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一种快速提取基因组DNA的方法 被引量:10
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作者 卢瑛 刘照关 +1 位作者 徐宏 古宏晨 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期69-73,共5页
采用氧化硅超顺磁性纳米磁珠和自己设计的试剂体系及提取流程,建立了一种基因组DNA的快速提取方法,该方法以氧化硅磁珠为固相吸附载体,盐酸胍、β-巯基乙醇和SDS为主要裂解吸附试剂。以全血或培养细胞为实验材料进行基因组DNA的提取... 采用氧化硅超顺磁性纳米磁珠和自己设计的试剂体系及提取流程,建立了一种基因组DNA的快速提取方法,该方法以氧化硅磁珠为固相吸附载体,盐酸胍、β-巯基乙醇和SDS为主要裂解吸附试剂。以全血或培养细胞为实验材料进行基因组DNA的提取结果显示建立的方法提取100μl小鼠抗凝血,可得2~3μg基因组DNA,OD260/OD280为1.8±0.05,其纯度可满足后续的酶切和PCR生物操作要求。该方法整个提取过程只需12分钟,不需特殊实验条件同时可省略蛋白酶K的消化过程和离心操作,适用于一般实验室的需求,是一种操作简便、快速高效的提取方法。 展开更多
关键词 氧化硅超顺磁性纳米磁珠 基因组DNA 全血 培养细胞
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Protein A磁性纳米颗粒载体的制备及应用 被引量:5
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作者 卢瑛 丁华平 +1 位作者 徐宏 古宏晨 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期13-17,共5页
采用合成的表面氨基化磁性纳米颗粒,通过化学共价交联制备了葡萄球菌ProteinA磁性纳米颗粒载体(SPA-MP),探讨了载体制备的优化条件,根据生物分子特异性亲合作用原理,在外加磁场的定向控制下,通过亲和吸附、清洗和解吸附等操作,探讨了SPA... 采用合成的表面氨基化磁性纳米颗粒,通过化学共价交联制备了葡萄球菌ProteinA磁性纳米颗粒载体(SPA-MP),探讨了载体制备的优化条件,根据生物分子特异性亲合作用原理,在外加磁场的定向控制下,通过亲和吸附、清洗和解吸附等操作,探讨了SPA-MP载体在抗体分离纯化领域的应用可行性。载体制备优化实验结果显示,通过改变蛋白质浓度、交联剂浓度和交联剂活化时间可以制备不同表面密度的SPA-MP载体。300μgSPA,2.5%(V/V)戊二醛浓度和3h的活化时间可以获取表面密度高达35mgSPA/g磁性纳米颗粒的载体。此外,应用结果显示每克SPA-MP磁性微球载体可以结合约15~18mg的CD25抗体,同时可有效地分离纯化人抗血清样品中的IgG抗体。 展开更多
关键词 磁性纳米颗粒 PROTEIN A 抗体分离纯化
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