上海市嘉定区羊非免疫无布鲁氏菌病小区创建实践

布鲁氏菌病是严重危害畜牧业发展、食品安全和人类健康的重要疫病,也是当前我国重点防控的人兽共患病之一。实践证明,无布鲁氏菌病小区建设是提升规模化养殖场生物安全防控水平、促进牛羊养殖业高质量发展和转型升级的重要举措。本文以上海市嘉定区建设非免疫无布鲁氏菌病小区的实践为例,从养殖场生物安全体系建设、疫病监测和官方监管等方面进行了阐述,全面总结了相关经验,以期为本区域乃至全国无布鲁氏菌病小区建设提供借鉴。

上海市农业环境污染源调查

本文论述了上海市郊区主要污染源和污染的种类、数量及污染程度。

上海市郊畜禽粪便处理利用发展方向

从控制大中型畜禽场畜禽粪便污染着手，结合上海市郊农牧业生产及经济的发展和郊区农业分区的特点，探讨了调整畜禽养殖业的结构和布局，发展适用的畜禽粪便处理技术和控制畜禽粪便污染的立法和法规等。

2013—2016年上海市项目核心示范猪场主要疫病的免疫抗体监测

为评估上海市部分规模猪场的免疫抗体水平，更好地指导生产实践，对9个项目核心示范猪场2013—2016年间1606份血清样品进行口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病等3种主要疫病的免疫抗体检测，并对不同规模场、不同区域、不同年份、不同采样时间点和不同阶段猪群的免疫抗体水平进行比较分析。结果显示：2013—2016年上海市部分规模猪场O型口蹄疫免疫抗体平均合格率为85.13%（95%CI：83.39%-86.87%），猪瘟免疫抗体平均合格率为84.65%（95%CI：82.89%-86.41%），高致病性猪蓝耳病免疫抗体平均合格率为95.77%（95%CI：94.79%-96.75%）；不同地区、不同年份间的部分疫病抗体合格率存在差异；9个核心示范猪场3种主要疫病免疫抗体水平呈现逐年上升趋势；不同采样时间点的O型口蹄疫免疫抗体合格率差异极显著，其他疫病不显著；生产母猪的免疫抗体水平优于商品肉猪。检测结果显示，通过持续跟踪监测、不断优化免疫程序、调整疫苗种类，上海市规模猪场的主要疫病得到了良好的控制。

上海市某郊区猪场戊型肝炎血清学调查

猪作为重要的经济动物,是与人类生活关系最为密切的家畜之一;然而,猪也是戊型肝炎等人畜共患病病原体重要的储存宿主。为了解上海市某郊区猪群中戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)的感染情况,从5个猪场采集健康猪血清样品共256份,采用ELISA方法进行HEV IgG抗体检测。结果表明:采集的256份样品中65份为HEV IgG抗体阳性,阳性率为25.39%。其中213份育肥猪血清样品中有55份为HEV IgG抗体阳性,阳性率为25.82%。不同猪场育肥猪血清HEV IgG抗体阳性率为6.67%~34.43%。分析某猪场中不同发育阶段猪的血清HEV抗体检测结果发现,随着猪日龄的增加HEV IgG抗体阳性率呈先降低、后升高趋势;母猪(>210日龄)血清HEV IgG抗体阳性率最高,达75.00%;保育猪血清中HEV IgG抗体阳性率最低,为3.85%;母猪HEV IgG抗体阳性率显著高于保育猪和育肥猪(P<0.05)。

上海市郊区若干水产品中七种元素含量的调查

近20余年来,随着城乡工业的迅速发展,郊区水域的污染日趋严重,地面水污染后有毒有害物被河、沟、塘、湖中的淤泥大量积聚.由于动物的遗传特性、生理解剖特征与生活习性,甲壳类和底栖类动物体内极易富集各类物质.包括有毒有害元素.由于这些水产类遍布全市城乡农贸市场,几乎每个人或多或少都要吃到这类农副产品.因此,调查这类食品的污染状况是十分必要的.一、样品的采集与处理1988年底至1989年初,在市区主要农贸市场上随机采集了少量螺蛳、河虾、海虾、黑鱼、河蚌及克拉氏螯虾.1990年底至1991年初又在郊区除崇明以外的八县一区县城的农贸市场随机补采了若干样品.样品采集后,洗净,沥干,去鳞,去骨,去外壳等,取可食部位,分别研磨成匀浆.

四个上海地方猪肉品质比较分析

为建立上海地方名猪肉质评价基础数据,对嘉定梅山猪、崇明沙乌头猪、金山枫泾猪和浦东白猪的背最长肌进行肉质性状、质构、氨基酸含量等指标进行检测分析。肉质性状检测结果显示:金山枫泾猪锁水能力显著高于其他3个品种(P<0.05),但嫩度最差;梅山猪肉色较好,肌内脂肪含量显著高于金山枫泾猪、崇明沙乌头猪(P<0.05)。质构指标测定结果显示:4个品种各有千秋,但就硬度和弹性指标来看,金山枫泾猪略好于其他3个品种;梅山猪的黏附性、凝聚力最低。氨基酸含量检测结果显示:梅山猪氨基酸总量最高,显著高于金山枫泾猪和浦东白猪(P<0.05);崇明沙乌头猪鲜味氨基酸含量最高。

上海地方猪种抗腹泻基因与免疫相关因子分析

为鉴定上海地方猪种上海白猪、枫泾猪和沙乌头猪中抗腹泻基因抗原加工相关转运体1(transporterassociated with antigen processing 1, TAP1)、α(1, 2)岩藻糖转移酶1[α (1, 2)-fucosyltransferase 1, FUT1]、天然抗性相关的巨噬细胞蛋白1(natural resistance-associated macrophage protein 1, NRAMP1)、黏蛋白4(mucin 4,MUC4)和黏蛋白13(mucin 13, MUC13)基因的有效遗传标记,为上海地方猪种资源特性提供参考,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism, PCRRFLR)和序列测序分析上述基因的多态性,结合部分免疫相关因子,探讨对3个上海地方猪种免疫力的影响。结果显示,3个猪种中TAP1和MUC4基因均具有抗腹泻基因型GG,而仅在枫泾猪和沙乌头猪中检测到MUC13基因抗腹泻基因型GG,在3个猪种中均未检测到FUT1和NRAMP1基因抗腹泻基因型AA。上海白猪、枫泾猪和沙乌头猪TAP1基因处于中度多态,上海白猪的MUC4基因处于低度多态,枫泾猪和沙乌头猪的MUC4基因处于中度多态,上海白猪MUC13基因处于中度多态,其中上海白猪和沙乌头猪的TAP1基因不满足HardyWeinberg平衡,枫泾猪的MUC4基因不满足Hardy-Weinberg平衡。上海白猪MUC13基因AA型的白细胞介素12(interleukin-12, IL-12)水平显著高于AG型,枫泾猪TAP1基因AA型的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor, TNF-α)指标显著高于GG和AG型,沙乌头猪TAP1基因AG型的IL-12指标显著高于GG型。以上研究结果对上海白猪、枫泾猪和沙乌头猪的抗腹泻育种和分子选育具有一定指导意义,为今后上海各地方猪种抗腹泻育种工作奠定了基础。

基于简化基因组的上海水牛遗传结构分析和家系鉴定

为提高上海水牛的育种效率和遗传种质资源丰富度,采用基因测序分型(genotyping by sequencing,GBS)技术对80头上海水牛进行基因组测序,质控后获得高质量的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),进行群体亲缘关系以及近交系数分析。结果显示:从80头上海水牛的24条常染色体和1条性染色体上共检出的99963个高质量SNP位点、874个连续纯合片段(runs of homozygosity,ROH);80头上海水牛分为2个大支(家系),A1和A2属于第一大支(家系A),包含9头公水牛、18头母水牛;B1、B2和B3属于第二大支(家系B),包含16头公水牛、37头母水牛。基于ROH测算近交系数的结果显示:25头公水牛和55头母水牛的平均近交系数分别为0.0145和0.0114。本研究构建了上海水牛家系,揭示了上海水牛的近交状态,为上海水牛繁育工作提供了科学依据。

上海农业生产中的自身污染与对策

上海市郊农业生产中的自身污染，目前主要有农药、化肥、畜禽粪尿和农用塑料薄膜。７０年代以前，上海曾施用过有机汞、有机氯等农药，对环境的影响较大。８０年代以来，影响较大的农药主要是有机磷和菊酯类；化肥主要是氮肥施用过多，导致蔬菜硝酸盐含量过高；畜禽粪尿已成为郊区突出的新污染源，造成水体的严重污染；各类农用塑料薄膜也是必须重视的新潜在污染物。

上海地区猪萨佩罗病毒的检测及遗传进化分析

为了明确猪萨佩罗病毒在仔猪腹泻病情中的作用,2016—2020年采集上海市及周边11个猪场腹泻病料,共计1446份。利用RT-PCR方法对其进行PSV筛检,并对阳性样品进行病原分离及病毒特性研究。结果显示:共筛检出256份PSV核酸阳性样品,阳性率17.7%。从阳性样品中成功分离到2株PSV病毒,全基因序列遗传进化分析显示2株PSV分离株聚集在中国PSV毒株集群上,分离株在3D区域4696—5945 bp处存在重组区域。病毒核苷酸分析发现中国PSV毒株与韩国PSV毒株核苷酸相似性为87%—88.5%,与欧洲PSV毒株核苷酸相似性为84.9%—87.3%。对VP1基因氨基酸序列分析发现分离株与参考株存在氨基酸位点突变,中间氨基酸序列保守,无突变及插入和缺少现象。PSV分离株与参考株均含有173位潜在糖基化位点,VP1蛋白分子表面抗原表位分布均匀。该研究可为猪萨佩罗病毒病原学及其疫苗的研制奠定基础。

不同温湿度组合对鹅种蛋孵化效果及孵化后雏鹅体重的影响

为研究不同孵化模式下温度和湿度对鹅种蛋孵化效果及雏鹅生长发育性能的影响,试验采用“单阶段”变温和“二阶段”恒温孵化模式,每种孵化模式设定两种不同的温度和湿度参数来评估其对孵化效果及雏鹅早期体重的影响。结果显示:①两种孵化模式具有相近的总体失水率(67%),但采用较高温度的孵化方案具有更高的孵化率(P<0.05)和更短的出雏窗口期(28.5~30 d)。②“单阶段”变温孵化模式的孵化率显著高于“二阶段”恒温孵化(P<0.05)。③鹅种蛋孵化周期中,第1~4周种蛋失重率分别为2.44%、4.85%、7.72%和10.67%,呈现前期失重大、后期失重小的规律。④“二阶段”恒温孵化模式下,采用37.6℃和64%的温湿度组合所生产的雏鹅在第2~4周的体重极显著高于37.5℃和65%的温湿度组合(P<0.05)。研究表明,二阶段恒温孵化模式(37.6℃+64%)以及单阶段变温孵化模式均能产生较好的孵化效果,采用“单阶段”变温孵化模式可提高孵化率,且优化关键孵化参数还能促进雏鹅的早期生长发育。

密码子优化和信号肽对猪圆环病毒ORF2基因在毕赤酵母表达中的影响

为了在毕赤酵母中高效表达PCV2ORF2基因,对PCV2ORF2基因编码的187个氨基酸密码子进行毕赤酵母偏爱性优化,利用两步PCR全化学合成优化后的ORF2基因。将优化前后的PCV2ORF2基因片段插入毕赤酵母表达载体pPICZα-C,构建重组质粒pPICZα-C-ORF2和p PICZα-C-ORF2op。将线性化的重组质粒电转化毕赤酵母GS115,并筛选Zeocin抗性重组子。同时,也研究了信号肽对PCV2ORF2表达效率的影响。SDS-PAGE和Western-blot分析结果表明,只有经密码子优化且去除ORF2基因自身信号肽的重组子能够分泌表达PCV2 ORF2蛋白,目的蛋白分子质量约为30 ku,表达的重组ORF2蛋白可被PCV2阳性血清识别,具有生物学活性。

新杨黑羽蛋鸡消化器官生长发育规律研究

为改善新杨黑羽蛋鸡配套系的生产性能,对新杨黑羽蛋鸡育雏期(1—6周龄)、育成期(7—18周龄)和产蛋期(19—80周龄)消化器官生长发育规律进行探究。以500羽1日龄新杨黑羽蛋鸡为测定群体,每周随机选取60羽进行称重,1—33周龄每周随机解剖10羽,45、47、55周龄及80周龄分别解剖50、14、20羽及36羽,测定鸡体重、免疫器官重、消化器官重以及消化道各段的长度,分析其变化规律。结果表明:新杨黑羽蛋鸡肌胃、腺胃快速生长期在9周龄之前,发育完全在13周龄左右;肠道的快速生长期为8周龄之前,21—24周龄再次快速生长,24周龄基本趋于稳定;肠道的最适生长曲线拟合模型为Bertalanffy,生长拐点在4周龄左右,肌胃的最适生长曲线拟合模型为Gompertz;体重与肝脏重和腺胃重、肠道长极显著相关(P<0.01);腺胃重与肝脏重极显著相关(P<0.01),与空肠长、十二指肠长显著相关(P<0.05);肌胃重与其他器官相关性不显著(P>0.05)。

补充后生元对犬粪便特性、血清生化指标及粪便菌群的影响

研究旨在探讨后生元对宠物健康的影响。选择12只比格犬,根据体重和性别一致的原则,随机分成两组(A组和B组),每组6个重复,每个重复1只犬。研究采用交叉试验,比较了成年健康比格犬采食添加200 g/d后生元的日粮及对照日粮期间血清生化指标及粪便菌群的差异。结果显示,采食基础日粮的比格犬平均粪便评分为2.97,采食添加后生元日粮的比格犬平均粪便评分为2.54。与采食基础日粮相比,采食添加后生元日粮的犬血清甘油三酯含量下降了51.16%(P<0.05),胆固醇含量下降了29.92%(P<0.05),血清尿酸含量下降了11.43%(P<0.05)。与采食基础日粮相比,采食后生元日粮的犬血清免疫球蛋白G(IgG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1)含量分别降低了7.85%、23.97%和29.54%(P<0.05)。后生元后可增加犬粪便中乳杆菌属(Lactobacillus)和芽孢杆菌(Bacillus)等有益菌的相对丰度,降低梭杆菌属(Fusobacterium)和厌氧螺菌属(Anaerobiospirillum)等有害菌的相对丰度。研究表明,日粮中补充后生元能够改善犬的肠道健康。

转基因抗除草剂大豆ZH10-6转化体特异性定量检测体系的建立

以新型转基因抗除草剂大豆ZH10-6外源插入片段的旁侧序列为靶标,建立了转化体特异性实时荧光PCR和单通道微滴式数字PCR精准定量检测体系,并邀请8家农业农村部检测中心对检测方法的准确性进行验证。结果表明:该转化体特异性实时荧光定量检测方法具有良好的特异性、重复性及广泛的适用性,定量极限达到50 copies∕μL,检测极限达到5 copies∕μL。该检测方法有望作为检测标准用于转基因抗除草剂大豆ZH10-6的定量检测,为该大豆品系的商业化应用及转基因标识等监管提供技术支撑。