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题名一种快速提取基因组DNA的方法
被引量:10
- 1
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作者
卢瑛
刘照关
徐宏
古宏晨
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机构
上海交通大学微纳科学技术研究院微米/纳米加工技术国家重点实验室薄膜与微细技术教育部重点实验室
上海奥润微纳新材料科技有限公司
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期69-73,共5页
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基金
国家“863”计划(2006AA032359)
上海科委基金(0652nm012,05D219312)
上海市自然科学基金(04ZR14086)资助项目
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文摘
采用氧化硅超顺磁性纳米磁珠和自己设计的试剂体系及提取流程,建立了一种基因组DNA的快速提取方法,该方法以氧化硅磁珠为固相吸附载体,盐酸胍、β-巯基乙醇和SDS为主要裂解吸附试剂。以全血或培养细胞为实验材料进行基因组DNA的提取结果显示建立的方法提取100μl小鼠抗凝血,可得2~3μg基因组DNA,OD260/OD280为1.8±0.05,其纯度可满足后续的酶切和PCR生物操作要求。该方法整个提取过程只需12分钟,不需特殊实验条件同时可省略蛋白酶K的消化过程和离心操作,适用于一般实验室的需求,是一种操作简便、快速高效的提取方法。
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关键词
氧化硅超顺磁性纳米磁珠
基因组DNA
全血
培养细胞
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Keywords
Silica-modified superparamagnetic nanoparticle Genomic DNA Whole blood Cultured cells
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分类号
Q52
[生物学—生物化学]
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题名Protein A磁性纳米颗粒载体的制备及应用
被引量:5
- 2
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作者
卢瑛
丁华平
徐宏
古宏晨
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机构
上海交通大学微纳科学技术研究院微米/纳米加工技术国家重点实验室薄膜与微细技术教育部重点实验室
上海奥润微纳新材料科技有限公司
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期13-17,共5页
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文摘
采用合成的表面氨基化磁性纳米颗粒,通过化学共价交联制备了葡萄球菌ProteinA磁性纳米颗粒载体(SPA-MP),探讨了载体制备的优化条件,根据生物分子特异性亲合作用原理,在外加磁场的定向控制下,通过亲和吸附、清洗和解吸附等操作,探讨了SPA-MP载体在抗体分离纯化领域的应用可行性。载体制备优化实验结果显示,通过改变蛋白质浓度、交联剂浓度和交联剂活化时间可以制备不同表面密度的SPA-MP载体。300μgSPA,2.5%(V/V)戊二醛浓度和3h的活化时间可以获取表面密度高达35mgSPA/g磁性纳米颗粒的载体。此外,应用结果显示每克SPA-MP磁性微球载体可以结合约15~18mg的CD25抗体,同时可有效地分离纯化人抗血清样品中的IgG抗体。
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关键词
磁性纳米颗粒
PROTEIN
A
抗体分离纯化
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Keywords
Magnetic nanosphere Protein A Antibody purification
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分类号
Q819
[生物学—生物工程]
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