Hb D Punjab基因的鉴定——DNA 扩增在异常血红蛋白研究中的应用

本文应用作者设计的寡核苷酸引物和探针,通过聚合酶链反应(PCR)扩增β珠蛋白DNA序列,并通过限制酶EcoRI酶谱分析或寡核苷酸杂交,快速鉴定Hb D Punjab基因。应用这种技术先后对汉、藏、哈萨克等3个民族4个家系的Hb D Punjab基因进行了鉴定。

中国人血红蛋白 HbQ-Thailand 的研究

本文综合报道在中国大陆发现的十个HbQ-Thailand家系及其在中国大陆的地理分布,并对α~Q基因组织进行分析。

人类生化遗传学和疾病

人类生化遗传学是一门边缘学科,它研究人类遗传物质的生化性质及其对人体蛋白质合成和代谢的调节控制,从而揭示人类遗传性状的发育和遗传疾病的生化本质。人类的遗传性状千变万化,但归根结底都和蛋白质的特性有关。

用DNA扩增法诊断血红蛋白病

本文介绍一种快速、灵敏的基因诊断技术——聚合酶链反应体外扩增DNA,及其在α-和β-地中海贫血产前诊断和HbS基因检测的应用。聚合酶链反应的样本可以直接用溶解的羊水细胞或绒毛标本,也可以用从干血纸片抽提的DNA。扩增DNA的分析毋需放射性DNA探针和Southern杂交,产前基因诊断可在5小时内完成。

中国人凝血因子Ⅷ基因多态性和血友病A的产前诊断

本文应用克隆化的凝血因子Ⅷ(下称FⅧ)基因cDNA及其旁侧的DNA片段作为探针,分析了123名中国正常人和22例血友病A患者的FⅧ基因及其旁侧的多态性位点Bcl Ⅰ/18e,Xbal/221,MspI/St14和BgI I/DX13。获得了中国人上述4个位点的RFLP资料,并应用RFLP连锁分析对2例血友病A高危妊娠进行了产前诊断。

用DNA扩增法检测镰状细胞基因

本文报道应用DNA扩增技术对国内首例镰状细胞特征患者(Hb s杂合子)进行基因诊断。方法是从患者干血标本中微量抽提基因组DNA,通过聚合酶链反应(PCR)扩增其β珠蛋白基因,经限制性内切酶MstⅡ消化后作电泳分析直接检测Hb S基因。本文介绍的DNA诊断技术快速、灵敏、简便,它不需要放射性同位素标记的探针,可以采用干血抽提的DNA,因此,对遗传病基因诊断和携带者的筛查具有重要价值。

血红蛋白G-Chinese的结构分析

本文报道了在中国内地首次发现的一例Hb G-Chinese(α230(B11)Glu→Glnβ2),并应用高压液相层析和微量双偶合法等技术对其一级结构进行了分析。

β-地中海贫血的基因治疗

β-地中海贫血是世界范围内广为流行的一组遗传性溶血性疾病,它以β珠蛋白链合成的减少(β+-地中海贫血)或缺乏(β0地中海贫血)为特征。长期以来对这种发病率高和严重危害人类身体健康的疾患,临床医师只能依赖于定期的输血和支持疗法,然而反复输血又导致患者体内含铁血黄素的沉着,以致许多患者继发心脏、肝脏和肾脏等重要器官的功能衰竭而死亡。β-地中海贫血有各种不同的变型,为研究人类基因及其表达的遗传控制提供了极好的天然模型,它引起了生物化学、遗传学、生理学、分子医学等领域的科学家浓厚兴趣。因此在过去短短几年中,对人类血红蛋白的研究己取得了惊人的进展。

一个Duchenne型肌营养不良症家系的调查和Xp21区RFLP分析

应用限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析法对一个Duchenne型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy.DMD)家系进行了遗传学研究,包括家系调查和用8种限制性酶及由X染色体Xp21区不同部位获得的9种DNA探针,对Xp21区的13个位点进行了RFLP分析。从中发现该家系中DMD基因携带者有5到6个位点具有杂合的多态性,可以用作遗传标记,进行DMD携带者的检测和产前基因诊断。

血红蛋白分析技术Ⅻ.——珠蛋白链合成速率的测定

珠蛋白链合成速率的测定是用含3H或14C标记的亮氨酸的红细胞保温液与红细胞一起保温,使新合成的珠蛋白中掺入放射性同位素,然后进行珠蛋白链的解离,分别测定α链和β链的放射强度,据此计算出两者相对合成速率。目前这种技术在国外已成为研究血红蛋白分子病的重要手段。

血红蛋白M Iwate(附一例报道)

本文报道了一例祖籍是上海市宝山县的遗传性青紫的病人,家系调查中发现,此病至少遗传了四代。应用醋酸纤维薄膜电泳能从患者溶血液中分离出一种快速异常的血红蛋白。通过血红蛋白理化性质测定和结构分析,证实其α链N端第87位的组氨酸被酪氨酸替代,即血红蛋白MIwate[α87(F8)His→Tyr]。该例异常血红蛋白在中国属首次报道。

血红蛋白E-β°地中海贫血症(一个家系的分析)

本文报道1例HbE复合β°地中海贫血患者及其家系各成员的血红蛋白分析结果,并对HbE的结构分析和β地中海贫血的类型进行了讨论。

一Hb Queens家系及其化学结构分析

本文报道在安徽蚌埠发现的一个Hb Queens家系。先证者的溶血液在pH8.6电泳中出现泳速相当于Hb G组的慢速血红蛋白区带。肽链分析证实此异常血红蛋白为α链异常。将异常α链经柱层析分离纯化后作指纹图,把指纹图的异常肽斑洗脱,用微量双偶合法作氨基酸顺序测定,发现异常肽斑为α34亮氨酸被精氨酸取代,由此证实此异常血红蛋白为Hb Queens(α_2^(34Leu→Arg)β_2)。

血红蛋白分析技术Ⅺ.——血红蛋白氧平衡曲线的测定

血红蛋白的重要生理功能是运送氧气,这是由于血红蛋白分子能够和O发生可逆的结合。氧与血红蛋白结合的关系通常用氧分压(PO)和血红蛋白氧饱和度(Y)构成的氧平衡曲线来表示,血红蛋白分子结构的异常往往会影响到它的氧亲和力(Oxygen affinity)。氧亲和力升高会导致向组织运送O减少,引起红细胞增多症;相反,氧亲和力降低,血红蛋白带氧能力下降,有时会出现紫绀症(Cyanosis)。

应用DNA体外扩增技术对血友病A进行产前诊断

本文报告用聚合酶链反应(PCR)DNA体外扩增技术对一例血友病A高危妊娠进行产前诊断的结果。绒毛DNA经人类Y-染色体特异DNA探针杂交鉴定出胎儿为女性。通过PCR扩增包含BclⅠ多态位点的特异DNA片段,然后进行扩增DNA的Bcl酶谱分析和寡核苷酸点杂交,诊断胎儿为血友病A携带者。

用DNA体外扩增法产前检测PAH 111 Arg→Ter突变

本文报道用聚合酶链(PCR)DNA扩增和寡核苷酸分子杂交技术对1例高危胎儿进行产前检查的研究结果。RFLP连锁分析虽然提示胎儿已从其母亲处遗传到一个致病基因,但其父方的PAH基因尚不能阐明,PCR扩增PAH基因第3外显子以及旁侧共300bp的核苷酸顺序,然后与一对相应于上述特异突变型的寡核苷酸探针进行杂交。结果表明,胎儿从父亲处遗传到这个PAH 111 Arg→Ter基因,产前诊断胎儿为PKU患者。

DNA扩增法行α-地中海性贫血产前诊断

α-地中海性贫血(简称α-地贫)是常见的一种遗传性血红蛋白病,高发于东南亚及我国华南地区,广东省发病率约为3.15%.Hb Bart’s 水肿胎儿综合征是其最严重类型,发病率为0.2%,该病系由于α-珠蛋白基因全部缺失或功能性缺陷所致.临床上常致死胎,死产和新生儿死亡,并可使孕产妇并发妊高征及产后出血等,严重危害母婴健康.故产前诊断是有重要意义的.

应用PCR DNA扩增技术产前诊断复合型地中海贫血

本文报道用一种简便的非同位素的基因诊断技术——扩增DNA的RFLP连锁分析,对一例同时有α-和β-地中海贫血危险的胎儿进行产前诊断的结果。绒毛标本毋需进行DNA抽提,直接通过聚合酶链反应(PCR)扩增其珠蛋白基因片段。凝胶电泳分析其扩增的α-珠蛋白DNA示明胎儿携带一个α-地贫1基因,用HgiAI多态连锁分析该家系扩增的β-珠蛋白DNA表明胎儿为β-地贫特征,因而诊断胎儿为α-地贫1和β-地贫基因的双重杂合子。进一步用9种特异于中国人β-地贫突变类型的寡核苷酸探针与扩增的β-珠蛋白DNA进行分子杂交,证实胎儿从其母亲处遗传得到β-28A→G突变基因。

在中国人PAH基因中发现一种新的中性突变以及它在苯丙酮尿症产前诊断中的作用

本文在对一例中国PKU患者的PAH基因进行碱基顺序分析时发现了一种新的中性突变或顺序多态位点:11外显子第399密码子GTA(Val)→GTT(Val)。应用PCR体外扩增和寡核苷酸杂交技术对100个正常人和39个PKU患者进行分析,发现此顺序多态性在正常和异常PAH基因中的分布频率分别为0.005和0.090,存在一定的差异性。该顺序多态可作为一种“遗传标记”成功地对一例不能用RFLP连锁分析作完全诊断的PKU高危胎儿进行了产前诊断。

血红蛋白病的产前诊断

血红蛋白病(Hemoglobinopathies)是一组在世界范围内广泛流行的单基因遗传性血液病,它主要分为珠蛋白链结构变化所致的异常血红蛋白病和珠蛋白链合成不平衡所致的地中海贫血症(ThalassemiaSy-