纳米碳在cN0期单侧甲状腺乳头状癌行双侧中央区淋巴结清扫中的临床应用

目的:探讨纳米碳在cN0期单侧甲状腺乳头状癌行双侧中央区淋巴结清扫中的临床应用价值。方法:选择我院2016年1月至2019年1月cN0期单侧甲状腺乳头状癌首次手术患者100例,分为对照组(n=50例)和实验组(n=50例),实验组辅以纳米碳显影,行患侧甲状腺腺叶+峡部+双侧中央区淋巴结清扫术,对照组行患侧甲状腺腺叶+峡部+同侧中央区淋巴结清扫。分析两组患者手术时间、术中出血量、术后引流量、住院时间、住院费用、术后1d血钙及术后6个月的血钙及甲状旁腺素、术后声嘶、甲状旁腺误切等情况。结果:两组患者术中出血量、术后引流量、住院时间、住院费用、术后6个月血钙及血甲状旁腺素比较,差异均无统计学意义(P>0.05);实验组术后第1天血钙、术后甲状旁腺误切数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),实验组手术时间、中央区淋巴结清扫数及患侧阳性数、暂时性术后声嘶率高于对照组,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:cN0期单侧甲状腺乳头状癌应积极行双侧中央区淋巴结清扫,辅以纳米碳显影能提高淋巴结的检出率及阳性率,防止甲状旁腺与喉返神经损伤,手术安全可靠。

苦参素型锌指蛋白4在甲状腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨甲状腺癌组织中苦参素型锌指蛋白4(ZMAT4)基因的表达及临床意义。方法利用癌症基因图谱数据库(TCGA)检索包含ZMAT4mRNA表达值与对应生存预后资料的497例甲状腺癌患者的信息,在线利用UALCAN数据库检索ZMAT4在甲状腺癌中的表达数据,分析ZMAT4mRNA水平在甲状腺癌组织与对应的正常甲状腺组织中的表达差异,并分析甲状腺癌组织中ZMAT4mRNA表达与相应临床病理参数的关系。采用Kaplan-Meier生存分析比较甲状腺癌患者不同临床病理参数下ZMAT4mRNA表达与总生存期(OS)的关系;并根据临床病理特征分析不同亚组中ZMAT4mRNA表达与OS的关系。结果TCGA数据库分析结果显示,甲状腺癌组织中ZMAT4mRNA的相对表达量显著低于正常甲状腺组织(P<0.01)。甲状腺癌组织中ZMAT4mRNA的表达与组织学类型、TNM分期、T分期、N分期有关(χ^2=59.604、10.705、8.535、31.234,P<0.01),与患者的性别、年龄、M分期、肿瘤多灶性、肿瘤大小、根治程度无关(χ^2=0.000、2.851、0.016、0.374、0.221、4.330,P>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,ZMAT4mRNA高表达组患者的OS低于低表达组(LogRank=8.767,P<0.05);TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ+Ⅳ期患者中,ZMAT4mRNA高表达组患者的OS低于低表达组(LogRank=10.291、6.148,P<0.05);在乳头状癌、N0分期患者中,ZMAT4mRNA高表达组患者的OS低于低表达组(LogRank=11.586、11.807,P<0.05)。结论ZMAT4低表达与甲状腺癌的发生、发展相关,是候选的抑癌基因。ZMAT4基因的表达与甲状腺癌的OS关系密切。

KLF4通过Wnt信号通路抑制甲状腺癌细胞EMT及侵袭迁移的实验研究

目的探讨Kruppel样因子4(KLF4)对甲状腺癌细胞上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移的影响及机制。方法免疫组织化学(IHC)检测45份甲状腺癌标本中KLF4的表达情况。常规体外人甲状腺乳头状癌细胞株KTC1培养,将其分为空白对照组(不作任何处理)、阴性对照组(转染LipofectamineTM 2000)、KLF4过表达组(转染LipofectamineTM 2000+KLF4)、siRNA-NC组(转染LipofectamineTM 2000+NC-siRNA)和KLF4-siRNA组(转染LipofectamineTM 2000+KLF4-siRNA)。免疫荧光检测细胞中KLF4与β-catenin的分布和共表达;Transwell检测癌细胞侵袭和迁移的能力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测EMT和Wnt信号通路相关的基因和蛋白质表达水平。蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)检测KLF4和β-catenin间的互作情况。结果免疫荧光标记显示,KLF4和β-catenin在KTC1细胞质中共定位。qRT-PCR结果显示,KLF4过表达组上皮型钙黏蛋白(E-cad)mRNA表达明显高于其他组(P<0.05),神经型钙黏蛋白(N-cad)和基质金属蛋白酶7(MMP7)mRNA表达水平明显低于其他组(P<0.05);沉默干扰KLF4后,与其他组相比,KLF4-siRNA组中的E-cad mRNA明显降低(P<0.05),N-cad和MMP7 mRNA明显升高(P<0.05)。Western blot结果显示,KLF4过表达组中E-cad表达较其他组明显升高(P<0.05),而N-cad、MMP7表达则明显低于其他组(P<0.05);当沉默干扰KLF4时,上皮标志物减少(P<0.05),间质标志物增加(P<0.05)。Transwell结果显示,过表达KLF4可以抑制KTC1细胞的迁移和侵袭,干扰沉默KLF4可增强KTC1细胞的迁移和侵袭。Co-IP结果显示,KLF4与β-catenin之间存在相互作用。KLF4在甲状腺癌及癌旁组织中的阳性表达率分别为24.44%(11/45)和71.11%(32/45),二者比较差异有统计学意义(χ2=19.639,P<0.001)。45份甲状腺癌标本中,伴淋巴结转移18份标本中KLF4表达4份阳性,而不伴淋巴结转移27份标本中,KLF4表达15份阳性,二者比较差异有统计学意义(22.22%vs.55.56%,χ2=4.919,P=0.027)。结论KLF4通过Wnt信号通路调节相关下游靶基因的表达,从而影响了甲状腺癌的侵袭和迁移能力。