SLE中的反抑制细胞与γδTCR阳性T细胞

对60例SLE细胞亚群表型分析发现,大部分SLE患者外周血中CD_8阳性T细胞亚群数量未见降低,研究表明,尤以CD_8^+VV^+、CD_8^+γδ-TCR^+和CD_8^+VV^+γδ^+三类T细胞亚群高表达最为明显,由于CD_8^+VV^+、CD_8^+γδ-TCR^+和CD8_8^+VV^+γδ^+T细胞亚群均具有反抑制活性。因此在活动性SLE患者中更为明显。可作为临床从免疫学角度分析SLE活动与否,评估稳定期SLE患者免疫重建的参考指标之一。

kinectin抗体免疫荧光检测方法的建立与应用

目的 探讨kinectin蛋白在真核细胞的定位 ,并建立kinectin抗体免疫荧光检测方法(IFA)。方法 从人喉癌上皮细胞 (HepG2 )抽提RNA ,用逆转录聚合酶链反应扩增kinectin编码区序列 ,并连接到真核表达载体pEGFP C2中 ;将构建的 pEGFP kinectin载体导入HepG2细胞中 ,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白 (GFP)的荧光及其细胞定位。然后 ,用此转染细胞制成的底片 ,建立检测kinectin抗体的IFA。同时用IFA对 5 1名正常人及 4 6例白塞病 (BD)患者血清进行初步检测。结果经EcoRI单酶切和测序证实 ,成功地构建了表达kinectin的真核表达载体 ;pEGFP kinectin载体转染的细胞经 3次克隆筛选后 ,10 0 %的细胞胞浆内发出特征性荧光。用kinectin抗体阳性血清染色 ,也得到类似特征的荧光。IFA检测显示 ,BD患者kinectin抗体的阳性率为 32 7% ( 15 /4 6 ) ,正常人均为阴性。结论 构建kinectin表达的载体可在HepG2细胞中进行表达 ,并成功地用 pEGFP kinectin转染的HepG2细胞建立了检测kinectin抗体的IFA。