miR-4429靶向PIK3R1调控细胞内质网应激通路影响乳腺癌恶性表型的机制

目的:探究微小RNA(miRNA)miR-4429对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭和凋亡的影响;并探究其与内质网应激相关通路基因PIK3R1的靶向关系及对内质网应激相关通路的调控作用。方法:通过脂质体转染法构建miR-4429过表达及敲低的MDA-MB-231细胞模型,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其效率;MTT法、克隆形成实验、Annexin-PI染色实验和Transwell实验分别检测MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡和侵袭;双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-4429和PIK3R1靶向关系,qRT-PCR和Western blot探究miR-4429对内质网应激通路的调控。结果:成功建立miR-4429过表达及敲低的MDA-MB-231细胞模型;miR-4429 mimic组中MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭能力均低于其Ctrl组,凋亡能力高于其Ctrl组(均P<0.05);miR-4429能够靶向性结合PIK3R1并抑制PIK3R1的蛋白表达,同时下调内质网应激通路相关基因。结论:miR-4429靶向性结合PIK3R1并下调内质网应激通路相关基因,抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭,促进凋亡,提示miR-4429可能是乳腺癌治疗的潜在靶点。

miRNA-4429对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及作用机制

目的 探讨微小RNA(miRNA)-4429对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及作用机制。方法收集100例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-4429和磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基1(PIK3R1)mRNA相对表达量。培养乳腺癌MDA-MB-231细胞,将脂质体转染试剂Lipo6000?分别与miRNA-4429模拟物(miRNA-4429 mimic)、miRNA-4429抑制物(miRNA-4429 inhibitor)、模拟物阴性对照(NC)混合均匀,分别作为miRNA-4429 mimic组、miRNA-4429 inhibitor组、NC组。采用克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qRTPCR检测PIK3R1 mRNA相对表达量,蛋白质印迹法检测PIK3R1蛋白表达情况。结果 乳腺癌组织中miRNA-4429、PIK3R1 mRNA相对表达量均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。miRNA-4429 mimic组克隆形成率、迁移细胞数目、侵袭细胞数目均低于NC组,miRNA-4429 inhibitor组克隆形成率、迁移细胞数目、侵袭细胞数目均高于NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。miRNA-4429 mimic组细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率均高于NC组,miRNA-4429 inhibitor组细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率均低于NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。miRNA-4429 mimic组细胞中PIK3R1 mRNA和蛋白相对表达量均低于NC组,miRNA-4429 inhibitor组细胞中PIK3R1 m RNA和蛋白相对表达量均高于NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论乳腺癌组织中miRNA-4429表达水平较低,miRNA-4429通过调控PIK3R1的表达抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进乳腺癌细胞凋亡,可能成为治疗乳腺癌的新靶点。

小剂量rhGM-CSF化疗前应用的临床研究

目的:探讨小剂量重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)化疗前应用在减轻骨髓抑制、缩短住院时间、减少医疗费用方面的作用。方法:实验组化疗前48小时GM-CSF300μg皮下注射1次,出现骨髓抑制后实验组与对照组均给予rhGM-CSF300μg皮下注,1次/日,直至WBC≥4.0×109/L。结果:实验组的白细胞减少、粒细胞减少及血小板下降均较对照组轻,(P<0.05),实验组白细胞恢复时间短于对照组,(P<0.05),住院天数及药费也存在显著性差异(P<0.05)。结论:化疗前给予rhGM-CSF,可以有效地降低骨髓抑制的发生率及发生程度,缩短骨髓恢复时间,在降低医疗费用、加快床位周转、提高病床使用率方面也显示出一定的优势。