杨梅黄酮对皮肤光老化及NF-κB信号通路表达的抑制作用

目的探讨杨梅黄酮(Myr)对小鼠皮肤和人皮肤角质形成(HaCaT)细胞光老化的抑制作用及其对核转录因子(NF-κB)信号通路表达的影响。方法将50只小鼠按随机数字表法分为空白对照组(未经紫外线照射和Myr处理)、模型对照组(背部涂抹0.9%氯化钠溶液2 ml)、低剂量组(背部涂抹5 mg/ml Myr 2 ml)、中剂量组(背部涂抹20 mg/ml Myr 2 ml)、高剂量组(背部涂抹50 mg/ml Myr 2 ml),每组各10只。除空白对照组外,其余各组均隔日用Myr或0.9%氯化钠溶液联合紫外线照射制备皮肤光老化模型。小鼠经末次(第14周)背部照射后,取照射区皮肤组织进行HE染色和胶原纤维染色,观察皮肤组织形态及真皮内胶原纤维的变化,检测皮肤抗氧化能力[超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化力(T-AOC)和羟捕氨氧(HYP)]。HaCaT细胞经0、5、15、25、35、50μMMyr处理后,用中波紫外线(UVB)照射建立细胞光老化模型,以未经UVB照射和药物处理细胞作为对照组,采用MTT方法检测各组细胞的活力,流式细胞术分析各组细胞的活性氧(ROS)水平。采用RT-PCR分别测定皮肤和细胞核转录因子κB抑制蛋白α(IκBα)和环氧化酶(COX)-2 mRNA表达水平,Western blot检测细胞磷酸化(p)-IκBα、IκBα和COX-2蛋白表达水平。结果小鼠背部皮肤经紫外线照射后,均出现不同程度光老化现象。与模型对照组比较,中剂量组皮肤组织SOD活性、T-AOC活性和HYP水平均升高,而IκBα和COX-2 mRNA表达水平均下调(均P<0.05)。细胞光老化模型显示,35μM或50μMMyr预处理细胞可显著提高UVB照射后的细胞活性,并下调细胞的ROS水平(均P<0.05)。50μM Myr预处理细胞可显著抑制细胞IκBα和COX-2 mRNA表达,并下调p-IκBα和COX-2蛋白表达水平(均P<0.05)。结论Myr可提高皮肤和细胞抗氧化应激活性,降低氧化产物含量,抑制NF-κB信号通路活性,达到抗皮肤光老化作用。