蜂毒肽分离纯化及基于氨基酸水解同位素稀释质谱法的定值方法研究

本研究重点开展了蜂毒冻干粉中蜂毒肽的分离纯化研究,并采用氨基酸水解同位素稀释质谱法对纯化后的蜂毒肽样品进行了纯度准确测定,以及采用经典的质量平衡法对测定结果进行比较验证。结果表明,氨基酸水解同位素稀释质谱法测定蜂毒肽纯度为66.14%±0.27%,质量平衡法测定结果为68.26%±0.51%,两种不同原理方法的测量结果一致性较好。此外,经确证与定量测定发现镇静肽-2、水分、三氟乙酸是影响蜂毒肽纯度提升的主要杂质。

固相萃取-气相色谱法测定橄榄油中4种脂肪酸乙酯

橄榄油中脂肪酸乙酯(FAEEs)的含量是衡量其产品品质的重要指标之一,GB/T 23347-2021《橄榄油、油橄榄果渣油》中要求特级初榨橄榄油中FAEEs应≤35 mg/kg。目前橄榄油中FAEEs的国际标准检测方法是硅胶柱层析-气相色谱法(GC),该方法存在操作复杂、耗时长、试剂消耗量大等缺点。本研究建立了硅胶固相萃取(Si SPE)-气相色谱分析橄榄油中棕榈酸乙酯、亚油酸乙酯、油酸乙酯和硬脂酸乙酯4种FAEEs的检测方法。考察了载气类型,选定He气作为载气;筛选了内标化合物,确定使用十七碳烯酸乙酯(顺-10)作为内标物质;优化了SPE条件,对比了不同品牌Si SPE柱对回收率的影响,确定了称取0.05 g橄榄油,使用正己烷提取,1 g/6 mL Si SPE柱净化的前处理方法。该方法处理一个样品大约仅需2 h前处理时间和23 mL试剂。对优化后的方法进行方法学验证,结果表明,4种FAEEs在0.1~5.0 mg/L的范围内线性关系良好(决定系数(R 2)>0.999),方法检出限为0.78~1.11 mg/kg,定量限为2.35~3.33 mg/kg,在低、中、高3个加标水平(4、8、20 mg/kg)下的回收率为93.8%~104.0%,相对标准偏差为2.2%~7.6%。用建立的方法对15个橄榄油样品进行测试,发现3个特级初榨橄榄油样品的FAEEs总量超过了35 mg/kg,表明市场上可能存在以次充好的现象。与国际标准检测方法相比,该方法前处理过程简便,操作时间短,试剂用量少,检测成本低,精密度高,准确性好,可以为橄榄油检测标准的完善提供有效的理论和数据参考。

高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中5种抗真菌药物及相关代谢产物的测量方法

建立一种能同时测定人血清中伏立康唑(VRC)及伏立康唑氮氧化物(VNO)、泊沙康唑(PCZ)、伊曲康唑(ICZ)及羟基伊曲康唑(HICZ)、氟康唑(FCZ)、卡泊芬净(CPF)5种抗真菌药物及相关代谢产物的测量方法,并对基质匹配标准品和质控物的稳定性进行研究并优化,可应用于临床进行患者血清药物浓度检测。采用梯度洗脱,抗菌药专用色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm)进行分离,高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),多反应监测扫描模式(MRM),内标法定量。结果表明:线性范围分别为VRC、VNO、ICZ、HICZ:0.1~10μg/mL,PCZ:0.05~5μg/mL,FCZ:0.5~50μg/mL,CPF:0.2~20μg/mL,各化合物线性相关系数均大于0.995,准确度为91%~115%,批内和批间精密度变异系数(CV)均<15%,混合基质效应偏差为-1.15%~2.23%。方法操作简便,准确度高,稳定性好,可适用于临床对血清中5种抗真菌药物及其代谢物的血药浓度监测。

基质分离固相萃取-液相色谱-串联质谱法快速测定牛肉中4种β_2-受体激动剂类兽药残留

目的建立基质分离固相萃取结合液相色谱串联质谱法(liquidchromatographytandemmass spectrometry, LC-MS/MS)快速测定牛肉中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林等4种β_(2)-受体激动剂类兽药残留。方法样品经葡萄糖醛苷酶/硫酸酯酶酶解、盐析后经CNW兽药定量检测分散固相萃取纯化包净化。采用LC-MS/MS电喷雾正离子模式、多反应监测采集(multiple reaction monitoring acquisition, MRM)测定。结果当4种β_(2)-受体激动剂类兽药化合物空白样本加标水平在2.5、12.5、50μg/kg时,回收率为95.39%~106.59%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为0.98%~13.26%。4种目标化合物的检出限为0.1~0.3μg/kg,定量限为0.3~1.0μg/kg。针对市售66件牛肉样品中目标化合物进行检测,结果均未检出。结论与传统通过性固相萃取法相比,兽药定量检测分散固相萃取纯化法净化效果更好,基质效应更低。CNW兽药定量检测分散固相萃取法可用于牛肉中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林4种β_(2)-受体激动剂类兽药残留快速检测。

固相萃取-反相高效液相色谱法测定汤料中的碱性橙Ⅱ

建立一种快速、高效测定汤料中碱性橙Ⅱ的固相萃取-反相高效液相色谱(SPE-RP-HPLC)方法。用酸化甲醇溶液提取样品,上清液加入到HLB固相萃取小柱后,选择甲酸-水溶液淋洗,氨化甲醇洗脱,过0.22μm滤膜后上机检测。采用Waters RP C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,以甲醇-乙酸铵(20mmol/L)水溶液作为流动相,用二极管阵列检测器检测,外标法峰面积定量。结果表明,碱性橙Ⅱ在1.0μg/m L^25.0μg/m L浓度范围内线性良好,相关系数r^2为0.9992,检出限为0.04μg/m L,定量限为0.12μg/m L,加标回收率达到89.2%~91.5%。该方法具有前处理简单、净化效果好、灵敏度高和检测速度快的优点,适用于汤料中碱性橙Ⅱ的分离和定量检测。

含35种诊断标志物的新生儿筛查干血片质控物的研制

目的研制基于我国人群血液基质的含35种诊断标志物的新生儿筛查干血片质控物。方法通过外源添加方式,将包含13种氨基酸、19种肉碱及琥珀酰丙酮、乳清酸、溶血膦酯酰胆碱-26等35种诊断标志物添加到中国人群血液基质中,混合后再滴定滤纸上风干,得到高、低浓度新生儿筛查干血片质控物。采用非衍生化流动注射串联质谱法对干血片质控物进行均匀性、稳定性测试。结果干血片质控物均匀性良好,35个诊断标志物的检测浓度值在靶值3个标准偏差(±3SD)范围内,相对标准偏差(RSD)在1.01%~16.67%;45℃存储条件下,该质控物可保存至少9 d;-20℃存储条件下,6个月稳定性良好。结论研制的干血片质控物,可用于新生儿筛查实验室的室内质控。

固相萃取-高效液相色谱法测定保健食品中8种皂苷化合物含量

旨在建立一种固相萃取结合高效液相色谱检测保健食品中8种皂苷化合物(三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd)的方法,考察不同溶剂和不同超声时间对皂苷化合物提取效率的影响以及不同固相萃取小柱对回收率的影响。通过试验,确定先用30%甲醇溶液超声20 min进行提取,然后用C18小柱净化的前处理方法,并对优化后的方法进行方法学验证。结果表明,优化后的前处理方法+高效液相色谱法操作简便、耗时少,8种皂苷化合物峰面积与含量线性方程的决定系数均可达到0.9990以上,检出限为3.7~11.4μg/g,方法的精密度和重复性良好,样品在24 h内稳定,样品的加标回收率为85.38%~108.41%。该方法可操作性强、稳定性好,可以同时检测含有三七、人参、西洋参和高丽参等原料的保健食品中8种皂苷化合物含量。

论企业财务信息化建设的战略及措施--以X区公司为例

随着大数据时代的到来,信息技术已经广泛应用到企业日常经营管理之中,财务信息化的实现对企业长期发展起到了重要作用,通过财务信息化可以大大提升企业处理经济业务的效率。但是当前,部分企业在建设财务信息化过程中还存在一些问题,因此需要结合具体问题,积极采取科学合理的措施来完善企业的财务信息化建设工作。基于此,本文从企业财务信息化建设的基本理论出发,以X公司为例分析了企业财务信息化建设过程中存在的问题,并提出了相关对策建议,目的在于提高企业财务信息化水平,充分发挥出财务信息化的重要作用。

蜂毒肽的分离纯化及结构鉴定

目的对蜂毒肽进行分离纯化,并进行结构鉴定。方法以意大利蜜蜂蜂毒为原料,经溶解、超声、浸提、过滤等,并制备C_(18)液相色谱柱,对一次纯化采用的流动相、洗脱程序进行优化,对二次纯化时进样量、进样浓度进行选择,冻干后得到高纯度蜂毒肽。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)和液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行分子量测定等定性研究,利用傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)进行二级结构表征,尝试利用低场核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)技术对其氢谱定性解析,基于高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)的面积归一化法测定蜂毒肽纯度。结果蜂毒第一次采用三氟乙酸水(2/998,V/V)和乙腈洗脱,第二次采用三氟乙酸水(2/998,V/V)和甲醇洗脱,经过冻干后成功得到相对分子质量为2845.9 Da的蜂毒肽,纯化过程中未发生结构修饰,红外光谱显示蜂毒肽的二级结构呈α-构象并有部分弯曲,液相色谱面积归一化法测定蜂毒肽纯度达99.67%。结论采用制备液相法分离纯化蜂毒肽操作简单、方便易行,对设备要求低,纯化后不会改变蜂毒肽的结构,可用于蜂毒肽标准品原料积累,为蜂毒肽纯度标准物质的研制和市场上相关产品中蜂毒肽含量准确测定奠定基础。

稳定同位素标记氯霉素-D_(5)的合成及表征

稳定同位素标记的氯霉素-D5是以氘代甲苯为标记前体,经硝化、溴化、氧化得到氘标记的对硝基苯甲醛-D_(5),对硝基苯甲醛-D5再与手性中间体(R,R)-伪二苯羟甲胺甘氨酸酰胺经醛酮缩合、还原、酰化等一系列反应制得。以甲苯-D_(8)物质的量计算氯霉素-D_(5)收率为19.3%。目标产物结构经核磁共振、质谱、高效液相色谱进行表征。氯霉素-D_(5)的化学纯度为99.89%,氘同位素丰度为99.68 atom%D,均优于外购标准品,具有更优的纯度及更高的氘同位素丰度,可作为同位素内标用于食品中氯霉素类药物的残留检测。

磺胺氯哒嗪-苯环-^(13)C_(6)的合成

为研究稳定同位素标记的磺胺氯哒嗪-苯环-^(13)C_(6)的合成路线,制备同位素内标试剂,用于检测动物源性食品中磺胺类药物残留,以苯-^(13)C_(6)为稳定同位素标记来源和起始原料,通过硝化、硝基还原、酰化、磺化以及缩合、水解6步反应合成磺胺氯哒嗪-苯环-^(13)C_(6)。产品结构经核磁共振波谱(NMR)和质谱(MS)等仪器表征确定,产品纯度>98.0%,同位素丰度>99.0atom%13 C,可以作为内标试剂用于磺胺氯哒嗪的定性定量分析。

表面活性剂的应用及检测方法探究

本文以阴离子表面活性剂十二烷基硫酸脂铵盐为实验材料,通过对比不同的前处理方法,即直接进样法和微波消解法,来探究不同的前处理方法对阴离子表面活性剂中重金属含量的影响。由于不同行业对金属元素本底的要求不一样,所以分别采用灵敏度不同的火焰原子吸收光谱法(FAAS)和石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS)做进一步的对比分析。实验结果表明,对于重金属含量的检测,使用稀释后直接进样法测试,可以得到较好的结果,同时也降低了检测时间、成本以及前处理过程中可能带来的污染。

不同水质调控方式对海参池塘沉积物酶活性的影响

2017年1月至12月,在宁省庄河市长605 m×宽85 m,水深1.2~2.0 m,铺设网礁的海参Apostichopus japonicus养殖池中,采用自然纳潮、池底铺设微孔曝气装置(缺氧时,空压机0.15 W/m;曝气)和750 W养水机(21:00~次日9:00工作12 h)三种方式调控水质,每月大潮前3~5 d采样测定海参池塘沉积物中脲酶、脱氢酶、酸性磷酸酶、微生物活性和有机质含量的周年变化,并重点分析了养水机池塘的相关指标。结果显示,三种池塘养殖沉积物脲酶、酸性磷酸酶、脱氢酶活性和微生物活性变化范围分别为:95.00~279.42 U/g、87.27~1 040.51nmol/(g·h)、1.50~36.83 U/g和1.66~14.81μg/(g·min),有机质含量0.07%~2.60%。三种池塘各项试验指标数值全年的变化趋势基本一致,其中养水机池塘各项指标周年变化与其他两种池塘相比,变化趋势最平缓,周年平均值最小。结果表明,养水机能明显降低沉积物酶活性、微生物活性和沉积物有机质含量,可有效降低水质富营养化水平,改善水质,为海参养殖提供良好、稳定的生长环境。

利用GC-MS快速检测高脂食品中塑化剂的研究

高脂食品的前处理比较困难,脂质的干扰不仅会污染色谱柱和离子源,而且会由于离子抑制导致目标物分析灵敏度下降。对目前高油脂食品中塑化剂最常用的三种前处理手段进行比较研究,结果表明这三种前处理方法均具有较好的精密度,回收率满足要求。但不同处理手段的优缺点各不相同,在检测PAEs时应根据实际情况加以选择。

液质联用法测定纺织品中两种咪唑类物质

建立磁性固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定纺织品中两种咪唑类CMR物质的分析方法。研究以两种咪唑类CMR物质为目标物的吸附和解吸条件,经正交试验确立最佳试验条件:以γ-Fe3O4纳米粒子为磁性固相吸附剂,在30℃下吸附25 min,再以甲醇为洗脱剂,超声洗脱5 min。萃取后目标物经Athena UPLC C18-WP柱分离,采用超高效液相色谱串联质谱在多反应监测(MRM)模式下进行检测。在优化条件下,两种咪唑类CMR物质在10~200μg/L范围内线性关系良好(r>0.9990),检出限分别为0.1mg/kg和0.2 mg/kg,样品加标回收率分别为98.4%~102.3%,相对标准偏差(RSD,n=6)分别为1.5%~2.3%。该方法灵敏度高,背景干扰低,重现性好,适用于纺织品中两种咪唑类CMR物质的痕量检测。

基于冷冻技术的QuEChERS方法结合GC-MS测定腊肠中7种亚硝胺含量

本研究建立了气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)快速测定腊肠肉制品中7种N-亚硝胺类化合物的分析方法,建立并优化了冷冻液液萃取结合QuEChERS方法的前处理条件,考察了色谱柱、提取溶剂、固相吸附填料以及冷冻液液萃取对检测结果的影响。结果表明,优化后的检测方法操作简便,7种N-亚硝胺检出限均在0.001μg/g左右,线性范围在0.01~0.50μg/g,线性相关系数可达到0.999 2以上,回收率达到82.20%~105.15%,相对标准偏差为2.56%~3.89%,重现性良好。该方法可操作性强,稳定性好,适用于肉制品中N-亚硝胺类化合物的批量检测分析。

基于HPLC的苏丹红检测中光学诱导异构现象的探究

采用岛津LC-20AB液相色谱仪，SPD—M20A二极管阵列检测器，CNWAthena C18-WP（4．6mm×150mm，5μm）色谱柱，柱温为30℃，以乙腈-水（体积比为88：12）为流动相，进行等度洗脱，流速为1．0mL／min，在500nm处对苏丹红I一Ⅳ进行分析，并深入研究了其光学诱导异构现象。研究结果表明：苏丹红I-Ⅳ在0．10-20．00mg／L的浓度范围内均有良好的线性关系，相关系数为1．0000；苏丹红I和Ⅱ不能发生光学诱导异构，苏丹红Ⅲ和Ⅳ能够发生光学诱导异构；苏丹红光学诱导异构是一个可逆的变化，在没有光照的情况下可以发生逆转；苏丹红标准溶液比固体的苏丹红标准品更易发生光学诱导异构；在0～60℃的温度范围内，温度的变化对苏丹红光学诱导异构的影响不大；光照对苏丹红的光学诱导异构有显著影响，影响程度为棕色进样瓶〉日光照射=7W节能灯照射；浓度对苏丹红的光学诱导异构也有显著影响，浓度越高，异构趋于稳定的时间越长，在0．50-20．00mg／L的浓度范围内，苏丹红Ⅲ异构平衡时的异构率为5．324％～5．787％，苏丹红Ⅳ异构平衡时的异构率为5．121％～5．507％。该研究对苏丹红检测方法的研究和应用具有重要的参考价值。

食品中苏丹红检测方法的比较和优化

采用GB 19681-2005规定的高效液相色谱法(HPLC)对食品中的苏丹红含量进行检测,并对该方法进行前处理条件和色谱条件的优化。实验研究结果表明,经优化的方法专用SPE小柱有较好的回收率,SPE过程简单直观,易于操作,色谱分析条件简单快速,流动相易于配制,回收率稳定在95.0%～98.0%,优于高效液相色谱法的回收率80%～90%,因此更适合于食品中苏丹红含量的检测。

不同分度值的电子天平称量准确性研究

电子天平的准确性是衡量其称重功能最重要的指标之一。本文对分度值分别为0.1mg、0.01mg、0.001mg的三种电子天平进行称量准确性研究,实验表明,分度值0.1mg和0.01mg的电子天平在保证环境和样品稳定、人员状态良好和电子天平充分预热的前提下,称量准确性良好;而分度值0.001mg的电子天平,在满足上述条件的前提下,需称量激活步骤,方可确保称量结果的准确性。该研究成果可为电子天平的校准、检定、使用等工作提供重要的参考。

基于检出概率模型的牛奶中恩诺沙星和环丙沙星总量的拉曼光谱现场快速检测的研究

目的建立牛奶中恩诺沙星和环丙沙星总量的表面增强拉曼光谱快速检测方法。方法前处理采用5%乙酸水溶液提取、二氯甲烷液-液分配净化。通过单因素实验,确定胶体银、提取液及促凝剂等表面增强最优参数。结果恩诺沙星和环丙沙星增强后的拉曼光谱特征位移为(736±5)cm^(-1)、(785±5)cm^(-1)、(1345±5)cm^(-1)、(1395±5)cm^(-1)。根据定性方法验证的检出概率模型,确定牛奶中恩诺沙星和环丙沙星检出限为50μg/kg。结论本方法前处理操作简单,从样品前处理到出具结果仅需25 min,可用于牛奶中的恩诺沙星和环丙沙星的现场快速检测。