miR-3a通过CHD1L的负调控抑制肝癌的增殖、迁移和侵袭

目的探究miR-3a通过CHD1L的负调控抑制肝癌的增殖、迁移和侵袭的机制。方法人肝癌细胞株A549细胞分为阴性对照组、空白对照组(只加转染试剂)、miR-3a类似物转染组。采用RT-PCR法和Western blot方法分别检测各组细胞内CHD1L mRNA水平及其蛋白表达情况,采用细胞流式细胞仪测定miR-3a转染后细胞总数和存活率,采用MTT检测转染miR-3a类似物对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响,采用Transwell检测转染miR-3a类似物对肝癌细胞侵袭能力的影响。结果与阴性对照组及空白对照组相比,miR-3a类似物转染组CHD1L mRNA表达水平及其蛋白表达水平明显降低(P<0.05),肝癌细胞内细胞存活数也明显降低(P<0.05),肝癌细胞的增殖能力下降(P<0.05),迁移和侵袭能力降低(P<0.05)。结论miR-3a可能通过CHD1L的负调控进而抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

microRNA-135a通过靶向IL-17抑制肝癌细胞增殖的机制

目的探讨microRNA-135a(miR-135a)在肝癌中的表达及其影响细胞增殖的机制。方法收集17肝癌患者和7例正常受试者血液,用ELISA法测定血浆IL-17浓度。将THLE-3人肝永生化细胞分为乱序对照+IL-17 MUT组、乱序对照+IL-17 WT 3'UTR组、miR-135a+IL-17 MUT组和miR-135a+IL-17 WT 3'UTR组,通过荧光素酶报告基因测定实验验证miR-135a可能靶向调控IL-17的表达,进而影响荧光酶的活性。将miR-135a模拟物、空质粒及乱序寡核苷酸转染到原代肝癌细胞中,检测各组IL-17的浓度,并通过MTT测定各组细胞增殖能力。结果肝癌患者血浆IL-17浓度高于正常受试者(P<0.05)。miR-135a靶向IL-173'UTR的序列调控IL-17分泌,miR-135a模拟物和IL-17 WT 3'UTR共转染细胞后荧光素酶的活性减低(P<0.05)。外源miR-135a模拟物转染原代肝癌细胞可抑制肝癌细胞中IL-17分泌(P<0.05)及肝癌细胞增殖(P<0.05)。结论与正常人相比,肝癌患者的血浆IL-17升高。miR-135a调控IL-17的分泌。miR-135a高表达可能通过抑制IL-17表达,从而抑制肝癌的发展。