HPLC-MS法测定大鼠血浆中利福布汀的浓度及其药代动力学研究

目的建立HPLC-MS法测定大鼠血浆中利福布汀浓度的方法,并对大鼠灌胃给药利福布汀后,研究利福布汀在大鼠体内的药动学。方法采用HPLC-MS法测定血浆中利福布汀的浓度。色谱柱:Waters Xbridge-C_(18)(100 mm×3.0mm,3.5μm),流动相:乙腈-水(含0.1%甲酸)=70:30;流速:0.4 ml·min^(-1),分析时间5 min,柱温:25℃,进样量:5μl,质谱条件:采用ESI源负离子模式,毛细管电压3500 V,干燥气流速10 L·min^(-1),雾化气压力35 psi,干燥气温度350℃。选择离子模式(SIM)下,利福布汀的监测离子为[M-H]^-m/z845.4和内标A3的监测离子为[M-H]^-m/z 509.3,碎片电压100 eV。结果利福布汀在0.15~30μg·ml^(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.9987);最低定量限为0.15μg·ml^(-1);低、中、高浓度的提取回收率为86.42%~95.80%;日内、日间精密度RSD均<11.5%。其药动学参数分别为:C_(max)(2.08±0.783)μg·ml^(-1)、T_(max)(2.20±1.247)h、t_(1/2)(12.58±4.909)h、CLz/F(1.15±0.098)L·h·kg^(-1)、Vz/F(20.31±7.276)L·kg^(-1)、AUC_(0-∞)(26.32±2.144)μg·h·ml^(-1)、MRT_(0-∞)(18.29±5.05)h、VRT_(0-∞)(379.94±195.84)h^2。结论该方法简便、准确、可靠,可用于测定大鼠血浆中利福布汀的浓度,并应用于其药代动力学研究。单次口服利福布汀后,药物吸收迅速,消除缓慢,能快速达到峰浓度,且能长时间维持较高浓度。