miR-660-3p靶向NFAM1对RSV诱导支气管上皮细胞凋亡及炎症因子分泌的影响

目的探讨微小RNA-660-3p(miR-660-3p)靶向具有ITAM基序1的NFAT活化蛋白(NFAM1)对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导支气管上皮细胞凋亡和炎症因子分泌的影响。方法体外传代培养人支气管上皮细胞16HBE。取对数生长期16HBE细胞,随机分为对照组、RSV组、miR-660-3p+RSV组、miR-NC+RSV组、pcDNA-NC+RSV组、pcDNA-NFAM1+RSV组、miR-660-3p+pcDNA-NC+RSV组、miR-660-3p+pcDNA-NFAM1+RSV组,miR-NC+RSV组转染NC mimics,miR-660-3p+RSV组转染miR-660-3p mimics,pcDNA-NFAM1+RSV组转染pcDNA-NFAM1,pcDNA-NC+RSV组转染pcDNA-NC,miR-660-3p+pcDNA-NC+RSV组共转染pcDNA-NC和miR-660-3p mimics,miR-660-3p+pcDNA-NFAM1+RSV组共转染pcDNA-NFAM1和miR-660-3p mimics,对照组和RSV组不予转染;除对照组外,其余各组均予RSV感染,MOI设定为0.0001。收集各组细胞,采用RT-qPCR法检测miR-660-3p、NFAM1 mRNA表达,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western blotting法检测Cleaved-Caspase-3、NFAM1蛋白表达;收集各组培养上清液,采用ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-1β。通过starBase数据库预测NFAM1与miR-660-3p的靶向结合位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-660-3p与NFAM1的靶向调控关系。结果与对照组比较,RSV组miR-660-3p表达降低,NFAM1 mRNA与蛋白及Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高,细胞凋亡率及培养上清液TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P均<0.05)。与miR-NC+RSV组比较,miR-660-3p+RSV组miR-660-3p表达升高,Cleaved-Caspase-3蛋白表达以及细胞凋亡率和培养上清液TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低(P均<0.05)。与pcDNA-NC+RSV组比较,pcDNA-NFAM1+RSV组NFAM1 mRNA、Cleaved-Caspase-3蛋白表达以及细胞凋亡率和培养上清液TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P均<0.05)。经starBase数据库预测,NFAM1的3′非翻译区存在与miR-660-3p的结合位点。双荧光素酶报告基因实验结果显示,相较于共转染NC mimics与NFAM1-WT的16HBE细胞,共转染miR-660-3p mimics与NFAM1-WT的16HBE细胞荧光素酶活性下降(P<0.05);相较于共转染NC mimics与NFAM1-MUT的16HBE细胞,共转染miR-660-3p mimics与NFAM1-MUT的16HBE细胞荧光素酶活性变化不明显(P>0.05)。与miR-660-3p+pcDNA-NC+RSV组比较,miR-660-3p+pcDNA-NFAM1+RSV组Cleaved-Caspase-3蛋白表达以及细胞凋亡率和培养上清液TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P均<0.05)。结论miR-660-3p可通过靶向负调控NFAM1抑制RSV诱导支气管上皮细胞凋亡及炎症因子分泌。

酮替芬联合孟鲁司特治疗慢性喘息型支气管炎临床疗效观察

目的探讨酮替芬联合孟鲁司特治疗慢性喘息型支气管炎的临床疗效。方法将84例慢性喘息型支气管炎患者随机分为观察组与对照组,每组各42例,两组患者均给予常规内科治疗,对照组患者在此基础上加用孟鲁司特,观察组患者加用酮替芬联合孟鲁司特治疗,比较两组患者的临床疗效。结果观察组患者治疗总有效率92.9%,显著高于对照组患者的76.2%,差异有统计学意义(χ2=11.738,P<0.05)。结论采用酮替芬联合孟鲁司特治疗慢性喘息型支气管炎临床疗效确切,安全性高,值得临床进一步推广使用。

过敏性哮喘患者外周血单个核细胞miR-138表达及与Th1/Th2平衡的关系

目的探讨过敏性哮喘患者外周血单个核细胞微小RNA-138(miR-138)表达及其与T辅助细胞1(Th1)/T辅助细胞2(Th2)平衡的关系。方法106例过敏性哮喘患者作为过敏性哮喘组(AAS),另取本院同期健康体检者100名作为对照组,荧光定量PCR法检测2组受试者外周血单个核细胞miR-138、Th1相关转录因子T-bet、Th2相关转录因子GATA3表达水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测两组受试者Th1相关细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)以及Th2相关细胞因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)含量。结果AAS组患者外周血单个核细胞miR-138表达水平显著高于对照组(P<0.05)。AAS组患者血清IL-2、IFN-γ含量显著低于对照组(P<0.05),IL-4和IL-10显著高于对照组(P<0.05);AAS组患者Th1/Th2比值显著低于对照组(P<0.05)。AAS组患者外周血单个核细胞中转录因子T-bet mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05),AAS组患者转录因子GATA3 mRNA显著高于对照组(P<0.05)。miR-138表达水平与细胞因子IL-2、IFN-γ呈负相关(r=-0.566、-0.616,P<0.05),与细胞因子IL-4、IL-10分别呈正相关(r=0.518、0.506,P<0.05)。miR-138表达水平与Th1相关转录因子T-bet mRNA水平呈负相关(r=-0.497,P<0.05),与Th2相关转录因子GATA3 mRNA水平呈正相关(r=0.653,P<0.05)。miR-138表达水平与Th1/Th2比值呈负相关(r=-0.606,P<0.05)。结论过敏性哮喘患者外周血单个核细胞miR-138表达水平上调,可能通过调节Th1/Th2影响相关细胞因子表达,影响过敏性哮喘患者机体炎症状态。

通气模式对慢阻肺急性加重期呼吸衰竭机械通气效果及并发症的影响

目的探讨通气模式对慢阻肺急性加重期(AECOPD)呼吸衰竭机械通气效果及并发症的影响。方法选取2019年2月—2021年4月上海市嘉定区安亭医院收治的AECOPD伴呼吸衰竭患者88例,采用适应性支持通气(ASV)模式进行无创机械通气的患者纳入观察组,采用双水平气道正压通气(BiPAP)进行无创机械通气的患者纳入对照组,观察比较两组临床疗效、肺功能恢复情况、血气指标、呼吸力学指标、治疗时间及并发症发生情况等。结果观察组的临床疗效总有效率明显高于对照组(P<0.05),观察组并发症发生率明显低于对照组(P<0.05);治疗后观察组的呼气高峰流量(PEFR)、第一秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)明显高于对照组(P<0.05);治疗后观察组的动脉血氧分压(PaO;)、动脉血氧饱和度(SaO_(2))明显高于对照组(P<0.05),动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))明显低于对照组(P<0.05);治疗后观察组的气道峰压(Ppeak)、气道阻力(Raw)明显低于对照组(P<0.05),静态肺顺应性(Cstat)明显高于对照组(P<0.05);观察组的通气时间、氧疗时间、症状缓解时间、住院时间明显少于对照组(P<0.05)。结论ASV运用于无创机械通气更有利于提高AECOPD呼吸衰竭患者临床疗效,减少患者治疗时间,增强机械通气效果,加快肺功能恢复,降低并发症的发生。