恶性淋巴瘤分子病理学研究进展

恶性淋巴瘤分子病理学研究进展许良中（上海医科大学附属肿瘤医院分子病理研究室，上海２０００３２）随着分子生物学的发展，人们对于淋巴造血系统肿瘤的认识进入了一个新的阶段：不但可以从分子水平去解释诸如细胞生长、分裂、代谢、分化和发育这样复杂的生命过程的表现...

500例良恶性肿瘤ICM-DNA分析研究

目的：观察各种恶性肿瘤及相应良性病变中 Ｄ Ｎ Ａ 含量及倍体的变化，分析其对诊断、分级和预后判断的价值。方法：利用 Ｄ Ｉ Ｐ Ａ Ｓ２００ 生物图像处理分析系统，对常见恶性肿瘤及其良性病变共５００ 例作 Ｉ Ｃ Ｍ Ｄ Ｎ Ａ 分析研究。结果：（１） 宫颈鳞癌、卵巢常见恶性肿瘤（ 浆液性及粘液性囊腺癌） 、滤泡性淋巴瘤的 Ｄ Ｎ Ａ 含量和超二倍体率均显著高于相应起源组织或良性肿瘤；（２） 结直肠高分化腺癌与良性病变之间、各种类型甲状腺癌与正常甲状腺滤泡上皮和良性肿瘤之间的 Ｄ Ｎ Ａ 含量和倍体无显著差异；（３） 乳腺浸润性导管癌、宫颈鳞癌、结直肠腺癌的分化程度越低， Ｄ Ｎ Ａ 含量均越高，超二倍体率也越高。结论： Ｉ Ｃ Ｍ Ｄ Ｎ Ａ 检测能在定量水平分析肿瘤，可有助于良恶性肿瘤的鉴别，特别是对一些交界性肿瘤和临床疑难病例的诊断可提供有价值的参考指标， Ｄ Ｎ Ａ 含量和 Ｄ Ｎ Ａ 倍体特征与某些恶性肿瘤的分化状态有关。

甲诺孕酮与甲地孕酮逆转P糖蛋白介导的多药耐药性的比较研究

目的比较甲诺孕酮（ＮＯＭ）与甲地孕酮（ＭＧ）对Ｋ５６２耐阿霉素（ＡＤＭ）细胞株（Ｋ５６２／ＡＤＭ）ｍｄｒ１基因的调节。方法应用细胞培养、ＭＴＴ比色、免疫组织化学、ＲＴ┐ＰＣＲ和流式细胞技术进行分析。结果ＮＯＭ确有逆转作用，逆转活性与ＭＧ相似，并可下调ｍｄｒ１表达，调节呈时间依赖性。结论ＮＯＭ可明显逆转Ｐ糖蛋白介导的Ｋ５６２／ＡＤＭ的ＭＤＲ，因其毒性作用轻微，有可能成为较好的新型逆转剂。

熊果酸与齐墩果酸体外抗Jurkat淋巴瘤细胞的研究

目的 探讨三萜酸类中药成份熊果酸(UA)与齐墩果酸(OA)对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat的影响,从而为开发应用于治疗淋巴瘤的药物提供依据。 方法 应用细胞培养技术,在不同条件下用药物处理细胞株,采用四甲基偶氮唑蓝、HE染色和流式细胞技术(FCM),研究药物的细胞毒活性、以及药物引起的细胞形态和细胞周期变化。 结果 100μmol浓度的UA和OA处理Jurkat细胞6～12小时,细胞死亡及裂解碎片增多,至12小时大部分细胞破碎死亡,以UA作用更为明显。50μmol浓度的UA和OA处理48小时,可见部分细胞空泡变性,细胞碎片少见。OA处理后的Jurkat细胞核浓集。IC50分别为UA75μmol和OA150μmol。FCM分析显示:100μmol时,G0G1期细胞增多明显,50μmol浓度孵育48小时G2M期细胞增多,而G0G1期变化不大。 结论 UA和OA对T细胞淋巴瘤Jurkat具有明显的抗瘤活性,UA明显强于OA。机理可能是对G0G1期细胞起细胞毒作用(100μmol),在G2M期抑制细胞增殖(50μmol)。

套细胞淋巴瘤研究进展

在不同的分类系统中，套细胞淋巴瘤有许多不同名称。Ｋｉｅｌ分类将其命名为“中心细胞性淋巴瘤”；在美国，许多血液病理学家采用Ｂｅｒａｒｄ和Ｄｏｒｆｍａｎ的命名：即中间淋巴细胞性淋巴瘤；Ｗｅｉｓｅｎｂｕｒｇｅｒ将正常生发中心外套区扩大所形成的结节性肿瘤命名...

肺癌实验研究的进展

近几十年来,肺癌的发病率在不断上升。根据上海市的统计,男性肺癌的发病率已居男性恶性肿瘤的首位。为了提高肺癌的临床诊治效果,近年来国内外在肺癌的实验研究方面开展了大量工作并取得了可喜的进展。现将进展情况分别介绍如下:

外周血淋巴细胞亚群检测及其rDNA转录活性分析

目的 分析培养后外周血淋巴细胞亚群的构成特征，检测淋巴细胞ｒＤＮＡ转录活性，探讨其在肿瘤发生及诊断中的意义。 方法 对２１ 例健康人及１２７ 例良恶性肿瘤患者的外周血培养７２ 小时，用标记ＣＤ４ 、ＣＤ８、ＣＤ２０、ＣＤ５６ 对培养后外周血作流式细胞术分析，同时用ＡｇＮＯＲ染色结合图像分析检测淋巴细胞的Ｉ－Ｓ％ （银染核仁积分面积细胞核积分面积） 及Ｉ－Ｏ－Ｄ％ （银染核仁积分光密度细胞核积分光密度） 以反映ｒＤＮＡ转录活性。 结果 外周血培养后主要为Ｔ淋巴细胞的转化生长，恶性肿瘤患者的Ｔ淋巴细胞ｒＤＮＡ 转录活性显著低于健康人或良性患者（Ｐ＜０－０５），表明恶性肿瘤患者的细胞免疫功能较低。 结论 外周血Ｔ淋巴细胞ｒＤＮＡ转录活性的检测有助于恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断，并可能有助于肿瘤的普查和筛选。用图像分析系统检测外周血淋巴细胞ｒＤＮＡ转录活性，快速、客观、分辨率高，并可作定量分析。

PCR检测恶性淋巴瘤基因重排的方法学探讨

恶性淋巴瘤（ＭＬ）的诊断是当今肿瘤病理学上最感棘手的问题。除形态学和免疫组织化学外，分子水平的诊断已日益显示出重要作用。ＭＬ中出现克隆性的免疫球蛋白（Ｉｇ）或Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排已为大家所熟悉，并被用于淋巴瘤的辅助诊断。基因重排经典的检测方法...

紫杉醇对Raji细胞的作用:G_2/M期阻滞和细胞凋亡

目的观察微管稳定剂紫杉醇对淋巴瘤Ｒａｊｉ细胞的作用。方法检测紫杉醇对Ｒａｊｉ细胞作用的时间效应和剂量效应；在光镜和电镜下观察形态变化；用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果和结论紫杉醇对淋巴瘤Ｒａｊｉ细胞的增殖有明显抑制作用，４μｇ／ｍｌ紫杉醇作用４８ｈ细胞生长抑制率达８２．６％，形态学及流式细胞仪分析显示Ｇ２／Ｍ期阻滞和细胞凋亡。

102例乳腺癌中的EB病毒感染

目的探讨国人乳腺癌中ＥＢ病毒ＤＮＡ（ＥＢＶ－ＤＮＡ）的检出率及ＥＢ病毒（ＥＢＶ）基因编码蛋白的表达情况。方法（１）在１０２例乳腺癌中用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增ＥＢＶ内部重复序列ＢａｍＨＩＷ区域，并以３４例乳腺纤维腺瘤，３例管内乳头状瘤和１０例乳腺导管上皮增生作为对照组；（２）用ＡＢＣ免疫组织化学技术检测其中７３例乳腺癌中的ＥＢＶ潜在膜蛋白（ＬＭＰ）和ＥＢＶ核抗原２（ＥＢＮＡ２）。结果（１）ＰＣＲ检测显示２９例（２８．４％）乳腺癌有ＥＢＶ－ＤＮＡ，而对照组中仅２例（４．３％）纤维腺瘤有ＥＢＶ－ＤＮＡ，两组的差异在统计学上有显著意义（Ｐ＜０．００１）；（２）免疫组化技术显示ＬＭＰ和ＥＢＮＡ２阳性率分别为１３．７％和１７．８％，且阳性物质定位于肿瘤细胞，而非肿瘤中浸润的淋巴细胞。结论ＥＢＶ感染与乳腺癌的发病可能有一定关系，明确ＥＢＶ感染在乳腺癌发病机制中的作用将有十分积极的意义。

用PCR方法检测B细胞淋巴瘤克隆性IgH基因重排

用ＰＣＲ方法检测克隆性ＩｇＨ基因重排正在成为Ｂ细胞淋巴瘤基因诊断的有效手段。与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法相比，前者有明显的优点：快速简便，标本用量少并可用于石蜡切片，无放射性危害等。ＰＣＲ所用引物是辨认ＩｇＨ基因可变区（Ｖ）和连接区（Ｊ）中存在的相对保守...

Bcl-2基因家族与细胞凋亡

细胞凋亡(apoptosis)在多细胞器官的发育和平衡中起着重要的作用,从线虫到人类的遗传学和分子生物学研究表明这一过程高度保守,受基因调控。近年来,调节细胞凋亡的分子研究已取得了很大的进展,特别值得注意的是,细胞凋亡的正负调节因子常是同一基因家族成员,它们决定细胞...

EB病毒相关淋巴瘤

１９６４年，Ｅｐｓｔｅｉｎ与Ｂａｒ报告在Ｂｕｒｋｉｔ淋巴瘤（ＢＬ）中找到ＥＢ病毒（ＥＢＶ），从而创始了ＥＢＶ与人类肿瘤关系的研究。近年来发现ＥＢＶ与多种人类肿瘤有关，其中与淋巴瘤的关系特别密切。Ａｏｚａｓａ等将这些淋巴瘤称之为ＥＢＶ相关淋巴瘤（Ｅｐｓ...

乳腺癌端粒酶活性的研究

目的 探讨乳腺癌中端粒酶活性的意义及其与腋窝淋巴结状态的关系。方法 用建立在多聚酶链反应（ＰＣＲ） 基础上的端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ） ，对８８ 例乳腺癌和１６ 例乳腺良性疾病进行端粒酶活性检测。结果 ８８ 例乳腺癌中，７５ 例（８５２％ ） 检测到端粒酶活性（ 其中３ 例导管内癌端粒酶均为阳性） ，而在１６ 例乳腺良性疾病中仅２ 例（１２５％ ） 端粒酶阳性，两组的差异有显著性（ Ｐ＜０００１）。此外，端粒酶活性在淋巴结阳性的乳腺癌（９３２％ ） 中显著高于淋巴结阴性者（７７３ ％ ，Ｐ＜００５） 。结论 端粒酶活化在乳腺癌的发生过程中起重要作用，且有可能成为乳腺癌发生的早期指标。

甲诺孕酮和屈洛昔芬对K562/A02细胞株多种耐药机制的调节

目的研究甲诺孕酮（ＮＯＭ）和屈洛昔芬（ＤＲＯ）对Ｋ５６２／Ａ０２细胞株耐药基因ｍｄｒ１、谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴπ）、拓扑异构酶Ⅱα（ＴｏｐｏⅡα）和多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）的调节。方法应用细胞培养技术，采用ＭＴＴ比色法、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应和流式细胞术分析。结果ＮＯＭ和ＤＲＯ均可明显提高Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对阿霉素（ＡＤＭ）的敏感性，增加细胞内ＡＤＭ积累量。可显著下调ｍｄｒ１、ＧＳＴπ的ｍＲＮＡ和蛋白表达，明显上调ＴｏｐｏⅡα基因表达。Ｋ５６２敏感株的ＧＳＴπ基因表达同样被抑制。都具有明显的时间依赖性。ＭＲＰ基因表达的变化差异无统计学意义。结论ＮＯＭ和ＤＲＯ可明显逆转Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对ＡＤＭ的耐药性。ＮＯＭ与异搏定逆转强度相似；两药对ｍｄｒ１、ＧＳＴπ和ＴｏｐｏⅡα基因表达均有明显调节作用。调节呈时间依赖性。

bcl-2基因家族在紫杉醇介导BJAB细胞凋亡中的作用

目的 观察抗微管新药紫杉醇对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究bcl 2基因家族在此过程中的作用。方法 将不同浓度的紫杉醇作用于BJAB细胞 ,观察其作用的时间效应及剂量效应 ;在光镜和电镜下观察其形态变化 ;用流式细胞仪分析细胞DNA含量的改变并做DNA片段分析 ;用免疫组织化学及半定量RT PCR法观察在紫杉醇作用过程中bcl 2基因家族的蛋白及mRNA的变化。结果 紫杉醇能抑制BJAB细胞生长 ,抑制作用首先表现为G2 /M期阻滞 ,一定时间后出现细胞凋亡 ,并显示剂量和时间效应。在这一过程中 ,bcl 2转录及蛋白表达下降 ,并出现bcl xs的转录。结论 紫杉醇可诱导BJAB细胞凋亡 ,这为其应用于B细胞淋巴瘤的治疗提供依据。bcl 2和bcl