血浆微RNA联合检测在前列腺癌中的诊断价值

目的分析前列腺癌患者血浆miRNA的差异表达,探索血浆miRNA联合检测在前列腺癌中的诊断潜能。方法应用基因表达汇编数据库获得前列腺癌患者血浆及血清差异表达的miRNA,通过最近邻中心分类器曲线下面积优化模型(NCC-AUC)筛选出3个权重最高的miRNA;收集上海市宝山区中西医结合医院诊治的45例前列腺癌患者(前列腺癌组)、40例慢性前列腺炎患者(前列腺炎组)和42例健康体检者(健康对照组)血浆样本,采用qPCR对候选血浆miRNA表达水平进行检测;应用ROC曲线分析候选miRNA单独及联合检测对前列腺癌的诊断价值。结果通过生物信息学分析,获得26个前列腺癌相关的差异表达miRNA,经NCC-AUC进一步筛选,miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p和miRNA-6780a-5p权重最高,进入临床样本验证阶段。临床验证结果显示,血浆miRNA-21-5p水平在健康对照组、前列腺炎组、前列腺癌组中依次升高,3组之间差异有统计学意义(P<0.01);前列腺炎组血浆miRNA-5189-5p水平低于前列腺癌组与健康对照组(P均<0.01);前列腺癌组血浆miRNA-6780a-5p水平高于前列腺炎组和健康对照组(P均<0.01)。ROC曲线分析显示,血浆miRNA-21-5p和miRNA-6780a-5p对前列腺癌均有较好的诊断潜能(P均<0.001),AUC分别为0.695和0.787,灵敏度分别为95.6%和64.4%,特异度分别为41.5%和81.7%。miRNA-21-5p与miRNA-6780a-5p联合应用可有效提高对前列腺癌的诊断效能,AUC为0.830,灵敏度和特异度分别为82.2%和74.4%。结论血浆miRNA-21-5p和miRNA-6780a-5p均有成为前列腺癌诊断标志物的潜能,两者联合检测可提高对前列腺癌的诊断效能。

脂肪酸转运蛋白4在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨脂肪酸转运蛋白4(FATP4)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及临床意义。方法:选取本院收治的80例ccRCC病人作为研究对象,并选取40例正常肾组织样本作为对照组,采用免疫组化方法检测正常肾组织和ccRCC肿瘤组织中的FATP4的表达,分析FATP4的阳性表达率在ccRCC病人不同临床病理特征中的差异。采用spearson秩相关分析FATP4的阳性表达率与临床病理特征的相关性。结果:ccRCC肿瘤组织的FATP4的阳性表达率(86.3%)显著高于正常肾组织(52.5%)。在TNM分期Ⅲ-Ⅳ的病人中,FATP4高表达的比率显著高于FATP4低表达的比率(P<0.05)。在合并肿瘤坏死和复发的病人中,FATP4高表达的比率显著高于FATP4低表达的比率(P<0.05)。相关性分析结果显示ccRCC肿瘤组织中FATP4的表达与TNM分期、肿瘤坏死呈显著正相关关系(P<0.01)。结论:cc RCC肿瘤组织中FATP4的表达与肾癌的临床病理特征关系密切,包括TNM分期和肿瘤坏死,有助于评估肾癌的病情和预后。

药物联合手术去势对前列腺癌患者临床症状及肿瘤干细胞指标的影响

目的探究手术去势治疗联合雄激素阻断治疗(androgen deprivation therapy,ADT)对前列腺癌患者症状及肿瘤干细胞的影响。方法选取我院2013年1月至2015年1月收治的前列腺癌患者82例,根据随机数表法分为观察组和对照组各41例,对照组实施手术去势治疗,观察组在其基础上联合ADT。9个月后所有患者接受根治性前列腺切除。比较两组患者相关临床症状和肿瘤干细胞的情况。结果治疗后观察组下尿路症状明显改善,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗前后干细胞抗原(stem cell antigen,SCA)mRNA阳性率及表达含量差异均无统计学意义(P>0.05),观察组治疗后SCAmRNA阳性率及表达含量均显著下降(31.71%vs78.05%,22.59±8.03μg/Lvs 74.05±9.35μg/L),差异均有统计学意义(P<0.05),且减少程度与治疗前肿瘤的Gleason评分有关,Gleason评分越高,阳性肿瘤细胞减少的百分比越高。对照组治疗前后CD44和整合素α2β1双标阳性干细胞比例无明显变化,而观察组治疗后显著下降[(9.33±1.63)%VS(3.48±1.16)%,t=18.723,P<0.05]。结论 ADT联合手术去势治疗可有效改善症状,降低SCAmRNA阳性表达率和肿瘤干细胞比例,值得临床进一步分析应用。

miR-138-5p靶向HIF-1α对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响

目的探讨miR-138-5p靶向HIF-1α对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响。方法将GRC-1细胞分为四组,分别为GRC-1组、miR-138 mimic组、pc-HIF-1α组及共转染组(mimic+pc-HIF-1α组),并将mimic-scramble组设置为miR-138 mimic转染的阴性对照组。采用荧光素酶报告实验验证miR-138-5p与HIF-1α的靶向关系,采用qRT-PCR检测miR-138 mimic对GRC-1细胞HIF-1αmRNA水平的影响,采用Western blot检测miR-138对GRC-1细胞HIF-1α蛋白水平的影响。分别采用CCK-8、流式细胞术和划痕实验检测miR-138-5p靶向HIF-1α对GRC-1细胞的增殖、凋亡和迁移的影响。结果荧光素酶报告实验结果显示miR-138-5p可靶向HIF-1α。与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的miR-138-5p mRNA表达水平较高,HIF-1αmRNA表达水平较低(均P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的HIF-1α蛋白表达水平较低,而pc-HIF-1α组的HIF-1α蛋白表达水平较高(均P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的HIF-1α蛋白表达水平低于pc-HIF-1α组(P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞增殖倍数较低,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞增殖倍数较高(均P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞增殖倍数低于pc-HIF-1α组,差异有统计学意义(P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞凋亡率较高,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞凋亡率较低(均P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞凋亡率高于pc-HIF-1α组(P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞划痕愈合率较低,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞划痕愈合率较高(均P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞划痕愈合率低于pc-HIF-1α组(P<0.01)。结论miR-138-5p可通过靶向HIF-1α,负向调控HIF-1αmRNA和蛋白的表达,进而减弱人肾癌细胞GRC-1的增殖和迁移,促进其凋亡。

骨碎补总黄酮对失血性休克复苏再灌注肾损伤大鼠的保护作用

目的 观察骨碎补总黄酮对失血性休克复苏再灌注肾损伤大鼠的保护作用,并探讨其作用机制.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、骨碎补组,每组10只.经股动脉放血至血压为40 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）,维持该血压90 min后将自体血回输至基础值的90%,制备失血性休克复苏再灌注肾损伤模型.骨碎补组大鼠腹腔注射骨碎补总黄酮300 mg/kg,模型组和假手术组腹腔注射等体积生理盐水.分别检测各组大鼠血清SCr水平,采用流式细胞检测法测定肾组织细胞凋亡率,采用PCR法检测肾组织Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）mRNA表达水平.结果 与模型组比较,骨碎补组血清SCr[（78.36±5.31）mmol/L比（151.43±11.8）mmol/L]降低（P〈0.01）,肾组织细胞凋亡率[（14.31±2.83）%比（19.56±4.37）%]降低（P〈0.01）,肾组织Bax mRNA[（0.91±0.07）比（1.24±0.05）]表达降低,Bcl-2 mRNA[（1.38±0.07）比（0.65±0.05）]表达及Bcl-2/Bax比值[（1.51±0.08）比（0.52±0.06）]升高（P〈0.01）.结论 骨碎补总黄酮对大鼠失血性休克复苏再灌注肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高肾组织Bcl-2 mRNA表达及Bcl-2/Bax比值,从而抑制或阻断肾组织细胞凋亡有关.