X线照射卵巢研究雌激素与免疫功能相关性的动物模型的建立

采用X线局部照射大鼠的双侧卵巢,建立了雌激素缺乏的大鼠动物模型。实验发现X线照射卵巢三个月后大鼠血清雌二醇(E_2)含量明显降低,大鼠淋巴细胞的增殖及其产生白细胞介素2(IL—2)的能力升高。统计学分析表明,大鼠血清E_2含量与大鼠淋巴细胞产生IL—2的能力呈负相关。

HSA基因转染小鼠EL-4淋巴瘤细胞以提高其免疫原性的研究

目的探讨ＨＳＡ提供的协同刺激信号能否增强肿瘤细胞的免疫原性。方法将ＨＳＡｃＤＮＡ导入小鼠淋巴瘤细胞ＥＬ－４中，通过含Ｇ４１８的ＲＰＭＩ１６４０培养基将表达ＨＳＡ分子的ＥＬ－４细胞（ＨＳＡ＋ＥＬ－４）筛选出来。用混合淋巴细胞肿瘤细胞培养（ＭＬＴＣ）的方法观察ＨＳＡ＋ＥＬ－４细胞免疫小鼠脾细胞的增殖应答反应和ＣＴＬ杀伤活性。Ｃ５７ＢＬ／６小鼠接种野生型ＥＬ－４细胞后７ｄ，给予灭活的ＨＳＡ＋ＥＬ－４细胞瘤苗或联合低剂量ＩＬ－２治疗，观察荷瘤小鼠皮下肿瘤生长及存活期情况。结果ＨＳＡ＋ＥＬ－４细胞免疫小鼠的细胞对ＨＳＡ＋ＥＬ－４或ＥＬ－４瘤细胞刺激增殖反应及对亲本瘤细胞ＥＬ－４的杀瘤活性明显高于ＥＬ－４ｖ细胞（空载体转染的ＥＬ－４细胞）免疫小鼠脾细胞的。ＨＳＡ＋ＥＬ－４细胞作为瘤苗，早期治疗荷瘤小鼠，可延缓肿瘤的生长，延长荷瘤小鼠的存活期，尤其与低剂量ＩＬ－２联合应用时治疗效果更好。结论协同刺激分子ＨＳＡ在肿瘤细胞上的表达可增强瘤细胞的免疫原性；表达ＨＳＡ分子的肿瘤细胞可在小鼠体内诱导出有效的抗肿瘤免疫应答反应。

理化等因素对肿瘤性免疫抑制因子活性的影响

理化等因素对肿瘤性免疫抑制因子活性的影响司秋生，郑秀娟，黄辉（上海医科大学基础医学院免疫学教研室）我们曾报道［１］，肿瘤细胞培养上清液中含有一类免疫抑制因子（ＴＤＳＦ），能显著抑制淋巴细胞对致分裂原和抗原的应答反应，抑制ＩＬ－２产生和ＩＬ－２表达以及...

持续电针刺激调节创伤大鼠脾淋巴细胞体外增殖反应的动态观察

动态观察了持续电针刺激对创伤大鼠脾淋巴细胞体外增殖反应的调节作用。结果显示：创伤后第１、３、５、７天大鼠脾淋巴细胞在体外对ＣｏｎＡ的增殖反应明显降低，第３天达最低水平，第１０天恢复正常；创伤后不同天数的大鼠血清对正常小鼠脾淋巴细胞体外增殖反应具有相应的抑制作用；持续电针刺激“足三里”等穴位不仅能防止创伤大鼠脾淋巴细胞增殖率的下降，而且可有效地消除血清的抑制作用。提示：持续电针刺激可以改善创伤大鼠的免疫功能。

促丝裂原活化淋巴细胞诱导抗双链DNA抗体生成

抗双链DNA（ds—DNA）抗体是系统性红斑狼疮（SLE）的特征性和致病性抗体，但该自身抗体的诱生机理至今不明。我们用刀豆蛋白（ConA）和脂多糖（LPS）活化的小鼠淋巴细胞为自身抗原，分别免疫同系小鼠，均能诱导出IgG类抗ds—DNA抗体，并且小鼠肾脏有IgG类免疫复合物沉积形成。结果提示活化淋巴细胞的核内成分是诱生抗ds—DNA抗体的自身抗原。

IL－10mRNA在SLE患者外周血单个核细胞上的表达

采用随机引物标记法将ＩＬ－１０ｃＤＮＡ标记地高辛甙元（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）作为探针，用点杂交检测正常人和ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ表达ＩＬ－１０ｍＲＮＡ量，经图象分析和计算机处理发现ＳＬＥ患者ＩＬ－１０ｍＲＮＡ表达量明显高于正常对照组（０．３３５５±０．０９２／０．１３６２±０．０５３５；Ｐ＜０．００１）。同时我们用ＰＨＡ和ＬＰＳ体外激活正常人ＰＢＭＣ，发现激活的ＰＢＭＣ表达ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的量显著高于未经激活的对照组（０．４３８２±０．０７０７／０．１３６２±０．０５３５；Ｐ＜０．００１）。由此推论ＳＬＥ患者体内单个核细胞在体内已被激活，且通过产生ＩＬ－１０来调节患者免疫应答，这一作用可能与ＳＬＥ患者病情的发展有一定的关系。

透析膜和内毒素对尿毒症患者单个核细胞白细胞介素-1β产生的影响

目的：研究不同透析膜和内毒素对尿毒症患者外周血单个核细胞白细胞介素１β（ＩＬ１β）基因表达和蛋白质合成的影响。方法：细胞和不同透析膜孵育后采用原位杂交检测ｍＲＮＡ水平，单个核细胞培养后酶联免疫吸附试验法测定细胞总蛋白质水平。结果：不同透析膜孵育后的单个核细胞在未用内毒素刺激情况下ＩＬ１βｍＲＮＡ水平有显著差别，但蛋白质合成量无差异，其中正常人仅有极微量ＩＬ１β合成；内毒素刺激下的单个核细胞ＩＬ１β合成量明显高于未刺激组，且铜仿膜孵育后的细胞明显高于聚砜膜和对照组。结论：正常人单个核细胞ＩＬ１β合成需双信号诱导，在尿毒症患者中内毒素和透析膜对单个核细胞ＩＬ１合成有协同作用。

FBL-3肿瘤抗原的研究:Ⅱ.从多肽池中分析肿瘤抗原

在抗肿瘤免疫效应中细胞毒T淋巴细胞(CTL)是通过识别肿瘤细胞MHC I类分子结合的肿瘤源性多肽.为分析肿瘤细胞的抗原性及肿瘤抗原的多肽性质,本文选用FBL-3肿瘤细胞,用pH3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液间隔24～36小时多次酸洗肿瘤细胞,以获得MHC I类分子结合的多肽,并分析酸洗液中多肽混合物的肿瘤抗原性,以及RP-HPLC分离的部分收集液多肽的肿瘤抗原性,为FBL-3肿瘤细胞抗原的确定提供基本数据.结果表明:酸洗法能有效获得肿瘤细胞MHC I类分子相关的多肽抗原,肿瘤细胞多肽抗原的分离、纯化、HPLC分析以及抗原性鉴定是肿瘤抗原性确定的一个重要方法.

天然DNA和细胞因子对系统性红斑狼疮患者淋巴细胞体外分泌抗双链DNA抗体的影响

检测６例活动期、６例缓解期系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１０例正常人血清和外周血单个核细胞（ＦＢＭＣ）自发及经天然ＤＮＡ（ｎＤＮＡ）、重组白介素２（ｒＩＬ－２）和重组γ干扰素（ｒＩＦＮ－γ）锈导后分泌ＩｇＧ类抗双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）特异性抗体水平，观察到活动期患者血清中含量和自发分泌量显著高于缓解期，后者又显著高于正常人，且体外细胞分泌水平与血清中含量密切相关（ｒ＝０．９８８２）。ｎＤＮＡ能特异地激发ＳＬＢ患者的ＰＢＭＸＣ分泌抗ｄｓＤＮＡ抗体，但对正常人无作用。ｒＩＬ－２和ｒＩＦＮ－γ皆能增强ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ产生抗ｄｅＤＮＡ抗体。ｎＤＮＡ和ｒＩＬ－２联合应用时对活动期患者ＰＢＭＣ分泌抗ｄｓＤＮＡ抗体有协同作用。作者未发现重组白介素６（ｒＩＬ－６）对抗ｄｓＤＮＡ抗体分泌的影响。

α－CD_3单克隆抗体对肿瘤特异性T细胞的扩增和杀瘤活性的影响

为寻找更有效的肿瘤过继性免疫治疗的方案，用α－ＣＤ３单克隆抗体（单抗）激活ＦＢＬ－３红白血病肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞获取肿瘤特异性Ｔ细胞，并观察α－ＣＤ３单抗对肿瘤特异性Ｔ细胞的增殖、杀瘤活性及表型的影响。体外实验结果显示，免疫小鼠脾细胞经α－ＣＤ３单抗激活后，采用低剂量ＩＬ－２即可维持其长期高度的、持续的增殖；又培养过程中α－ＣＤ３单抗持续存在可大大促进其对肿瘤的特异性杀伤。细胞分型分析结果也支持了α－ＣＤ３单抗的持续存在对维持肿瘤特异性Ｔ细胞的抗瘤活性具有很重要的意义，是肿瘤过继免疫疗法中颇有前景的治疗方案。

补肾复方下调老年大鼠激活诱导的T细胞凋亡

目的 研究补肾复方延缓衰老的免疫学机制。方法 采用电镜、ＤＮＡ凝胶电泳及ＴＵＮＥＬ标记的流式细胞仪分析技术，对激活诱导的Ｔ细胞凋亡进行定性、定量分析。结果 老年大鼠对照组细胞凋亡的百分率为４７．０％，年龄大鼠组为２２．２％（Ｐ＜０．０１）；补肾组为３７．２％，与老年大鼠对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论 老年大鼠激活诱导Ｔ细胞凋亡的敏感性增高；补肾复方能降低激活诱导的老年大鼠Ｔ细胞凋亡，提示下调激活诱导Ｔ细胞凋亡可能是补肾延缓衰老的免疫学机制之一。

FBL-3肿瘤抗原的实验研究:Ⅰ.抗原的预测及合成多肽抗原性的验证

T细胞在肿瘤免疫中发挥着重要作用,它是通过T细胞抗原受体(TCR)识别肿瘤细胞表面由MHC分子呈递的肿瘤源性多肽,其中细胞毒T淋巴细胞(CTL)是通过识别肿瘤细胞MHC I类分子结合并呈递的多肽。研究表明:CTL识别的多肽常由8～9个氨基酸组成,多肽的呈递受MHC分子等位型的限制,不同的MHC分子具有不同的等位型特异的多肽结合基序(peptidebinding motif)。FBL-3是B6小鼠(H-2~b)源由Friend病毒诱导的小鼠白血病细胞,灭活FBL-3免疫B6小鼠可诱导FBL-3特异CTL产生,从而建立FBL-3特异的免疫应答,保护小鼠免受FBL-3的致瘤性。因此,实验中根据H-2D^b多肽结合基序和Friend病毒gag基因序列,预测出7个可能编码FBL-3抗原多肽的片段。根据预测的结果人工合成了7个九肽(gag1-gag7)。实验结果显示:合成多肽免疫B6小鼠可诱导多肽特异的CTL产生,但用体外实验方法不能诱导初次免疫应答;FBL-3特异CTL可以杀伤gag3,gag5致敏的靶细胞EL-4(H-2~b),但体内实验表明gag3,gag5不象FBL-3一样,它们体内免疫后不能建立有效的抗FBL-3肿瘤免疫效应。表明预测的7个多肽可能不是FBL-3的肿瘤抗原。文中讨论了多肽抗原性预测的复杂性和可能的对策。

小鼠白细胞介素-3的制备及其检测条件的分析

从小鼠白细胞介素-3(IL-3)分泌细胞株WEHI-3获取了IL-3,同时用小鼠IL-3依赖细胞株32-D检测IL-3和滴定标本中IL-3的活性单位,并对检测条件进行了探索。结果表明,WEHI上清中含高活性IL-3,不含IL-2,其最佳收集条件是5×10~5/ml细胞浓度培养48h。32-D细胞生长依赖于IL-3。检测细胞的浓度、培养时间及同位素加入时间直接影响检测结果,最佳检测条件是(5～10)×10~5/ml细胞浓度、培养36h、终止前12h加~3H-TdR。

CD4^+T细胞的抗瘤作用

CD4+T细胞在机体抗瘤免疫反应中的作用越来越受到重视,CD4+T细胞不仅可以分泌大量的细胞因子和辅助CD8+T细胞杀伤肿瘤细胞,而且CD4+T细胞在肿瘤免疫中具有免疫记忆和直接杀伤肿瘤细胞的功能,因而在机体的抗瘤免疫反应中起重要作用。过继转输CD4+T细胞是肿瘤过继免疫治疗的一个新方案。

细胞因子与系统性红斑狼疮的研究进展

人类系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）是一种自身免疫病，多种细胞因子参与其免疫病理损伤过程，其中ＩＬ－１，ＩＬ－２，ＩＬ－４，ＩＬ－６，ＩＦＮ－γ，ＴＮＦ，ＩＣＡＭ－１和ＢＧＥＦ在ＳＬＥ的发生发展及其转归中起重重作用。这些研究将对ＳＬＥ发病机理的认识及防治赋予新的启示，本文将对有关问题作一综述。

FL与FLT3及其在体外诱导树突细胞增殖的作用

FLT3是一种新发现的受体型酪氨酸激酶,主要表达在造血干细胞上,与其配体 FL 特异性结合启动细胞内的信号传导,促进细胞增殖。本文综述了运用 FL 与 FLT3在体外扩增树突细胞,并与其他细胞因子如:GM-CSF、IL 等协同作用使树突细胞定向分化成为功能强大的抗原呈递细胞,为免疫治疗提供一种有效的手段。

慢性移植物抗宿主反应诱导SLE样小鼠模型

目的 运用慢性移植物抗宿主反应 (GVHR)诱导系统性红斑狼疮 (SLE)样小鼠模型 ,为进一步探索SLE发病机制奠定基础。方法 将亲代BALB/C小鼠淋巴细胞经静脉途径输入 (BALB/C×C57BL/ 6 )F1代小鼠体内 ,用ELISA测定IgG类抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体 ,用免疫荧光法检测抗核抗体 (ANA)核型和免疫复合物沉积 ,用免疫印迹法测定抗可浸出核抗原 (ENA)抗体。结果 亲代淋巴细胞所致的慢性移植物抗宿主反应可诱导F1代小鼠产生高滴度的抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体等多种ANA ,免疫小鼠的肾脏有显著的免疫复合物沉着。结论 运用慢性GVHR诱导的SLE样小鼠模型 ,小鼠发病迅速 ,抗核抗体的产生与人SLE相似 。

α-CD3单抗对肿瘤特异性T细胞的扩增及其杀瘤活性的影响

用α-CD3单抗激活FBL-3红白血病肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞获取肿瘤特异性T细胞，并观察α-CD3单抗对肿瘤特异性T细胞的增殖、杀瘤话性及表型变化的影响。研究采用四种不同的培养方案。(1)单独使用α-CD3单抗(CD3组)；(2)单独使用20U／ml rIL-2(IL-2组)；(3)使用α-CD3单抗48小时后仅加入20U/ml rIL-2(CD3^-IL-2组)

X线局部照射卵巢对大鼠淋巴细胞产生IL-2的影响及其机理探讨

采用X线局部照射卵巢的大鼠模型来研究它对大鼠淋巴细胞产生白细胞介素2(IL-2)能力的影响。实验发现雌二醇(E_2)缺乏,能促进大鼠淋巴细胞的增殖及其产生IL-2的能力。统计学分析表明,大鼠淋巴细胞产生IL-2的能力与大鼠血清E_2含量呈负相关,γ=-0.952、P<0.0005。这提示E_2在体内的降低与机体非特异性细胞免疫功能的升高有关。

^(125)Ⅰ-左旋吲哚洛尔的质量控制及其比活度的衰变校正

从方法学角度完善１２５Ⅰ－ＰＩＮ标记物制备的质量控制。共制备１５批１２５Ⅰ－ＰＩＮ 标记物。放化纯度为９０±４．２％，标记率４３．９±１４．９％。每批标记物均用小鼠肺或脑作饱和实 验，了解标记物情况。对１２５Ⅰ－ＰＩＮ放化纯度动态跟踪表明，１２５Ⅰ－ＰＩＮ标记物的有效期可达两 个半衰期。同时从理论和实验上探讨有载体和无载体Ｎａ１２５Ⅰ标记配基比活度的校正方法。