绿色荧光蛋白及其在植物分子生物学研究中的应用

绿色荧光蛋白 (GFP)是海洋生物水母 (Aequoriavictoria)体内的一种发光蛋白 ,近十年来成为在生物化学和细胞生物学研究和应用中用得最广泛的蛋白质之一。文章就绿色荧光蛋白的特性及其在植物分子生物学中应用的研究进展作了概述。

转基因水稻胚乳中表达铁结合蛋白提高稻米铁含量

为提高我国稻米的铁含量 ,通过农杆菌介导将自行克隆的菜豆 (Phaseoluslimensis)铁结合蛋白 (Ferritin)基因导入了一个高产粳稻 (OryzasativaL .ssp .japonica)品种中 ,获得 17个独立的转基因水稻株系。分子检测证明 ,外源基因在多数转基因水稻植株基因组中有 1～ 3个整合位点 ,并可稳定遗传。在水稻种子贮存蛋白谷蛋白基因GluB 1启动子的控制下 ,铁结合蛋白基因可在转基因水稻的种子中高效特异地表达 ,不同转化子中的表达量有明显不同。在转基因水稻种子中表达铁结合蛋白后对提高精米中的铁含量有明显的效果 ,相对于未转化对照最多可提高 6 4 % ,而锌的含量并无明显变化。

以不结球白菜无菌苗茎尖诱导筛选耐热变异体

以优质不结球白菜 [BrassicacampestresL .ssp .chinensis(L .)Makino]“小叶青”为供试材料 ,研究了平阳霉素处理浓度、时间、外源添加物对供试茎尖存活率以及激素配比对茎尖不定芽诱导率的影响。结果表明 :平阳霉素 80mg/L的 4h处理可作为适宜诱变处理 ,添加椰汁有利于茎尖存活 ;AgNO32 .0mg/L、BA 1.0mg/L、KT 2 .0mg/L的激素组合有利于诱导正常型不定芽和获得较高的诱导率。通过研究 ,建立了不结球白菜耐热变异体诱导及筛选技术程序 ,获得了耐热性提高的变异体材料。

秋水仙碱对大麦离体培养小孢子存活与成苗的影响

以 4份大田生长的优良大麦品种 /品系为材料 ,采用超速旋切法分离小孢子进行培养。提取液和预处理液中添加适当浓度的秋水仙碱可明显提高大麦小孢子的存活率。

K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备

利用 PCR技术 ,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的 K88菌毛蛋白亚基基因片段 ,将其克隆到 E.coli表达载体 p ET2 8a(+)中 ,构建了该基因的原核表达载体 p882 8,导入 E.coli BL 2 1(DE3) ,得到工程菌株。 SDS- PAGE分析结果显示 ,经 IPTG诱导 ,该亚基基因高效表达出重组 K88菌毛蛋白 ,约占菌体总蛋白的 30 %。用含重组蛋白的凝胶作为抗原 ,免疫新西兰大白兔 ,首次制备 K88菌毛蛋白亚基的抗血清。免疫学分析表明 。

外源基因在叶绿体表达系统中高效表达研究进展

综述叶绿体表达系统的特点、转化方法、同质化研究及提高外源基因在叶绿体基因组中表达水平的研究状况。

甜菊(Stevia rebaudiana)糖基转移酶基因的克隆及序列分析

利用与植物次生代谢产物糖基化相关的UDPG糖基转移酶的特征性保守区域 ,设计了同源简并引物 ,以甜菊基因组DNA为模板 ,PCR扩增获得甜菊糖基转移酶基因片段 .根据获得的基因片段设计引物GSTr和GSTf,分别与cDNA文库的T3 和T7通用引物扩增获得全长核苷酸序列的甜菊糖基转移酶基因 ,定名为sudpt 2 ,该基因全长 16 6 2bp ,包括poly(A)和一个 136 2bp的开放阅读框 ,编码 45 4个氨基酸 .与常见的糖基转移酶基因的相似性达 44 %～ 77% ,且具有UDPG糖基转移酶的特征性保守序列 .分子发育进化分析表明 。