儿童肺炎支原体23S rRNA基因位点突变检测分析

目的了解儿童肺炎支原体(MP)大环内酯类耐药基因(23SrRNA)位点突变,以及与临床资料的相关性。方法收集该院354份肺炎患儿的呼吸道标本,采用实时荧光定量PCR法检测MP及23SrRNA位点突变(A2063G或/和A2064G)情况,并将MP阳性患儿分成位点突变组和未突变组,比较两组之间的临床资料。结果 354份呼吸道标本中,166份检测为MP阳性(46.9%),且135份MP阳性标本中存在23SrRNA基因位点突变(阳性检出率81.3%),31份未检测到23SrRNA基因位点突变。分析突变组和非突变组的临床资料发现两组在年龄和性别方面比较差异无统计学意义(P>0.05),但突变组的重症肺炎和肺外并发症发生率高于未突变组(P<0.05),且平均住院时间和平均发热时间均较未突变组长(P<0.05)。结论 MP 23SrRNA基因位点突变的较高检出率提示MP对大环内酯类耐药率较高,这为临床MP的感染、治疗提供一定的参考依据。

儿童平均血小板体积、维生素D及免疫球蛋白E水平的相关性研究

目的探讨儿童平均血小板体积(MPV)、血清维生素D(VD)及免疫球蛋白E(IgE)水平之间的相关性。方法选取该院就诊患儿775例,按照MPV、VD及IgE水平诊断标准进行分组,采用相应检测方法分别检测MPV、VD及IgE水平变化,并分析3个指标之间的相关性。结果不同VD水平组间MPV水平比较差异有统计学意义(P<0.05),不同IgE水平组间MPV水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。MPV与VD水平之间呈负相关(r2=0.026,P<0.01),MPV与IgE水平之间呈正相关(r2=0.008,P<0.01),IgE与VD水平之间呈负相关(r2=0.08,P<0.01)。结论 VD水平与MPV、IgE水平之间呈负相关,IgE与MPV水平之间呈正相关,补充VD水平可抑制血小板活化和炎性反应,在预防和治疗超敏反应性疾病中有显著的临床价值。

儿童白血病中34种ph样ALL基因筛选的临床研究

目的对白血病儿童进行34种ph样ALL基因筛选,明确其在预后评估中的临床意义。方法 2016年2月-2018年10月上海市儿童医院119例初发ALL患儿,男69例,女50例,年龄6个月~17岁,应用实时荧光探针PCR法进行Ph样ALL相关34种基因的筛选,筛选阳性者再进行监测。统计学方法应用SPSS 16. 0进行χ~2检验和生存分析。结果 119例初发ALL患儿,ALL-B109例,ALL-T 10例,ph样ALL基因筛选的阳性率为18. 5%(22/119)。阳性的ph样ALL基因包括:IKZF3-8(IK6) 8例次,CRLF2高表达16例次,EBF1-PDGFRB 1例次。其中3例为2种基因同时存在:IKZF3-8和CRLF2高表达共阳性2例,IKZF3-8和EBF1-PDGFRB共阳性1例。上述119例ALL分为ph样ALL基因阳性组(22例)和ph样ALL基因阴性组(97例)。第19天和第46天的流式MRD监测结果两组差异无显著性。ph样ALL基因阳性组总体生存率低于阴性组(P=0. 037),而无事件生存率无差异(P=1. 0)。结论 ph样ALL基因阳性患儿总体生存率降低,可用于儿童白血病的预后评估。

儿童中性粒细胞功能异常的临床特点研究

目的通过对41例中性粒细胞功能测定异常的患儿进行回顾性分析,明确其发病和临床特点、以指导疾病诊断和预后判断。方法 2014年10月-2019年12月,上海市儿童医院应用流式细胞法进行中性粒细胞功能检测,以DHR123标记中性粒细胞设门,PBS为对照,经PMA刺激后,其百分比小于90%或刺激指数小于100定义为异常,每次测试均以正常儿童为对照。结果中性粒细胞功能异常者共41例,其中男28例,女13例,年龄23天-13岁,中位年龄3岁,住院35例,门诊6例;住院科室依次为呼吸科13例、肾脏免疫科6例、消化科8例、PICU 4例、新生儿科3例、血液科1例;门诊共6例:其中免疫门诊4例,儿内科门诊2例,临床表现和特点多为反复肺炎、呼吸道感染,脓毒血症或败血症,以及各组织脓肿、关节炎、中耳炎等,确诊和疑似慢性肉芽肿的仅为7例;所有基因检测仅6例,4例阳性。结论中性粒细胞功能异常患儿分布于各科室,临床几乎均出现反复、严重感染、预后差等特点,与慢性肉芽肿病高度相关,易漏诊,需基因检测进一步明确诊断。

上海地区98例手足口病患儿中肠道病毒71型的基因型分布

【目的】探讨上海地区98例手足口病患儿肠道病毒71型(EV71)的基因型的分布情况。【方法】选取2017年1月至2018年5月于本院诊断为手足口病患儿的98份粪便标本,采用反转录半巢式PCR(RT-nPCR)方法对标本中EV71进行检测。【结果】98份标本中28份为阳性EV71 RNA,检出率为28.6%;测序结果表明此28份阳性标本为EV71 C4型。【结论】上海地区98例手足口病病原体为C型EV71病毒;不同患儿间的EV71病毒有一定的变异。

儿童恶性肿瘤并发骨髓坏死2例报道及文献复习

病例1,男,6岁,2020年4月因“发现左阴囊无痛性肿物1年余,肿物增大16 d”就诊。睾丸肿瘤切除,病理检查提示髓系肉瘤,家属拒绝化学治疗(化疗)。术后3个月出现发热、贫血,骨髓涂片检查提示骨髓坏死(bone marrow necrosis,BMN),抗感染治疗1周后复查骨髓涂片见肿瘤细胞,骨髓活组织检查考虑为髓系肉瘤骨髓转移,予以化疗后缓解。病例2,女,11岁,2012年12月因“乏力、纳差1个月,发热3 d”就诊,腹部CT示后腹膜恶性肿瘤,多部位骨累及,骨髓涂片检查提示BMN,确诊为神经母细胞瘤,化疗后缓解。2020年5月,因“骨痛伴发热3 d”入院,骨髓涂片检查提示肿瘤复发,予抗感染治疗及化疗后,复查骨髓提示BMN。积极抗感染治疗后,骨髓提示肿瘤缓解,并行造血干细胞移植,现为移植后随访。BMN病因复杂,恶性肿瘤是常见的病因。针对肿瘤细胞,骨髓活组织检查较骨髓涂片检查可更有效地确诊疾病。对导致BMN的原发病进行及时诊断和积极治疗能够提高预后。

43种融合基因筛选在儿童血液系统肿瘤诊断中的意义

目的通过对43种融合基因在儿童白血病中的结果分析，结合形态、免疫分型和细胞遗传学，评估其对白血病诊断及预后判断的意义。方法2015年5月—2017年4月上海市儿童医院176例初发或复发白血病肿瘤患儿，男99例，女77例，年龄4个月～15岁，应用实时荧光探针PCR法进行融合基因检测，融合基因包括ALL和AML常见的如BCR－ABL，AML1－ETO，CBFβ－MYH11，MLL和RaRa相关等43种融合基因。结果176例患儿中最后诊断为ALL－B 110例、ALL－T 11例、AML 46例，其他9例，包括神经母细胞瘤1例、NHL－B 2例、NHL－T 1例、CML转AML1例，MDS 2例，CML 1例，贫血1例。43种融合基因筛选总阳性率为28.4%（50/176），包括：ALL－B （27/110，阳性率24.5%）：TEL－AML1 14例，E2A－PBX1 6例，MLL－A F10 2例，MLL－AF4 2例，MLL－ENL 1例，MLL－AF9 1例，BCR/ABL 1例；ALL－T （3/11，阳性率27.3%）：MLL－ENL 1例，SIL－TAL1 2例；AML（17/46，阳性率37%）：AML－ETO 7例，MLL－AF10 1例，MLL－AF9 1例，PML－RaRa 4例，DCK－CAN 3例，CBFB－MYH11 1例；其他中包括BCR－ABL 2例，E2A－PBX1 1例共3例。结论43种融合基因检测有效补充了白血病的诊断、有助于鉴别诊断，与危险分层和预后评估密切相关。

重症监护室中以胸腹水首发的儿童非霍奇金淋巴瘤流式诊断及临床特点分析

目的评估流式细胞术行胸腹水免疫分型在儿童非霍奇金淋巴瘤（non-hodgkin’slym-phoma，NHL）诊断中的应用特点。方法2011年2月_2013年11月上海市儿童医院重症监护室（ICU）中12例诊断NHL患儿，男11例，女1例，年龄1～13岁，对病程中首发出现胸水或腹水的患儿，均应用流式进行免疫分型分析。免疫分型抗体包括CD45、CD10、CD33、CD7、CD1a、MPO、cCD3、CD79a、CD22、CD19、CD20、CD5、CD3、κ、λ、αβ、γδ和CD56等常见的T、B和NK标记，必要时加做CD30标记。结果12例伴有胸腹水的患儿最终均确诊为NHL，其病情危重，进展迅速。流式细胞术免疫分型诊断为NHL-B系6例，其中5例为腹水，1例为胸水，B系中CD20都出现高表达；诊断为NHL-T系4例，胸水3例，胸腹水混合1例，T系中αβ或γδ出现单克隆表达；另2例出现CD30的表达，确诊为间变大细胞淋巴瘤，2例均为胸水，其细胞形态学具有异质性。结论胸腹水流式细胞术免疫分型在儿童淋巴瘤辅助诊断中具有早期、快速和准确的特点，为早期化疗及抢救争取了时间，并为化疗中联合应用美罗华等靶向药物提供依据。

儿童非霍奇金淋巴瘤的临床及病理特点

目的对73例儿童非霍奇金淋巴瘤临床资料进行回顾性分析,明确其临床特点、病理类型及与疗效的关系。方法收集2014年10月至2018年10月上海市儿童医院73例初诊非霍奇金淋巴瘤患儿资料,其中男52例,女21例;年龄2~13岁。对所有患儿发病的起始或累积器官、病理诊断、疾病分期、手术及疗效等进行综合评估。结果73例儿童非霍奇金淋巴瘤中66例获得明确的病理诊断,其中38例由手术确诊,20例由活检确诊,且均通过免疫组织化学明确,8例通过流式细胞术等确诊;另7例中的6例获大致病理分类,仅1例分类不明。66例明确病例中以伯基特淋巴瘤最多为31例,其余依次为T-淋巴母细胞型14例、间变大淋巴瘤7例、B-淋巴母细胞型6例、弥漫大B淋巴瘤5例、结外鼻型自然杀伤/T细胞淋巴瘤1例、母细胞性浆细胞样树突细胞瘤1例和脂膜炎样T淋巴瘤1例;起始部位或累积器官涉及多个器官,以颈部(20例)、腹腔(15例)、纵隔(6例)等最为多见;临床转归与疗效中Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期的完全缓解率分别为100.0%、85.1%和72.2%;Ⅲ期和Ⅳ期患儿无事件生存率低于Ⅱ期组患儿(80.9%比66.7%比100.0%),病理类型分组结果显示淋巴母细胞淋巴瘤较伯基特淋巴瘤无事件生存率更低(73.7%比90.3%),但差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论儿童非霍奇金淋巴瘤男性发病多,婴幼儿少见,病理类型较成人单纯,以伯基特淋巴瘤最多,临床分期和病理类型与预后可能相关。

1例特殊血小板减少症患儿报道

血小板是由骨髓造血组织中的巨核细胞产生，呈圆盘或椭圆形小体，直径为1．5-3.0μm，具有维持血管内皮完整性，以及黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩等功能，而血小板计数是测定单位容积血液中血小板的数量[1]。血小板计数是血常规检测报告中一项重要指标，目前主要使用全自动血细胞分析仪进行血小板计数，多数是电阻抗法的原理。血小板计数正常参考范围为（100-300）×109／L。机体正常的凝血和止血功能依赖于一定数目、功能正常的血小板。临床上，血小板减低是引起出血的常见原因，血小板计数在（20-50）×109／L时，可有轻度出血或术后出血症状，血小板计数低于20×109/L时，可出现较严重的出血，尤其是内脏出血，常危及生命。因此，血小板计数尤其是血小板计数减低对临床有重要的意义。近期，发现1例特殊的血小板减少症病例，现报道如下。