骨髓增生异常综合征流行病学研究进展

<正>骨髓增生异常综合征（MDS）是一组造血干细胞克隆性疾病,现在人们对MDS的发病因素有了一定的认识。但各家报道不一,为了便于对MDS的发病情况、危险因素及预后的了解,现作一综述。1 年龄发病率 过去认为MDS是一种少见病,多发于老年人,儿童和青少年少见。但研究结果显示并非完全如此。Williamson等以医院为基础,调查了英国MDS的发病率,得出粗的年发病率12.6/10~5,虽然比估计的发病率高得多,但这个数字仍然可能低估,因为部分病人可能无症状、病情稳定或死于与MDS无关的其它原因而被漏掉;各年龄组的年发病率不同,MDS发病率随着年龄的增加在上升。德国研究得出MDS年发病率4/10~5,>70岁者MDS是急性髓性白血病（AML）的3倍。国内调查了1986～1988年天津地区MDS的年发病率0.25/10~5。发病率是否逐年上升,各家报道不一。Radund等15年的研究中没有得出MDS发病率上升的结论,他认为>

双耐药基因导入脐血干/祖细胞降低联合化疗骨髓毒性作用的临床前研究

目的 探讨转染醛脱氢酶基因 (ALDH3)和多药耐药基因 (mdr 1)的人脐血CD3 4+ 细胞能否同时增强对活性环磷酰胺 (4 HC)和mdr 1基因靶药的抗性。方法 构建含ALDH3和mdr 1双耐药基因的逆转录病毒表达质粒G1Na ALDH3 IRES MDR1,经LipofectAMINE介导转染包装细胞 ,采用含 4 HC和长春新碱 (VCR)的培养基克隆选择后收集重组病毒上清于单向型GP +E86与双嗜型PA317包装细胞行乒乓交互感染 ,将含ALDH3和mdr 1双耐药基因重组病毒的上清在细胞生长因子刺激下重复感染经免疫磁珠分离系统 (MACS)纯化后的人脐血CD3 4+ 细胞 ,用PCR、RT PCR、Southernblot、Northernblot、FACS和MTT等方法检测外源ALDH3与mdr 1基因在CD3 4+ 细胞中的转移和表达。结果 MACS分离纯化后的人脐血CD3 4+ 细胞纯度平均达 91% ,回收率为 72 % ,含双耐药基因重组病毒的上清最高滴度为 6 .5× 10 5CFU/ml,应用集落计数、PCR和FACS方法测定基因转导效率分别为 18.0 %、2 0 .0 %和16 7% ,未检测到辅助病毒存在 ,有P170功能的细胞占 16 0 % ,经双耐药基因修饰的脐血CD3 4+ 细胞对 4 HC的IC50 较对照组提高 3.5倍 ,对VCR和柔红霉素的IC50 较未转染细胞分别高 6 .8和 5 .5倍。结论 逆转录病毒载体介导双耐药基因转导脐血造血干

DNA修复蛋白MGMT基因的克隆及转导脐血CD34^+细胞后耐药特征的研究

目的 增强脐血 CD34+造血细胞对化疗药物的耐药表型 ,探讨逆转录病毒介导的基因转移效率和耐药基因特性 ,以及在脐血造血干细胞保护性基因治疗中的作用和意义。方法 应用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)从人肝组织中获得编码六氧甲基鸟嘌呤 - DNA-甲基转移酶 (O6 - methylguanine- DNA-methyltransferase,MGMT) c DNA;利用基因重组技术 ,将其克隆于 p GEM- T质粒载体并构建了逆转录病毒载体 G1Na- MGMT;应用脂质体 L ipofect AMINE基因转移法将后者导入 GP+ E86和 PA317病毒包装细胞 ,以卡氮芥 1,3- Bis(2 - Chloroethyl) - 1- Nitrosourea(BCNU)加压筛选后的阳性克隆上清经乒乓效应后继而感染脐血 CD34+ 细胞。应用 PCR,Southern Blot,RT- PCR,Northern blot,Western Blot及 MTT法检测 MGMT基因在脐血 CD34+ 细胞中的转移和表达。结果 酶切鉴定及 DNA测序证实了 MGMT c DNA克隆的正确性 ,脂质体介导方法成功将其导入病毒包装细胞 ,BCNU加压筛选和乒乓感染法使病毒效价达1.6× 10 6 CFU/ml,逆转录病毒载体介导的 MGMT基因在脐血造血干细胞中获得了有效转移和表达。转MGMT耐药基因脐血造血干 /祖细胞对 BCNU的抗药性较对照组提高了 4倍。结论 DNA修复蛋白MGMT基因的克隆并导入脐血造血干 /祖细胞可?