同,患病率可有高低,全国性调查中儿童营养性贫血率在40%左右,农村高于城市。

急性白血病多药耐药基因检测及其临床意义

应用原位杂交方法检测多药耐药基因（Ｍｄｒｌ）表达，观察其与临床耐药的关系，探讨Ｍｄｒｌ检测的临床应用价值。方法自行构建ＲＮＡ探针直接在骨髓涂片上行原位杂交，检测４５例急性白血病ＭｄｒｌｍＲＮＡ表达。对部分高表达者调整临床治疗方案。结果复治组中Ｍｄｒｌ阳性占８８％，初治组４２．８％，有极显著差异。经标准化疗２个疗程后初治组中Ｍｄｒｌ阳性者完全缓解率（ＣＲ）２２％，阴性者ＣＲ６３．６％，Ｐ＜０．００１。对Ｍｄｒｌ阳性病例通过调整化疗方案或加用逆转剂可改善预后。结论Ｍｄｒｌ高表达确为白血病不良预后的主要指标，原位杂交检测Ｍｄｒｌ表达对临床治疗有指导意义。

多药耐药基因Mdr1 RNA探针的构建及初步临床应用

检测 Mdrl基因表达水平可预测白血病化疗效果 ,用原位杂交的方法可检测 Mdrl在单个细胞的表达水平。本文用Rt- PCR的方法获得了一段特异的 c DNA片段 ,将其克隆到 PGEM4Z载体中 ,经 DNA序列分析证明与文献报道一致。采用地高辛素 (DIG) RNA标记试剂盒制备反义 RNA探针 。

血小板源生长因子BB对19d早产鼠肺表面活性物质基因表达的影响

目的 探讨血小板源生长因子BB(PDGF BB)对未成熟肺肺表面活性物质蛋白质 (SP)基因表达的影响及肺成纤维细胞在其中的作用。方法 选 19d早产大鼠为研究对象 ,用逆转录 PCR(RT PCR)方法首先观察不同浓度的PDGF BB对肺组织块SPmRNA表达的影响 ,而后通过肺成纤维细胞和Ⅱ型上皮细胞的分离、培养 ,进一步了解PDGF BB在细胞水平的作用机制。结果 3种浓度的PDGF BB( 10、2 0、4 0ng/ml)对肺组织内SP BmR NA的表达有上调作用 ,4种剂量对SP CmRNA的表达均无明显影响 ;2 0ng/mlPDGF BB、未经PDGF BB刺激的成纤维细胞中介培养液 (FCM)对Ⅱ型上皮细胞SP B、SP CmRNA表达无直接的影响 ,经PDGF BB刺激后的FCM(P)能促进其SP BmRNA的表达。结论 PDGF BB能通过成纤维细胞介导肺Ⅱ型上皮细胞SPmRNA的表达而促进早产鼠肺的成熟。

Ru486对胎鼠肺Ⅱ型上皮细胞的影响

为研究糖皮质激素的可能作用位点，以分离培养的肺Ⅱ型上皮细胞为主要材料，通过板层小体染色的方法，观察Ｒｕ４８６对该细胞的影响。结果显示，无血清培液中Ｒｕ４８６１０^（－４）ｍｏｌ／Ｌ至培养第１ｄ或１０^（－５）ｍｏｌ／Ｌ培养至第３ｄ时均使Ⅱ型细胞出现坏死现象，但加入地塞米松（ＤＥＸ）１０^（－６）ｍｏｌ／Ｌ４ｈ后再用Ｒｕ４８６则坏死现象消失。由此从形态学角度证实了肺Ⅱ型上皮细胞具有糖皮质激素受体。Ｒｕ４８６是通过阻断该受体发挥作用的。

胰岛素样生长因子基因在人淋巴细胞表达的探讨

目的探讨胰岛素样生长因子（ＩＧＦｓ）多肽、受体和结合蛋白在免疫调节和免疫发育中的意义。方法采用逆转录聚合酶链反应技术在ｍＲＮＡ水平观察正常成人和新生儿淋巴细胞静息和ＰＨＡ刺激不同时间ＩＧＦｓ及其受体，结合蛋白基因的表达。结果在静息和活化的成人和新生儿淋巴细胞均有ＩＧＦ－Ⅰ、ＩＧＦ－ⅠＲ、ＩＧＦ－ⅡＲ、ＩＧＦＢＰ－２、３、４、６基因表达，并随ＰＨＡ刺激时间的延长表达水平有所变化；ＩＧＦＢＰ－５ｍＲＮＡ在活化的淋巴细胞表达；ＩＧＦ－Ⅱ、ＩＧＦＢＰ－ⅠｍＲＮＡ仅在新生儿淋巴细胞检测到。结论ＩＧＦｓ可能通过参与淋巴细胞的增殖、分化，影响免疫系统的功能和免疫发育过程。

卵巢癌细胞分泌转化生长因子－β1的雌激素调节及其与细胞增殖的关系

目的：观察在不同浓度的雌激素作用下，卵巢癌细胞转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）的分泌调节及其与细胞增殖的关系。方法：利用Ｗｅｓｔｅｒｎ斑点杂交与３Ｈ－胸腺嘧啶核苷酸掺入率测定技术，检测体外不同浓度（１０－１３ｍｏｌ／Ｌ～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）的１７－β雌二醇（Ｅ２）作用下，卵巢癌ＡＯ与３ＡＯ细胞株ＴＧＦ－β１的分泌量及其细胞增殖的情况。结果：ＡＯ细胞在Ｅ２的作用下，ＴＧＦ－β１的分泌量及细胞增殖状况均呈剂量浓度反应，在低浓度（１０－１３ｍｏｌ／Ｌ）和高浓度（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）的Ｅ２作用下，ＴＧＦ－β１的分泌量明显增加，而细胞增殖明显受抑制，两者呈负相关。３ＡＯ细胞在同样处理下，ＴＧＦ－β１的分泌与对照组相比无明显改变，而细胞增殖则呈剂量浓度反应，两者无明显相关性。结论：ＡＯ细胞存在ＴＧＦ－β１的自分泌环调节机制，在体外受到雌激素的调节，该机制可能参与了细胞的增殖调节。而同样条件下，３ＡＯ细胞的ＴＧＦ－β１的自分泌不受雌激素的调节。

不同通气方式对小儿心内直视手术期间Crs改变的初步观察

目的 小儿心内直视手术麻醉期间应用ＰＥＥＰ和转流期间肺泡低压，寻找此类手术麻醉中改善肺表面活性物质（ＰＳ）生成和呼吸系统总顺应性（Ｃｒｓ）的途径。方法 ４０ 例左向右分流型先心病患儿随机分为４ 组，Ⅰ组为ＩＰＰＶ 通气组，Ⅱ组为ＰＥＥＰ应用组，Ⅲ组为ＩＰＰＶ通气且转流期间肺泡低压组，Ⅳ组为ＰＥＥＰ及转流期间肺泡低压组。测定各组各时点的Ｃｒｓ及ＰＳ生化指标。结果 Ⅰ组手术结束时Ｃｒｓ、饱和磷／总磷及饱和磷／总蛋白比值显著低于其他三组，同时显著低于诱导后基础值（Ｐ＜ ０．０５）。结论 认为此类手术应用ＰＥＥＰ和转流期间肺泡低压有利于改善患儿的呼吸功能及ＰＳ生成。

应用高频通气和吸入一氧化氮治疗实验性胎粪吸入

目的 :评价实验性胎粪吸入 (MAS)联合应用吸入一氧化氮 (iNO)和高频通气(HFV)或常频通气 (CMV)的治疗效果。方法 :新西兰白兔气管切开插管常频机械通气 ,气道内滴入胎粪 3～ 4ml/kg约 30min后出现MAS模型 ,表现为肺顺应性 (Cdyn)下降 >30 % ,动脉血氧分压 (PaO2 ) <10kPa,随机分为对照组 (机械通气 )和治疗组 (机械通气 +iNO) ,每组中先用CMV 3h后改HFV 3h (CMV -HFV) ,或先用HFV 3h后改CMV 3h (HFV -CMV)。结果 :在治疗开始的 3h ,对照组HFV -CMV和治疗组HFV -CMV以及CMV -HFV的氧合指数 (OI)均有显著下降 (P<0 0 5 ) ,在继续治疗的 3h (6h) ,对照组CMV -HFV的OI无任何改善 ,对照组HFV -CMV的OI明显恶化 (P>0 0 5 ) ,而治疗组CMV -HFV和HFV -CMV的OI较治疗前均有改善 ,但无统计学意义。结论 :治疗实验性胎粪吸入联合应用iNO和CMV或iNO和HFV对早期氧合的改善较单用CMV更为有效。

小儿心内直视手术前后肺表面活性物质的变化及临床意义

体外循环心内直视手术后肺部并发症的发生率较高,尤其是左向右分流伴有肺动脉高压的病儿,心内畸形纠治后肺不张、肺水肿甚至呼吸窘迫综合症临床常见,已经肯定肺表面活性物质(PS)在维持正常的呼吸功能方面有极其重要的作用。为了解先天性心脏病小儿心内直视手术前后肺表面活性物质的变化及其与肺泡死腔的关系,本文研究测定围体外循环期PS的变化并探讨其与动脉一呼气末二氧化碳分压差(Pa—ETCO_2)的关系。资料与方法全组46例,男26例,女20例。