蚯蚓纤溶酶的抗肿瘤作用

目的 观察蚯蚓纤溶酶 (EFE)对体外人癌细胞株及体内人癌裸鼠移植性肿瘤生长的影响 ,对该药进行临床前抗肿瘤药效学评价。方法 采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对体外人癌细胞的生长抑制作用 ;用人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤模型对蚯蚓纤溶酶进行体内抗肿瘤药效学观察。结果 蚯蚓纤溶酶在体外对人癌细胞的生长无抑制作用 ;灌胃给予蚯蚓纤溶酶 2 0 0～ 10 0 0mg·kg-1,可明显抑制人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤的生长。结论 蚯蚓纤溶酶具有抗肿瘤作用。

蚯蚓纤溶酶(EFE-3D)基因的合成及其在毕赤酵母中的表达

选择毕赤酵母偏爱密码子,分成32个长约48 bp且相互配对的寡核苷酸片段,合成蚯蚓纤溶酶基因EFE-3D。寡核苷酸片段经5′磷酸化后,通过错位拼接,PCR(聚合酶链式反应)一次性完成新基因的合成并且克隆至载体pP IC 9K中。最后利用电穿孔法将新基因克隆至毕赤酵母表达系统并进行诱导表达,用免疫印记法检测表达产物,最后利用纤维平板确定其表达产物的活性为3 500 mm2/mL,1 L发酵液相当于48 m g天然蚯蚓纤溶酶活性。

应用Phenyl Bio-Sephar FF进行辣根过氧化物酶精分离的研究

辣根过氧化物酶是一种广泛应用于临床医学诊断以及抗体-抗原研究领域的常用酶。不同纯度和活性要求的酶常常被用于满足不同的应用领域。我们采用phenyl疏水介质填料对该酶进行分离纯化研究,并且通过一次分离收集不同的部分获得不同纯度和活性要求的酶。同时,我们发现采用phenyl疏水介质填料对于辣根过氧化物酶有专一性的捕捉效能,并且可以通过硫酸铵浓度的梯度变化轻易地从柱上解析。这种新型填料的应用和工艺带来了简洁经济的生产流程。