IFN-γ增强TNF相关凋亡诱导配体对骨巨细胞瘤细胞的抑制

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)对人骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCT)的作用及干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)对TRAIL抗瘤活性的影响,并探讨其影响机制。方法:选取2003年-2006年于301医院骨科手术切除的骨巨细胞瘤新鲜标本9例,将取自标本的骨巨细胞瘤细胞分为:对照组,TRAIL组,IFN-γ组,IFN-γ诱导后加入TRAIL组,应用CCK-8法检测TRAIL、IFN-γ单独及联合作用对骨巨细胞瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪、TUNEL法分析IFN-γ对TRAIL凋亡诱导作用的影响,RT-PCR法检测IFN-γ作用前后肿瘤细胞DR4、DR5、TRAIL的表达。结果:骨巨细胞瘤细胞对照组存活率为(98.64±0.31)%,TRAIL(100、500、1000μg/L)单独作用对肿瘤细胞增殖无明显抑制作用;IFN-γ(500、1000U/ml)单独作用后,细胞的存活率分别为(94.05±1.89)%、(90.47±2.66)%。IFN-γ(500U/ml)诱导24h后与TRAIL(100、200μg/L)联合作用,细胞的存活率分别为(84.65±2.46)%、(77.65±3.14)%。两者联合作用后流式细胞仪测得联合作用组凋亡率为(27.94±2.88)%、(38.65±2.46)%,对照组凋亡率为(1.77±0.49)%;TUNEL法测得联合作用组凋亡率分別为(19.63±3.51)%、(29.28±4.80)%,对照组的凋亡率为(1.1±0.17)%。RT-PCR结果显示,IFN-γ作用24h后肿瘤细胞TRAIL、DR4、DR5 mRNA表达明显上调。结论:骨巨细胞瘤细胞对TRAIL不敏感,IFN-γ可以明显提高TRAIL诱导骨巨细胞瘤细胞凋亡的敏感性,其机制可能与IFN-γ上调TRAIL、DR4、DR5 mRNA的表达有关。