2011-2016年上海市儿童医院临床分离细菌耐药性监测

目的了解上海市儿童医院临床分离菌种类、分布及对常用抗菌药物的耐药性变化。方法采用纸片扩散法进行药敏试验,按照CLSI 2016年标准判读结果,WHONET 5.6软件进行数据分析。结果 2011-2016年共收集非重复菌株23259株,革兰阳性菌10885株(46.8%),革兰阴性菌12374株(53.2%)。甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分别占各自菌种的35.8%和82.2%,其中MRSA的检出率由2011年27.4%上升至2016年42.9%。MRSA和MRCNS对绝大多数测试药物的耐药率均显著高于MSSA和MSCNS。肠球菌属中,屎肠球菌对所测试抗菌药物的耐药率显著高于粪肠球菌。非脑膜炎肺炎链球菌中青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)908株,占31.2%。未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的革兰阳性菌株。革兰阴性菌对碳青霉烯类的耐药率显著上升,其中肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别由2011年的3.1%和4.8%上升至2016年的28.7%和37.4%;铜绿假单胞菌对上述两药的耐药率分别由2011年的13.8%和16.5%上升至2016年的18.8%和19.4%;鲍曼不动杆菌则分别由38.3%和39.9%上升至68.4%和69.7%。结论监测期间儿童患者分离到的MRSA、碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌、广泛耐药鲍曼不动杆菌检出率仍处于较高水平,对临床抗感染治疗构成严重威胁,需重视儿童临床耐药监测。

上海市儿童医院2017—2019年输血督查分析

目的通过对上海市儿童医院2017—2019年督查结果分析,以期发现问题,及时改善,保障患儿安全用血。方法 2017年1月—2019年12月对上海市儿童医院按照每季度督查1次的频率进行输血督查,督查指标包括4个主要部分:输血质量、用血评估、计划用血和输血病历质量,每次督查结果定期反馈给医务科,予以公示且提出持续改进方案。结果除运行输血专项质量监测的督查软件外,实现了输血的闭环管理,做到科学追溯;质量指标方面在出院人均用血量、手术台均用血量和急诊人均用血量等指标呈下降趋势,持续改善中;严格执行计划用血制度,每季度公布各科室计划用血情况,针对问题找出原因,采用提高自身输血、鼓励微创手术、内科纠正贫血等综合措施来做到合理用血;输血病程和同意书方面推行电子化病历,设置专门输血病程录防止漏写,重点关注输血前指征和输血后疗效评估,并与医师考核挂钩。结论定期的输血质量督查有助于输血质量的持续改进,保障输血安全。

2016-2018年上海市儿童血流感染病原菌的种类分布及耐药性分析

本文旨在探讨2016—2018年上海市儿童医院患儿血流感染病原菌的种类分布及耐药状况,为临床预防和治疗血流感染提供合理的用药依据。采用全自动微生物分析系统对血培养分离出的病原菌进行菌鉴定和药敏试验,分析细菌种类分布特点及耐药情况。期间共送检标本24687份,分离出病原菌2092株,阳性检出率为8.5%。其中革兰阳性菌占84.4%,革兰阴性菌占15.6%;检出率居前5位的分别为凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative Staphylococcus,CoNS)、肠球菌、肺炎克雷伯菌、链球菌、大肠埃希菌。新生儿科患儿血培养阳性检出率最高,为34.5%,其中CoNS的分离率明显高于其他科室,其平均报阳时间为(32.53±12.36)h。未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌和肠球菌。亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦对大肠埃希菌的抗菌活性较强,耐药率低于10%。肺炎克雷伯菌对第3代头孢菌素的耐药率达80%以上,对碳青霉烯类的耐药率逐年上升,2018年为62.5%。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率为9.1%。鲍曼不动杆菌对大部分抗菌药物的耐药率在60%以上,对碳青霉烯类的耐药率为66.7%。结果表明,儿童血培养病原菌种类复杂,CoNS占较大比例,导致血流感染的诊断更加复杂。因此,了解儿童血流感染病原菌的种类分布特征和耐药情况将有助于指导临床合理使用抗菌药物。

上海市5岁以下儿童腹泻病例轮状病毒感染流行病学特征分析

【目的】了解上海市五岁以下儿童腹泻患者轮状病毒检出状况及其人群分布，为儿童腹泻预防和控制提供参考。【方法】对本院2016年11月至2017年8月门诊和住院的5岁以下儿童进行粪便检测，采用X2检验了解轮状病毒检出率的影响因素。【结果】本院5岁以下儿童轮状病毒检出率为18．1％；2016年12月至2017年3月阳性检出率较高；不同季节、年龄、就诊类型患者轮状病毒检出率具有统计学差异（P〈0．05）。【结论】年龄1～2岁、冬季、门诊就诊是5岁以下儿童轮状病毒检出的危险因素，应给予高度重视。

巢式多重聚合酶链反应快速诊断儿童脑膜炎/脑炎

目的探讨巢式多重聚合酶链反应(PCR)在儿童脑膜炎/脑炎诊断中的价值。方法采用回顾性病例对照研究。收集2017年5月—2020年5月上海市儿童医院82例确诊或疑似中枢神经系统感染患儿的脑脊液样本。收集患儿临床资料,了解患儿抗菌药物使用情况。采用巢式多重PCR检测病原体,并同步进行细菌培养、脑脊液常规和生化检测。结果82例脑脊液样本中,有31例检出病原体,其中20例检出病毒、11例检出细菌。细菌组脑脊液样本白细胞计数、蛋白、乳酸脱氢酶和患者抗菌药物使用天数、住院天数均显著高于病毒组(P<0.05);葡萄糖水平低于病毒组(P<0.05);阿昔洛韦使用例数少于病毒组(P<0.05)。巢式多重PCR与培养法判断细菌性脑膜炎/脑炎的一致性较好(Kappa=0.659,P<0.001),与实验室指标判断病毒性脑膜炎/脑炎的一致性亦较好(Kappa=0.737,P<0.001)。结论巢式多重PCR可以作为辅助诊断中枢神经系统感染患儿脑脊液样本病原体感染的新方法,可提高儿童脑膜炎/脑炎的诊断效率。

儿童肺炎链球菌血清型分布及其对抗菌药物的耐药性

目的了解上海交通大学附属儿童医院临床分离的肺炎链球菌血清型分布和对抗菌药物的耐药状况,为控制耐药菌株的播散和疫苗免疫预防的可行性提供参考依据。方法 2007年10月—2008年5月该院就诊患儿咽喉部分泌物中分离的肺炎链球菌株。采用荚膜肿胀试验进行血清型分析,E试验法检测菌株对8种抗菌药物的敏感性。结果临床共分离到338株肺炎链球菌,主要血清型依次为19F 138株(41.0%)、19A 67株(19.8%)、14型30株(8.9%)、23F 14株(4.1%)、6B 13株(3.8%)、6A 12株(3.6%)和15B 10株(3.0%)。在青霉素不敏感菌株(PNSP)和红霉素耐药株(ERSP)中多价疫苗(PCV7)的覆盖率分别为41.9%(26/62)和59.6%(198/332),PCV13的覆盖率分别为72.6%(45/62)和84.9%(282/332)。青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)的血清型主要集中在19F、19A和未能分型株。除未能分型株之外,血清型的分布在2岁以下婴幼儿和2～5岁儿童之间没有显著差异。338株肺炎链球菌中,青霉素敏感株(PSSP)占81.7%(267/338),青霉素中介株(PISP)占10.9%(37/338),青霉素耐药株(PRSP)占7.4%(25/338)。19F和19A型的PNSP(PISP+PRSP)对阿莫西林-克拉维酸、头孢曲松的耐药率显著高于PSSP(P<0.01)。未能分型株的PNSP对阿莫西林-克拉维酸、头孢曲松以及头孢呋辛的耐药率显著高于PSSP(P<0.01)。结论该院临床分离的肺炎链球菌最常见血清型为19F、19A、14、23F、6B和6A,PCV13能覆盖多数PNSP和ERSP,应用该疫苗应能有效地预防儿童肺炎链球菌的感染和控制耐药菌株传播。

儿童分离流感嗜血杆菌的耐药性及β-内酰胺酶基因分型

目的探讨流感嗜血杆菌在儿童患者中的耐药情况和β-内酰胺酶基因分型。方法收集2016年上海市儿童医院临床分离流感嗜血杆菌316株;纸片扩散法检测细菌对抗菌药物的耐药性,头孢硝噻吩纸片法检测细菌β-内酰胺酶表型,PCR方法对细菌β-内酰胺酶进行基因分型。结果 316株流感嗜血杆菌对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、氨苄西林、阿奇霉素、头孢呋辛和氨苄西林/舒巴坦耐药率分别为67.7%、52.2%、28.5%、26.9%和10.8%,对头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸敏感率均> 90%。41.1%(130/316)菌株检测到β-内酰胺酶基因,与表型一致,基因分型均为TEM-1型,未检测到ROB-1型。结论三代头孢和加酶抑制剂抗菌药物(头孢噻肟和氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸)对儿童感染流感嗜血杆菌有较好的抗菌活性;流感嗜血杆菌β-内酰胺酶基因分型均为TEM-1型。

儿童肺炎支原体23S rRNA基因位点突变检测分析

目的了解儿童肺炎支原体(MP)大环内酯类耐药基因(23SrRNA)位点突变,以及与临床资料的相关性。方法收集该院354份肺炎患儿的呼吸道标本,采用实时荧光定量PCR法检测MP及23SrRNA位点突变(A2063G或/和A2064G)情况,并将MP阳性患儿分成位点突变组和未突变组,比较两组之间的临床资料。结果 354份呼吸道标本中,166份检测为MP阳性(46.9%),且135份MP阳性标本中存在23SrRNA基因位点突变(阳性检出率81.3%),31份未检测到23SrRNA基因位点突变。分析突变组和非突变组的临床资料发现两组在年龄和性别方面比较差异无统计学意义(P>0.05),但突变组的重症肺炎和肺外并发症发生率高于未突变组(P<0.05),且平均住院时间和平均发热时间均较未突变组长(P<0.05)。结论 MP 23SrRNA基因位点突变的较高检出率提示MP对大环内酯类耐药率较高,这为临床MP的感染、治疗提供一定的参考依据。

血小板参数指标对儿童血小板减少症病因分析的意义

目的探讨血小板(PLT)相关参数[PLT计数、血小板压积(PCT)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板平均体积(MPV)、大血小板比例(P-LCR)]对儿童PLT减少症病因分析的指导价值。方法选择PLT减少患儿139例,其中明确诊断为特发性PLT减少症(ITP)48例、再生障碍性贫血(AA)19例、急性白血病(AL)9例、髓外肿瘤[神经母细胞瘤(N)、肝母细胞瘤(H)]27例、急性感染(INF)36例,同期健康体检儿童84名作为正常对照组,检测PLT相关参数并进行统计分析。结果 PLT计数、PCT 2个参数结论具有一致性,MPV与P-LCR 2个参数结论具有一致性,MPV参数结论具有相对独立性。所有病例组PLT计数、PCT明显低于对照组(P<0.05),MPV、P-LCR明显高于正常对照组(P<0.05)。除AL组外,其余各病例组PDW与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05)。在各病例组中,INF组PLT计数、PCT 2个参数较其他组高(P<0.05);INF组PDW、MPV和P-LCR 3个参数较ITP组和AA组低(P<0.05)。结论不同疾病组PLT相关参数具有不同的特点;PLT相关参数对指导PLT减少症病因的判断具有一定意义。

儿童平均血小板体积、维生素D及免疫球蛋白E水平的相关性研究

目的探讨儿童平均血小板体积(MPV)、血清维生素D(VD)及免疫球蛋白E(IgE)水平之间的相关性。方法选取该院就诊患儿775例,按照MPV、VD及IgE水平诊断标准进行分组,采用相应检测方法分别检测MPV、VD及IgE水平变化,并分析3个指标之间的相关性。结果不同VD水平组间MPV水平比较差异有统计学意义(P<0.05),不同IgE水平组间MPV水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。MPV与VD水平之间呈负相关(r2=0.026,P<0.01),MPV与IgE水平之间呈正相关(r2=0.008,P<0.01),IgE与VD水平之间呈负相关(r2=0.08,P<0.01)。结论 VD水平与MPV、IgE水平之间呈负相关,IgE与MPV水平之间呈正相关,补充VD水平可抑制血小板活化和炎性反应,在预防和治疗超敏反应性疾病中有显著的临床价值。

儿童患者下呼吸道标本苛养菌阳性分离率的影响因素分析

目的分析儿童患者下呼吸道标本苛养菌(肺炎链球菌和流感嗜血杆菌)阳性分离率的影响因素。方法选取210份下呼吸道标本,分别在采集后0.5 h、2 h、6 h、12 h、24 h接种于血平皿和巧克力平皿,研究运送时间、运送培养基和不同接种培养基对苛养菌阳性分离率的影响。结果 200份合格下呼吸道标本研究结果显示:随着标本放置时间的增加,肺炎链球菌和流感嗜血杆菌阳性分离率呈现下降趋势,除0.5 h、2 h时间段外结果差异具有统计学意义(P<0.05),但0.5 h、2 h 2个时间段样本阳性率无差异;含半固体培养基的阳性分离率在不同时间段均高于其他2种运送培养基,但差异并无统计学意义(P>0.05);肺炎链球菌和流感嗜血杆菌在两种商品化平皿中阳性分离率、生长情况差别不大(P>0.05)。结论选择合适的运送时间、运送培养基和接种培养基对于提高苛养菌阳性分离率具有一定的意义。

儿童脊肌萎缩症的基因诊断

目的对临床诊断疑似为脊肌萎缩症(SMA)的患儿进行运动神经元生存基因(SMN)缺失分析,通过基因诊断对SMA进行确诊。方法收集2015年1月至2016年12月上海市儿童医院新生儿科及神经内科就诊的疑似SMA患儿29例,患儿就诊年龄11 d～14岁。采用多重连接探针扩增(MLPA)技术对上述患儿外周血DNA样本进行基因诊断。结果 15例存在SMA致病突变,疑似患儿的SMA基因诊断率为51.7%(15/29)。其中8例为SMN1基因外显子7和外显子8纯合缺失;3例为SMN1基因外显子7和外显子8纯合缺失,SMN2基因外显子7拷贝数增加;4例为SMN1基因外显子7纯合缺失,外显子8杂合缺失。另外14例存在不直接致病的突变。按照SMA国际诊断标准,15例确诊患者中Ⅰ型5例,Ⅱ型5例,Ⅲ型5例,均占33.3%。其中Ⅰ型的5例患儿均为SMN1基因外显子7、8纯合缺失,仅有1例存在SMN2基因外显子7拷贝的轻度增加。结论 MLPA技术灵敏度较高,可作为SMA疑似患者首选的诊断方法,为SMA的明确诊断提供依据。

品管圈活动在我院检验科全自动标本处理系统故障管理中的应用

本文通过运用品管圈的管理工具来探讨医院检验科贝克曼全自动标本处理系统的月故障次数高的原因和改进措施,并降低设备月故障的次数。通过品管圈活动各项步骤的逐一实施,结合现状调查和各种分析方法,形成一套完整的品管圈活动的成果。通过实施后,2017年我院检验科全自动标本处理系统的月故障次数从平均14次/月,降低到8次/月。品管圈的方法在降低设备故障次数,提高设备运行性能上效果明显。该模式经过标准化和提炼,可以将整个模式在检验类设备上全面铺开,大大提高检验科人员的工作效能。

儿童白血病中34种ph样ALL基因筛选的临床研究

目的对白血病儿童进行34种ph样ALL基因筛选,明确其在预后评估中的临床意义。方法 2016年2月-2018年10月上海市儿童医院119例初发ALL患儿,男69例,女50例,年龄6个月~17岁,应用实时荧光探针PCR法进行Ph样ALL相关34种基因的筛选,筛选阳性者再进行监测。统计学方法应用SPSS 16. 0进行χ~2检验和生存分析。结果 119例初发ALL患儿,ALL-B109例,ALL-T 10例,ph样ALL基因筛选的阳性率为18. 5%(22/119)。阳性的ph样ALL基因包括:IKZF3-8(IK6) 8例次,CRLF2高表达16例次,EBF1-PDGFRB 1例次。其中3例为2种基因同时存在:IKZF3-8和CRLF2高表达共阳性2例,IKZF3-8和EBF1-PDGFRB共阳性1例。上述119例ALL分为ph样ALL基因阳性组(22例)和ph样ALL基因阴性组(97例)。第19天和第46天的流式MRD监测结果两组差异无显著性。ph样ALL基因阳性组总体生存率低于阴性组(P=0. 037),而无事件生存率无差异(P=1. 0)。结论 ph样ALL基因阳性患儿总体生存率降低,可用于儿童白血病的预后评估。

细胞遗传学技术在儿童急性白血病诊断中的应用价值

急性白血病(acute leukemia,AL)是造血干细胞恶性克隆性疾病,为发病率占首位的小儿临床恶性血液肿瘤疾病。AL可以分为两大类:急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)和急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)。主要临床症状为贫血、出血、器官浸润和感染等,严重威胁患儿生命安全[1]。国际上一般通过MICM[综合形态学(morphology)、免疫学(immunology)、细胞遗传学(cytogenetics)、分子生物学(molecule biology)]分型对初诊恶性血液病患者进行准确诊断与规范治疗,以提高患者生存率[2-4]。因此,及时、有效的诊断对于AL患儿的预后和治疗具有十分重要的意义。本研究采用常规染色体核型分析和荧光原位杂交技术对140例AL患儿进行检测,探讨联合检测对提高白血病染色体异常检出率的价值。

儿童PLT计数和Fib水平与TEG参数间的关系

血栓弹力图(thromboelastogram,TEG)能提供由凝血启动到血小板联结形成、纤维蛋白丝形成、血块生长、最大血块形成、血块降解至溶解的全部信息[1],可动态监测凝血全过程。与常规检测相比,TEG更加快捷、精确,是整体评价凝血功能的敏感试验[2]。常用监测指标为凝血反应时间(reaction time,R)、凝血形成时间(clotting time,K)、凝血形成速率(Angle角)、最大振幅(maximum amplitude,MA)、综合凝血指数(coagulation index,CI)。本研究同时行纤维蛋白原(fibrinogen,Fib)和血小板(platelet,PLT)计数检测,探讨K值、Angle角、MA值与Fib和PLT计数的相关性。

儿童中性粒细胞功能异常的临床特点研究

目的通过对41例中性粒细胞功能测定异常的患儿进行回顾性分析,明确其发病和临床特点、以指导疾病诊断和预后判断。方法 2014年10月-2019年12月,上海市儿童医院应用流式细胞法进行中性粒细胞功能检测,以DHR123标记中性粒细胞设门,PBS为对照,经PMA刺激后,其百分比小于90%或刺激指数小于100定义为异常,每次测试均以正常儿童为对照。结果中性粒细胞功能异常者共41例,其中男28例,女13例,年龄23天-13岁,中位年龄3岁,住院35例,门诊6例;住院科室依次为呼吸科13例、肾脏免疫科6例、消化科8例、PICU 4例、新生儿科3例、血液科1例;门诊共6例:其中免疫门诊4例,儿内科门诊2例,临床表现和特点多为反复肺炎、呼吸道感染,脓毒血症或败血症,以及各组织脓肿、关节炎、中耳炎等,确诊和疑似慢性肉芽肿的仅为7例;所有基因检测仅6例,4例阳性。结论中性粒细胞功能异常患儿分布于各科室,临床几乎均出现反复、严重感染、预后差等特点,与慢性肉芽肿病高度相关,易漏诊,需基因检测进一步明确诊断。

儿童患者中分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学分析及耐药机制研究

目的研究儿童患者中分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的流行特征及耐药机制。方法收集2013年1-12月上海市儿童医院临床微生物室分离的12株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌,采用琼脂稀释法检测其对常用抗菌药物的耐药性,乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验和3'-氨基苯硼酸(APB)协同试验进行碳青霉烯酶表型分析,PCR扩增及DNA测序进行碳青霉烯酶基因型确证,接合试验检测碳青霉烯酶耐药基因是否位于质粒上,脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)检测菌株间基因相关性。结果 12株CRKP对多黏菌素E均敏感,对头孢菌素类耐药率均为100%,对亚胺培南、美罗培南和厄他培南耐药率分别为91.7%、91.7%和100%。PCR及DNA测序显示12株CRKP中8株产KPC-2,1株产NDM-1,3株未检出碳青霉烯酶。将12株CRKP与大肠埃希菌J53进行接合,获得3株接合子。PFGE分型显示,12株CRKP可分为4个型3个亚型。MLST结果显示,8株blaKPC阳性肺炎克雷伯菌均为ST11型,1株blaNDM-1阳性肺炎克雷伯菌为ST278,3株不产碳青霉烯酶菌分别为ST76、ST37、ST610。结论产KPC-2型碳青霉烯酶是该院分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制,产NDM-1阳性的肺炎克雷伯菌已在该院出现。

2005—2014年CHINET儿童患者分离革兰阴性菌耐药性监测

目的了解2005-2014年中国主要地区儿童患者中革兰阴性分离菌对常用抗菌药物的耐药性。方法中国主要地区19所教学医院（17所综合医院和2所儿童医院）分离自儿童患者的革兰阴性菌，采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药物敏感试验。按CLSI2014版标准判断结果。结果2005-2014年收集各医院儿童患者革兰阴性菌63294株，其中肠杆菌科细菌43109株，占68．1％，不发酵糖革兰阴性杆菌13994株，占22．1％。儿童患者分离革兰阴性菌的检出率呈下降趋势：2006年为14．4％，2014年为12．1％。肠杆菌科细菌对头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶及头孢吡肟平均耐药率较高，对碳青霉烯类、氨基糖苷类和酶抑制剂复合制剂平均耐药率均〈10％。大肠埃希菌和克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）平均产ESBL率分别为68．4％和62．2％。肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素、两种酶抑制剂复合制剂及头孢菌素类耐药率明显上升。变形杆菌属、枸橼酸杆菌属及沙雷菌属对碳青霉烯类耐药率有下降趋势。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南耐药率也呈上升趋势。铜绿假单胞菌对所测试的抗菌药物耐药率有下降趋势。嗜麦芽窄食单胞菌及伯克霍尔德菌属检出率不断增多但对所测试抗菌药物的耐药率变化不大。流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率及产β内酰胺酶率均在30％～45％。2014年碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌检出率为15．9％。2005-2014年均有广泛耐药（XDR）菌检出，XDR铜绿假单胞菌检出率在0．2％～2．0％；XDR鲍曼不动杆菌和XDR肺炎克雷伯菌检出率分别在0．9％-24．6％和0～4．2％。结论分离于儿童患者革兰阴性菌的耐药性总体呈上升趋势，碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌和XDR的检出率不断增多是抗感染治疗的一大挑战，应引起临床关注。

上海地区98例手足口病患儿中肠道病毒71型的基因型分布

【目的】探讨上海地区98例手足口病患儿肠道病毒71型(EV71)的基因型的分布情况。【方法】选取2017年1月至2018年5月于本院诊断为手足口病患儿的98份粪便标本,采用反转录半巢式PCR(RT-nPCR)方法对标本中EV71进行检测。【结果】98份标本中28份为阳性EV71 RNA,检出率为28.6%;测序结果表明此28份阳性标本为EV71 C4型。【结论】上海地区98例手足口病病原体为C型EV71病毒;不同患儿间的EV71病毒有一定的变异。