7种新型冠状病毒核酸检测弱阳性质控品的性能比较

目的比较并评价7种不同商品化新型冠状病毒核酸检测弱阳性质控品性能。方法使用20种新冠病毒核酸检测试剂检测7种质控品,评价其适用性。对短期储存(37℃存放4 h、25℃存放1 d、4℃存放3 d)、长期储存(-20℃存放6个月)和反复冻融后的7种质控品进行检测并评价其稳定性。使用新冠病毒核糖核酸基因组标准物质对7种质控品进行定量,与产品说明书中的标示浓度进行比较,评价其量值准确性。进一步比较7种质控品不提取核酸与提取核酸后检测Ct值差异,判断各质控品核酸残留。结果7种质控品中仅1种不适用于个别检测试剂,其余均适用于所有检测试剂;各质控品稳定性检测Ct值差异均无统计学意义;不同弱阳性质控品定值浓度差异较大;部分质控品不提取核酸检测Ct值较小,存在较多核酸残留。结论不同品牌质控品质量不一,部分弱阳性质控品在量值准确性、核酸残留处理方面存在问题,但多数质控品适用性和稳定性良好。实验室应合理选择核酸检测质控品,以有效保障检测质量。

载脂蛋白E基因分型检测室间质量评价计划制定与实施

目的制定并实施载脂蛋白E(ApoE)基因分型检测室间质量评价计划(简称室间质评),评估临床实验室该项目检测水平,提高临床实验室相关项目的检测质量。方法针对ApoE基因的2个单核苷酸多态性(SNP)位点rs429358和rs7412检测制定室间质评(1年2次)计划。将5支室间质评物品随机编号,经冷链运送至各参评实验室,各参评实验室根据SNP检测结果报告ApoE分型结果。对回报结果进行统计分析。结果2次室间质评回报结果全部正确的实验室分别占93.75%(30/32)和100.00%(31/31);室间质评物品检测的总体符合率分别为99.38%(318/320)和100.00%(310/310);基因分型总体符合率分别为97.5%(156/160)和100.00%(155/155)。回报错误结果中包括2例SNP检测错误和4例分型结果判定错误。结论ApoE基因分型检测总体准确率较高,但实验室相关遗传学分析能力有待提高。

MTHFR 677C／T基因检测室问调查品制备及其应用研究

目的通过构建体外质粒DNA作为质控样本开展MTHFR677基因检测室间质量评价计划（简称室间质评），评估参评实验室检测能力及存在的问题，提高临床实验室MTHFR基因检测质量。方法利用基因工程技术体外构建含有MTHFR677位点野生型？上下游序列的重组质粒，并采用定点突变技术得到该位点的突变型（T），分别作为野生型和突变型样本，两者等比例混合后作为杂合突变型样本，并制备质控样本盘开展室间质量评价。2016年和2017年室间质评计划为一年两次，样本盘包含5支样本，覆盖MTHFR 677位点各种基因型别。要求参评实验室收到样本后在规定时间内检测样本并网上上报位点基因型检测结果。4次室间质评分别收到26份、28份、52份和56份有效汇报结果。依据回报结果计算各实验室成绩，使用Microsoft Excel软件进行统计分析，汇总各样本的总体符合率，并分析不同检测方法的符合率和检测错误类型。结果体外构建的重组质粒经Sanger测序验证分别含有MTHFR 677位点野生型？和突变型（T）序列，作为质控品在4次室间质评中并无出现检测失败的样本。2016年和2017年4次室间质评中成绩满分的实验室分别为96.15%（25/26），100%（28/28），96.15%（50/52）和98.21%（55/56）。4次室间质评中，样本检测的总体符合率分别为99.23%（129/130），100%（140/140），96.92%（252/260）和98.93%（277/280）。荧光分子杂交和芯片杂交法检测的样本符合率均为100%；荧光PCR法检测的样本符合率为97.5%（39/40），100%（45/45），94.29%（66/70）和100%（95/95）；Sanger测序法样本符合率为100%（20/20），100%（15/15），90%（36/40）和92.5%（37/40）。结论本研究所制备的质控样本能够有效监测试剂检测性能，具有良好的适用性。各实验室在MTHFR 677基因位点检测总体准确率很高，但个别实验室检测能力有待提高。临床实验室的质量控制对于保证检测结果准确性具有十分重要的作用。