脂联素对人牙周膜成纤维细胞的作用

目的:原代培养人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cell,hPDLC),研究脂联素受体(adiponectinreceptor,Adipo R)在hPDLC中的表达情况,以及脂联素(adiponectin,ADP)对hPDLC增殖的作用。方法:收集因正畸需要而拔除的健康前磨牙10颗,玻片覆盖组织块法原代培养hPDLC,RT-PCR法检测分析AdipoR1和AdipoR2在hPDLC中的表达。使用不同浓度ADP(0,5,10,20ng/μL)刺激体外培养的hPDLC,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法,分别测定第1、4、7天的细胞增殖活性。采用SSPS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果:免疫组化显示,培养的细胞波形丝蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性,证明体外原代培养细胞及传代细胞均为中胚层组织来源的hPDLC,且无上皮来源细胞混杂。琼脂糖凝胶电泳检测显示,Adipo R2在人牙周膜成纤维细胞中表达阳性。MTT法检测的生长曲线显示,随着ADP浓度的增加,细胞增殖活性增加。培养24h后,C、D组与对照组相比差异显著(P<O.05);培养96h及168h后,各组与对照组相比差异显著(P<O.05)。结论:脂联素受体2在人牙周膜成纤维细胞中表达阳性,脂联素在一定浓度范围内可提高hPDLC的增殖活性。