上海市临床检验中心临床生化室举办“POCT管理和质量控制学习班”

2016年9月7日至9日，上海市临床检验中心临床生化室举办了“2016年POCT管理和质量控制学习班”，这已是临床生化室第二次面向医院POCT相关医务人员（护士、医师）举办的POCT质量管理学习班。此次学习班参照国内外最新的管理文件和标准，

上海市临床实验室2012年度肌酐、尿酸、尿素室间质量评价结果分析

目的：对上海市临床实验室2012年度室间质量评价（EQA）肾功能指标检测结果进行分析，了解上海市肌酐（Cr）、尿酸（UA）、尿素（UN）检测的现状，为标准化进程提供实验数据。方法通过向上海地区实验室发放10个批次不同浓度的质评物进行常规化学的EQA，将Cr、UA、UN按10套检测仪器分组分析。EQA数据分析按结果剔除离群值后计算各组的均值（x珋）、标准差（s）、变异系数（CV）。结果 EQA结果分析中，Cr、UA、UN不同检测仪器CV范围分别为1．30％～12．73％、1．06％～6．78％、1．55％～8．79％。Cr 进口1组实验室间的变异情况较好，检测质评物（46～574）μmol/L CV范围为1．70％～5．15％。UA进口3组实验室间的变异情况较好，检测质评物（132～550）μmol/L CV范围为1．49％～2．19％；UN进口2组实验室间的变异情况较好，检测质评物（3．15～18．13）mmol/L CV范围为1．55％～2．74％。结论就项目而言，上海市临床实验室Cr的检测性能还有待于进一步提高。就仪器而言，国产检测仪器的性能有待进一步提高。仍需通过开展实验室全面质量管理，逐步达到检测结果的互认，为临床提供可靠的诊疗依据。

运用上海地区室间质评结果评价2种糖化血红蛋白POCT分析仪

目的了解上海地区临床实验室2种糖化血红蛋白(HbA_(1c))即时检验(POCT)分析仪的性能。方法使用来源于医院临床实验室剩余的人全血样本的室间质控品,将2种HbA_(1c) POCT分析仪[QUO-Test糖化血红蛋白仪(简称QUO-Test)和Nyco Card ReaderⅡ糖化血红蛋白仪(简称Nyco Card ReaderⅡ)](POCT组)检测结果的均值分别与离子交换高压液相法(简称高压液相法)、离子交换低压液相法(简称低压液相法)及免疫比浊法(常规方法组)检测结果的均值进行比对,以均值±7%作为2个组系统偏移的标准;计算POCT组的均值与国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)HbA_(1c)参考方法赋值靶值的偏移,以±6%为正确度的允许偏移的标准,同时计算POCT组的组内变异系数(CV)。结果 2015年POCT组与常规方法组的比对结果优于2014年,POCT组与高压液相法的偏移基本在允许范围内。2014年的比对结果中,QUO-Test与低压液相法和免疫比浊法的可比性均较差;Nyco Card ReaderⅡ与低压液相法存在一定的偏差,与高压液相法和免疫比浊法均有较好的可比性;2014年5个质控样本POCT组与IFCC靶值的偏移均为正偏移,QUO-Test均值与靶值的偏移除浓度为7.7%的样本超出允许范围外,其他4个样本的偏移均在允许范围内;Nyco Card ReaderⅡ均值与靶值的偏移均在允许范围内,且整体小于QUO-Test。结论 Nyco Card ReaderⅡ与常规方法尤其是高压液相法具有较好的可比性,正确度符合要求,能满足临床检测的需要。

上海地区半胱氨酸蛋白酶抑制剂C室间质量评价结果分析

目的：通过对上海地区2014至2015年4次室间质量评价（简称室间质评）和2015年1次飞行检查结果的分析，了解上海地区半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）项目测定结果的整体情况，并为Cys C项目后续的室间质评计划和质控品的选择提供改进的依据。方法室间质评的质控品均来自英国朗道实验诊断有限公司的血清基质质控物，飞行检查调查品由上海市临床检验中心生化室自制的血清样本与上海北加生化试剂有限公司的血清样本组成，质控品浓度的覆盖范围为0.7～9.0 mg/L。室间质评结果统计以中位数为靶值，飞行检查调查结果采用一级参考物质传递赋值和以中位数为靶值2种方法统计。根据试剂品牌分国产试剂组、进口试剂组及其他试剂组，对各组结果分别进行统计分析。合格判断标准为靶值＆#177;25%，最后计算每组和总体变异系数（CV），以及每组和总体合格率。结果2014年2次室间质评和2015年飞行检查结果的总CV和分组CV大部分在15%～20%之间，但2014年第2次室间质评的高浓度样本（6.3、8.9 mg/L）CV均超过25%，国产试剂组和进口试剂组CV无明显差异；进口试剂合格率均超过90%，整体高于国产试剂，其中日本希森美康公司试剂测定结果普遍高于其他进口试剂品牌，国产试剂组在样本浓度为6.0 mg/L时，合格率最低，均不超过80%。2015年2次室间质评的质控品只有2个浓度，分别为0.7 mg/L与3.4 mg/L，2015年室间质评的总CV、分组CV和合格率均明显高于2014年室间质评和飞行检查，CV均在10%以内，合格率均在95%以上，但是第1次室间质评时，进口试剂积水（日本一化）在样本浓度（低值）为0.7 mg/L时检测值出现了集体低于下限的情况，导致该浓度样本进口试剂组只有68%的合格率。飞行检查5个血清样本结果采用一级参考物质传递赋值和以中位数为靶值2种方法统计比较，靶值和合格率除了浓度（低值）为0.7 mg/L的样本有差异，其余4个样本结果无明显差异。结论尽管2015年室间质评结果的CV和合格率明显优于2014年，但2015年飞行检查结果与2014年室间质评结果一致。此外，因2015年的质控品浓度单一，故2015年室间质评结果不一定反映了Cys C项目测定的真实情况。综合2014至2015年室间质评结果分析，后续室间质评质控品浓度应控制在0.7～5.0 mg/L之间。

上海市23项临床化学检验项目的允许误差范围

目的 调查分析上海市二、三级医院, 23项临床化学检验在常规条件下的变异系数(RCV)现状。探讨今后上海地区临床化学室内质量控制的要求。方法 按美国CLIA′88可接受范围的四分之一作为上海地区拟推荐要求。对上海市 2003年 147家临床实验室 23项常规临床化学 3 570 336个室内质量控制数据进行整理和统计分析,计算出各项目变异系数 (CV)百分位数的均数,与卫生部1985年推荐的RCV的统计分析结果进行比较。结果 上海地区 138家临床实验室(占 94 .0% )CV小于卫生部 1985年推荐的RCV,约有 111家临床实验室 (占 75. 5 % )符合上海地区拟推荐的要求。结论 拟定的推荐要求基本适宜,不仅可被临床接受,而且已有 75 5%单位符合要求,但尚有 24 .5 % 单位须努力才能达到要求。

四分位数稳健统计和迭代稳健统计在室间质量评价结果分析中的比较

目的比较四分位数稳健统计和迭代稳健统计在定量检测指标室间质量评价(EQA)数据处理中的应用。方法分析2012年参加上海市临床检验中心常规化学第1次EQA酶法检测肌酐的实验室结果,用四分位数稳健统计和迭代稳健统计分别进行统计。结果 2种方法确立的靶值基本相同,迭代稳健统计的标准差、变异系数较四分位数稳健统计大,稳健Z比分数值偏离0的程度总体上较四分位数法小,不合格实验室数较四分位数稳健统计少。结论相对于四分位数稳健统计,迭代稳健统计是一种更宽松可靠的统计方法。

上海地区γ-谷氨酰转移酶正确度验证计划调查结果分析

目的通过国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)一级参考方法赋值的γ-谷氨酰转移酶(GGT)正确度控制品将临床实验室的终端结果溯源到酶学的国际单位,同时实现临床实验室GGT结果可比。方法经过离心过滤处理分装得到4个正确度控制品,经均匀性、稳定性检验符合要求后,通过冷链运输发放给临床实验室,临床实验室对样品连续检测3 d。同时,上海市临床检验中心酶学参考实验室用IFCC一级参考方法为正确度控制品赋值,得到靶值。分别统计2个水平样品不分组的x、s、变异系数(CV)及与靶值的偏移;再根据仪器品牌分组统计x、s、CV及与靶值的偏移。结果 82家实验室检测结果显示:2个水平样品的总体CV均<10%,而与靶值的偏移均<7.3%;82家实验室根据仪器品牌分为8组,其中,罗氏、贝克曼AU系列、迈瑞组的组内CV及与靶值的偏移较小,均<5.6%;贝克曼、日立和东芝组组内CV<6.4%,日立和东芝2个组A水平样品的偏移均>7.2%,B水平样品的偏移均<5.7%,而贝克曼组均>30%。西门子和雅培2个组的CV在10%左右,偏移也在6%左右。采用靶值±5.5%的标准,总体符合率均不满足61%的标准。结论以IFCC参考方法溯源的GGT检测系统的实验室检测结果与IFCC参考方法赋值的结果偏移较小,而与IFCC参考方法不同的贝克曼配套试剂GGT检测系统的实验室检测结果存在较大的系统偏移。

糖尿病肾病患者血浆中VCAM-1、MIF、SFRP-5含量与肾功能损害的相关性研究

目的:分析糖尿病肾病患者血浆中血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、巨噬细胞游走抑制因子(MIF)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)含量与肾功能损害的相关性。方法:选取119例2型糖尿病肾病患者作为观察组,选取100例健康体检人群作为对照组。对比两组研究对象的血浆VCAM-1、MIF、SFRP-5含量,肾功能指标、肾纤维化指标、氧化应激指标含量等差异。结果:观察组血浆VCAM-1、MIF含量显著高于对照组,SFRP-5含量显著低于对照组;观察组血浆β2-MG、Scr、UA、BUN含量高于对照组,Alb含量及Ccr水平低于对照组;观察组血浆TIMP-1、TGF-β1、CⅣ、CTGF、Prolidase含量高于对照组;观察组血浆ROS、SOD、MDA、LHP含量高于对照组,GSH-PX、T-AOC含量低于对照组。2型糖尿病肾病患者血浆中VCAM-1、MIF、SFRP-5含量与肾功能损害指标呈直接相关关系。结论:血浆中VCAM-1、MIF、SFRP-5含量是判断DN患者病情严重程度的可靠指标,有望为疾病早期筛查及合理治疗提供依据。

早期糖尿病肾病患者血清RBP、NEFA、FKN含量与尿蛋白排泄及肾小球滤过功能损伤的关系

目的:分析早期糖尿病肾病患者血清视黄醇结合蛋白(RBP)、游离脂肪酸(NEFA)、趋化因子Fractalkine(FKN)含量与尿蛋白排泄及肾小球滤过功能损伤的关系。方法:76例早期糖尿病肾病患者作为观察组、80例健康体检者作为对照组。对比两组研究对象的入院后即刻血清RBP、NEFA、趋化因子FKN含量,尿蛋白排泄指标、肾小球滤过功能指标的差异,进一步分析RBP、NEFA、FKN含量与病情的相关关系。结果:观察组患者的血清RBP、NEFA、FKN含量高于对照组(P<0.05);观察组患者的24h尿总量、24h尿清蛋白、尿白蛋白排泄率以及尿特异性蛋白Kim-1、NGAL、L-FABP、CysC含量高于对照组(P<0.05)且与血清RBP、NEFA、FKN含量呈正相关;观察组患者的GFR水平低于对照组(P<0.05)且与血清RBP、NEFA、FKN含量呈负相关,血清Cr、BUN、VF、LP-a、β2-MG、HA含量高于对照组(P<0.05)且与血清RBP、NEFA、FKN含量呈正相关。结论:早期糖尿病肾病患者血清RBP、NEFA、FKN含量显著升高且与患者尿蛋白排泄及肾小球滤过功能的损伤程度相关。

糖化血红蛋白A1c的检测方法和干扰因素

糖化血红蛋白A1c(HbA1c)检测对糖尿病(DM)的诊断和监测至关重要。HbA1c检测方法根据其电荷,分子结构和免疫反应性不同可以分为离子交换法、电泳法、亲和色谱法、免疫学分析法和酶法等。每种方法都有其优势,如快速、重复性好、不受某些成分影响等,但也有方法会受到诸如氨甲酰化血红蛋白、血红蛋白变异体、血液系统疾病等因素的干扰。美国糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)和国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)推出的HbA1c标准化计划在HbA1c的检测方法及其干扰因素的调查方面做出了很多贡献。

毛细管电泳法检测糖化血红蛋白的分析性能评估

目的评估毛细管电泳（CE）法检测糖化血红蛋白（HbA1c）的精密度、正确度、线性和抗干扰性,并与高效液相色谱法（HPLC）进行比对。方法根据不同的评估内容,收集相应样本,分别使用SEBIA CAPILLARYSTM2 Flex Piercing毛细管电泳仪（毛细管电泳法）、ARKRAY HA-8160全自动HbA1c分析仪（HPLC）和IFCC参考方法检测HbA1c。采用SPSS 19.0软件进行统计描述及线性回归模型分析。结果毛细管电泳法检测HbA1c在常见浓度（4.91%～9.67%）下的不精密度均〈2%;与IFCC参考方法,相关程度较好（R^2=0.993）;当HbA1c浓度为5.0%～17.6%时,毛细管电泳法具有良好的线性（R^2=0.995）,对氨甲酰化血红蛋白、不稳定HbA1c、胆红素、乳糜微粒等具有较好的抗干扰能力（绝对偏倚≤0.5%）。毛细管电泳法HbA1c的测定值与HPLC具有较好的相关性（R^2=0.993）。结论毛细管电泳法的精密度、正确度、线性和抗干扰性等分析性能均符合临床实验室常规检测HbA1c的要求。

ALT正确度控制品稳定性研究及调查结果分析

目的通过对丙氨酸氨基转移酶(ALT)正确度验证计划的调查,了解上海地区ALT正确度验证的整体情况以及稳定剂甜菜碱在正确度控制品中的运用情况,从而优化正确度验证计划方案。方法经过离心过滤处理分装得到4个正确度控制品,以ALT-A、ALT-B、ALT-C、ALT-D表示,通过冷链运输发放给临床实验室,其中ALT-B和ALT-D添加了稳定剂甜菜碱,对正确度控制品连续检测3 d。同时用国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)一级参考方法为正确度控制品赋值,得到靶值。计算单个实验室每个正确度控制品均值与靶值的相对偏移,以≤6%为允许偏移判断标准。采取同步法进行ALT正确度控制品-20?℃3 d稳定性实验,并对所有实验室4个正确度控制品连续3 d的检测结果分别进行稳定性分析。结果 ALT正确度控制品-20?℃3 d稳定性实验结果显示添加甜菜碱的ALT-B和ALT-D均很稳定(第3天的酶活性是初始值的99.1%、100.0%),未添加甜菜碱的ALT-A和ALT-C均不太稳定(第3天的酶活性是初始值的96.7%、94.9%),各临床实验室的ALT正确度控制品稳定性情况与上述变化相同。74家临床实验室的相对偏移结果显示,ALT-A、ALT-C分别只有17家(23.0%)和25家(33.8%)在允许偏移范围内,而ALT-B和ALT-D均有49家(66.2%)在允许偏移范围内。41家三级医院中,ALT-B和ALT-D分别有27家(65.8%)和26家(63.4%)在允许偏移范围内;33家二级医院中,ALT-B和ALT-D分别有22家(66.7%)和23家(69.7%)在允许偏移范围内。ALT-B和ALT-D 2个正确度控制品均在允许偏移范围内的临床实验室数为44家(59.5%),其中三级医院为25家(61.0%),二级医院为19家(57.6%)。结论所调查的三级医院与二级医院临床实验室的偏移符合率未见明显差异。不添加稳定剂的正确度控制品稳定性无法满足正确度验证的要求,而添加了稳定剂甜菜碱的控制品可以很好地满足正确度控制品的需要。

红细胞沉降率检测的质量控制

红细胞沉降率（ESR，简称血沉）广泛用于临床实验室检测，主要用于评价炎症反应，急性时相反应，恶性肿瘤，心血管疾病等，如类风湿关节炎、多发性骨髓瘤、风湿性多肌痛等。影响红细胞聚集的最重要因素包括红细胞自身及其所处的血浆环境。近年来出现了很多新的测定方法，但是传统的魏氏法仍起着非常重要的作用。ESR测定虽简便，但影响因素多，临床实验室有必要使用合适的质控方法（如新鲜血或针对特定仪器使用质控物）来保证检测的准确性和精密度。

DGKC手工法评价3种血清胆碱酯酶试剂盒的检测性能

目的采用德国临床化学协会(DGKC)推荐的血清胆碱酯酶(CHE)手工检测方法(简称DGKC手工法)评价3种相同原理的CHE商品化试剂盒的检测性能。方法采用DGKC手工法评价3种CHE试剂的不精密度、线性范围及与DGKC手工法的相关性和可比性。结果 3种试剂与DGKC手工法均有良好的相关性(r2值均为0.999)和可比性[3种试剂CHE参考区间上、下限检测结果与DGKC手工法检测结果的相对偏移均<1/2允许总误差(TEa)(7.5%)]。3种试剂和DGKC手工法的重复精密度均<1%、实验室内精密度均≤1.5%。以相对偏移<7.5%为判断标准,DGKC手工法及3种试剂的线性范围分别为417～26 363、1 605～17 609、788～30853、839～25 767 U/L。3种试剂的线性范围下限均未达到DGKC手工法的线性范围下限,线性范围上限均已超出厂家声明的线性范围上限。结论 3种常用的血清CHE试剂检测性能良好,无明显基质效应,均能满足临床检测的需要。

氨甲酰化血红蛋白对糖尿病慢性肾脏疾病患者糖化血红蛋白检测干扰的研究

目的研究糖尿病慢性肾脏疾病(CKD)患者的HbA1c检测受氨甲酰化血红蛋白(CHb)干扰的情况。方法收集72例CKD患者的标本,分别使用亲和层析法(Primus Ultra2)、离子交换法(VariantⅡ、HA-8160和G7)及参考(IFCC)方法检测。对正常新鲜血进行体外氨甲酰化实验。采用线性回归分析和Bland-Altman方法进行统计学分析。结果血尿素含量逐渐升高,但HbA1c值未相应增加。血红蛋白体外氨甲酰化前后的变化为:HA-8160+0.1%、VariantⅡ+0.4%、G7-0.3%和Primus Ultra2 0%。HA-8160检测值与IFCC方法测定结果最为接近,差值均值接近0,其他方法测定结果均高于IFCC方法。结论 4种方法检测HbA1c均不受CHb的干扰。