孕妇血清中胎儿游离DNA产前筛查Down’s综合征初探

目的应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应（Real-time quantitative PCR）技术检测孕妇血清中胎儿游离DNA含量，探讨以其含量变化作为Down’s综合征产前筛查新指标的可行性。方法选择42例孕中期（16-19周）的妇女作为研究对象，其中7例为孕21三体男胎的妇女，18例为孕正常男胎的妇女，17例为孕正常女胎的妇女，提取其外周血血清中游离DNA，应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应技术检测Y染色体上的DYS14基因，以此确定母体血清中的胎儿游离DNA含量，并同时检测代表母体与胎儿总游离DNA的β-actin基因作为对照。结果孕21三体男胎组血清胎儿游离DNA含量明显高于孕正常男胎组，它们分别为94．5基因当量（genome equivalents，GE）／ml及42．8GE／ml（P〈0．01），孕21三体男胎组血清中的胎儿游离DNA含量为孕正常男胎组的2．2倍。孕正常女胎组血清中未检测到Y-染色体上的DYS14基因。结论胎儿游离DNA可能成为产前筛查Down’s综合征的候选指标。

IVF-ET周期中雌激素浓度的变化与妊娠结局的关联性研究

目的评估在IVF-ET周期中自注射HCG日至卵裂期胚胎移植(ET)日连续6 d血雌二醇(E 2)浓度的变化与妊娠结局的关联性。方法回顾性分析自2017年1月至2020年1月在淄博市妇幼保健院生殖医学中心接受IVF-ET治疗的41例患者,分为妊娠组(n=20)和非妊娠组(n=21),比较组间自HCG日(d 0)起连续6 d检测血清E 2水平(d 0 E 2、d 1 E 2、d 2 E 2、d 3 E 2、d 4 E 2、d 5 E 2)的差异;根据取卵日(d 2)相对于HCG日的E 2比值(d 2 E 2/d 0 E 2)的四分位数(P25,P75)分为A组(<P25,n=10)、B组(P25~P75,n=21)和C组(>P75,n=10),并根据胚胎移植日(d 5)相对于HCG日E 2比值(d 5 E 2/d 0 E 2)的四分位数(P25,P75)分为D组(<P25,n=10)、E组(P25~P75,n=21)和F组(>P75,n=10),分析各组促排卵后各种指标的差异。结果妊娠组各时点血清E 2浓度均高于非妊娠组,但均无统计学差异(P>0.05)。在A、B、C三组中,B组的正常受精数(8.05±3.09)显著高于A组(5.20±2.94)和C组(5.60±3.10)(P<0.05),但三组间妊娠率无统计学差异(P>0.05)。在D、E、F三组中,E组的正常受精率(69.68%)显著高于D组(61.54%)和F组(54.13%),优胚率(25.27%)显著低于D组(46.81%)和F组(41.03%),差异均有统计学意义(P<0.05),但组间妊娠率无统计学差异(P>0.05)。结论妊娠组自HCG日至胚胎移植日血清E 2浓度均稍高于非妊娠组;取卵日或胚胎移植日相对于HCG日E 2比值的不同并不影响临床妊娠率。

取卵术后雌激素浓度变化对鲜胚移植妊娠结局的预测

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中取卵(OPU)日至卵裂期胚胎移植(ET)日连续4 d血清雌二醇(E_(2))浓度变化对妊娠结局的预测价值。方法收集2017年1月至2021年6月在淄博市妇幼保健院生殖医学中心接受IVF-ET治疗的患者92例为研究对象,自OPU日至ET日连续4 d检测血清E_(2)浓度,分别记录为d_(0)E_(2)、d_(1)E_(2)、d_(2)E_(2)、d_(3)E_(2),根据妊娠结局不同分为妊娠组(n=44)和非妊娠组(n=48),比较两组患者的一般资料、E_(2)浓度、不同时间点血清E_(2)浓度变化率(d_(1-0)E_(2)%、d_(2-1)E_(2)%等)、获卵数及胚胎发育情况等,利用受试者工作特征(ROC)曲线评价d_(2-1)E_(2)%、d_(1)E_(2)对妊娠结局的预测价值。结果两组患者的一般资料无显著性差异(P>0.05)。OPU后两组的血清E_(2)浓度均表现出先下降后上升的趋势,妊娠组的d_(2)E_(2)和d_(2-1)E_(2)%显著高于非妊娠组(P<0.05),妊娠组的正常受精率显著高于非妊娠组(P<0.05)。d_(2-1)E_(2)%、d_(2)E_(2)及联合检测的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.63、0.67和0.72(P<0.05),d_(2-1)E_(2)%和d_(2)E_(2)的最佳临界值分别为74.41%和4159.95 pmol/L,诊断敏感度分别为52.30%和65.90%,特异度分别为75.00%和64.60%;联合检测的敏感度为88.60%,特异度为56.20%。结论在IVF-ET周期中当d_(2-1)E_(2)%≥74.41%或d_(2)E_(2)≥4159.95 pmol/L时有预测妊娠结局的价值,联合检测的敏感度优于单一指标。

反复自然流产与子宫内膜接受性

反复自然流产(RM)的病因是多方面的。近50%的RM病因不明。子宫内膜接受性异常因素占总已知病因25%左右。主要包括组织形态、子宫内膜的细胞因子成分、白细胞组成、活性以及淋巴细胞亚型异常等。其中公认有临床价值的是:形态学检查、子宫内膜白细胞检查、宫腔冲洗液PP14检查等。目前临床上针对子宫内膜因素所致的RM尚无成熟有效的治疗方法。有待进一步的实验加以研究、论证。

赤霉素对精子运动力和细胞凋亡的影响及其机制

目的探讨赤霉素对精子运动力和细胞凋亡的影响及其机制。方法采用Percoll梯度离心法提取有正常生理功能的人精子作为正常精子模型,提取的优质精子培养于含不同浓度赤霉素的G-IVF PLUS培养液中,采用精子质量分析仪检测精子运动力;流式细胞分析仪检测精子细胞活性氧(ROS)水平及凋亡情况;免疫荧光技术检测氧化应激、凋亡相关蛋白表达量;ATP酶检测试剂盒检测Na^+-K^+-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶活性。结果精子运动力随赤霉素浓度的增加、时间的延长逐渐降低;处理组精子细胞ROS水平明显高于对照组(F=21.40,P<0.05),过氧化物歧化酶(SOD)蛋白水平较对照组明显降低(F=28.13,P<0.05);凋亡蛋白P53、BAX表达水平较对照组明显升高(F=104.54、59.29,P<0.05);Na^+-K^+-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶活性较对照组明显降低(F=24.48、18.81,P<0.05)。结论赤霉素可通过氧化应激反应降低精子运动力,促进精子细胞凋亡。