基因工程牛生长激素高密度发酵表达的研究

通过对重组牛生长激素基因工程大肠杆菌摇瓶和5、30 L发酵罐发酵表达的研究,建立了基因工程牛生长激素的高密度发酵表达工艺,菌体密度最高可达到OD550=120,rbIL-2的表达量占菌体总蛋白的20%以上。

包含体表达基因工程牛生长激素提取、变复性及纯化的研究

为了取得较好的复性效果,对重组牛生长激素的纯化及变复性条件进行了研究。结果表明:发酵菌体高压匀浆破碎、离心得到的包含体在7.5 mol/L尿素中变性24 h后,以100 mmol/L Tris.HCl pH10.0稀释至尿素浓度4.5 mol/L,4℃复性48 h,对20 mmol/LTris.HCl pH9.0透析除盐可以成功对重组牛生长激素复性;采用截留分子量100 kD、5 kD超滤膜对复性重组牛生长激素浓缩,FPLC纯化后可得到高纯度的目标蛋白。

重组毕赤酵母产猪IFNα的诱导条件

采用Plackett-Burman实验设计,选取甲醇、酵母粉、蛋白胨、K2HPO4.12H2O、MgSO4、(NH4)2SO4、pH和PTM1这8个对重组猪IFNα表达量有影响的相关因子进行筛选,用SAS软件进行统计分析,分析表明:甲醇、蛋白胨以及K2HPO4.12H2O对重组猪IFNα表达量具有显著性影响;之后采用Box-Behnken设计及响应面分析法确定最佳的诱导条件。在最优条件下,重组猪IFNα表达量比优化前提高了2.46倍。

小反刍兽疫(PPR)疫苗研究进展

小反刍兽疫(PPR)是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的一类急性、烈性、接触性山/绵羊传染病。目前,PPR的防控措施包括疫区的隔离、消毒和弱毒疫苗免疫接种。本文综述了PPR疫苗的研究进展,主要包括弱毒疫苗、重组标记疫苗以及RNA干涉技术等。弱毒疫苗的热不稳定性是其在热带和亚热带地区应用面临的主要问题。将来,人们会更加重视标记疫苗及其配套血清学检测方法的研究,以区分自然感染动物和疫苗免疫动物,并最终在全球范围内根除PPR。