叶酸-脂质体制备及对HeLa细胞靶向作用

目的 研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸脂质体。方法 将叶酸（Ｆ）、聚乙二醇二胺（ＮＨ２ＰＥＧＮＨ２）、琥珀酸酐（ＳＵＣ）和卵黄磷脂酰乙醇胺（ＥＰＥ）按序共价连接，并与胆固醇（ｃｈｏｌ）、卵黄磷脂酰胆碱（ＥＰＣ）以１０∶４０∶５６配比，用成膜水化结合冷冻熔融超声法制备内含钙黄绿素叶酸脂质体，以负染色电镜法确定其粒径；用荧光显微镜观察ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体与脂质体的差异；以荧光定量法确定浓度、时间、游离Ｆ、磷脂酶Ｄ（ＰＬＤ）和磷脂酰肌醇特异磷脂酶Ｃ（ＰＩＰＬＣ）对ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体影响程度。结果 （１）ＦＰＥＧＳＵＣＥＰＥ连接物为色谱纯；叶酸脂质体平均粒径为２００ｎｍ。（２）叶酸脂质体进入ＨｅＬａ细胞质内量明显高于脂质体。（３）浓度增大、时间延长，叶酸脂质体摄取量递增幅度明显减缓；ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体量均在脂质体的４倍以上。（４）５０μｍｏｌ／Ｌ游离Ｆ可使叶酸脂质体摄取量降低５０％；ＰＩＰＬＣ（０．２Ｕ／ｍｌ）和ＰＬＤ（０．５ｍｇ／ｍｌ）处理后，叶酸脂质体摄取量分别降低７１％和７０％。