CircPVT1在子痫前期中的表达意义及其对胎盘绒毛外滋养层细胞的功能影响和作用机制

目的探究环状RNA PVT1(circPVT1)在子痫前期(preeclampsia,PE)患者胎盘组织中的表达及临床意义,并探究circPVT1对胎盘绒毛外滋养层(extravillous trophoblasts,EVTs)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响以及其可能的分子机制。方法选取子痫前期(PE组)和健康孕妇(Con组)各30例作为研究对象,qRT-PCR检测2组胎盘组织中circPVT1的表达;CCK-8增殖实验、细胞划痕实验和transwell实验检测circPVT1对EVTs细胞功能的影响;利用生物信息学分析、双荧光素酶报告实验和挽救实验等确定circPVT1在EVTs细胞中潜在的作用机制。结果胎盘组织中circPVT1表达与孕妇收缩压、舒张压和尿蛋白呈负相关(r=-0.630、r=-0.608、r=-0.679,均P<0.01),与孕妇分娩孕周和新生儿出生体重呈正相关(r=0.449、r=0.435,均P<0.01);与Con组胎盘组织相比,circPVT1在PE组胎盘组织中表达量显著下降(P<0.05);过表达circPVT1可促进EVTs的增殖、侵袭和迁移,反之,干扰circPVT1表达后EVTs的增殖、侵袭和迁移能力均降低(均P<0.05);circPVT1可直接与miR-145-5p结合,通过Wnt/β-catenin通路促进EVTs细胞增殖和侵袭。结论circPVT1与子痫前期发生及妊娠结局相关,可能通过调控miR-145-5p/Wnt/β-catenin信号通路促进EVTs细胞增殖、迁移和侵袭,参与子痫前期发生。

微核糖核酸101和可溶性fms样酪氨酸激酶1在子痫前期患者中的表达及其临床意义

目的 探讨微核糖核酸(microRNA)101(简称miR-101)与可溶性fms样酪氨酸激酶1(soluble fms-like tyrosine kinase receptor 1,sFlt-1)在子痫前期(preeclampsia,PE)患者中的表达及其临床意义。方法 选取2018年1月—2020年12月在上海市宝山区吴淞医院妇产科收治的因无宫缩行剖宫产分娩的60例孕产妇,其中PE组20例,重度子痫前期(sPE)组20例,健康孕产妇(对照)组20例。收集3组孕产妇外周血和胎盘组织样本,采用ELISA法检测3组孕产妇外周血中sFlt-1的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测3组孕产妇胎盘组织中miR-101的表达变化,结合双荧光素酶报告实验分析miR-101与sFlt-1表达的相关性,通过细胞学功能实验验证miR-101对胎盘滋养层细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 sPE、PE组孕产妇收缩压、舒张压值和尿蛋白量均显著高于对照组,分娩孕周均显著早于对照组(P值均<0.017)。sPE组孕产妇收缩压、舒张压值和尿蛋白量均显著高于PE组(P值均<0.017),两组分娩孕周的差异无统计学意义(P>0.05)。sPE组孕产妇血小板计数减少、肝功能损伤、肾功能损伤、产后出血和新生儿窒息比例均显著高于对照组和PE组(P值均<0.05)。ELISA检测结果显示,PE和sPE组外周血中sFlt-1表达水平分别为(3 131.80±448.25)和(3 555.00±428.89) ng/L,均显著高于对照组的(500.70±72.71) ng/L(P值均<0.001)。RT-qPCR检测结果显示,PE和sPE组胎盘组织中sFlt-1 mRNA相对表达量分别为5.33±0.58、6.50±0.50,均显著高于对照组的1.00±0.11(P值均<0.001)。PE和sPE组胎盘组织中miR-101相对表达量分别为0.50±0.14、0.40±0.12,均显著低于对照组的1.00±0.26(P=0.038、0.021)。荧光素酶报告实验结果显示,sFlt-1-Luc+miR-101-5p组293T细胞的相对荧光强度为2 366.67±321.46,显著低于sFlt-1-Luc组的4 533.33±665.83(P=0.016)。对3组孕产妇胎盘组织中miR-101与sFlt-1 mRNA表达进行Spearman秩相关检验,r_(s)=-0.871,P=0.001。提示3组孕产妇胎盘组织中miR-101与sFlt-1 mRNA表达呈负相关。3组孕妇一般临床资料与sFlt-1 mRNA、miR-101表达的相关性分析结果显示,sFlt-1 mRNA表达上调与孕妇收缩压、舒张压值和尿蛋白量呈正相关,与孕妇分娩孕周呈负相关(P值均<0.001),与孕妇年龄和孕前BMI无相关性(P值均>0.05);miR-101 mRNA表达下调与孕妇收缩压、舒张压值和尿蛋白量呈负相关,与孕妇分娩孕周呈正相关(P值均<0.001),与孕妇年龄和孕前BMI无相关性(P值均>0.05)。结论 miR-101在PE患者胎盘组织中低表达,可能导致sFlt-1的表达增加,进而抑制滋养层细胞的增殖、侵袭和迁移,参与PE的发生、发展。

妊娠期,钙营养不可少

俗话说“十月怀胎”,孕育新生命是一个较为漫长的过程,作为女性特殊生理过程,妊娠期女性应将补钙作为重要的“家庭作业”来做,一方面胎儿需要从母体摄取大量钙质以保障生长发育;另一方面孕妇自身对钙也有较高的需求,导致机体对钙的需求量增加。若孕期钙营养不足,将会增加孕妇骨质疏松、妊娠高血压等风险,而充足的钙营养对妊娠期高血压和轻重度子痫前期有一定的缓解作用。那么,准妈妈们到底该如何科学、安全地补钙呢?

妊娠期肝内胆汁淤积症与血清甘胆酸的关系

检测了７４例正常足月妊娠妇女和５６例妊娠期肝内胆汁淤积症（ＩＣＰ）患者血清甘胆酸（ＣＧ）的浓度。结果ＩＣＰ患者血ＣＧ浓度显著升高（１３．５２±９．５４ｍｇ／Ｌ），为正常孕妇（２．６７±１．９２ｍｇ／Ｌ）的５～１０倍。根据血ＣＧ浓度将ＩＣＰ患者分为＜１０、１０～２０、＞２０ｍｇ／Ｌ３组，将３组胎儿出生情况与正常组相对照，结果显示血ＣＧ浓度＜１０ｍｇ／Ｌ组羊水胎粪污染率及新生儿窒息率与正常组无差异，而血ＣＧ浓度中、重度升高组羊水胎粪污染率及新生儿窒息发生率显著高于正常孕妇组（Ｐ＜０．０１）。提示：测定血ＣＧ浓度对诊断ＩＣＰ、判断病情及胎儿结局具有重要意义。

鸦胆子苦醇增强子宫内膜癌类器官对孕激素敏感性的研究

目的:探索建立子宫内膜癌类器官的培养体系,利用类器官模型进行子宫内膜癌药物敏感性的初步检测。方法:宫腔镜或腹腔镜手术获取子宫内膜癌患者新鲜肿瘤组织,经剪切、消化,用Matrigel基质胶重悬并铺板,添加含多种细胞因子的类器官专用培养基3D培养。加醋酸甲羟孕酮(MPA)、鸦胆子苦醇(Brusatol)单独或联合处理后,镜下观察统计类器官数目及大小。收集正常子宫内膜和子宫内膜癌类器官制成石蜡切片,HE染色后进行形态学对比和病理学分析,子宫内膜癌类器官经免疫组化染色,研究AKR1C1的表达。结果:患者来源肿瘤组织经基质胶3D培养可见子宫内膜癌类器官生长,其形态学与正常子宫内膜类器官呈现明显差异,形态不规则呈团块状,细胞排列紊乱,腺腔组织结构基本消失,细胞核有异型性。对MPA耐药的内膜癌类器官,经Brusatol或Brusatol+MPA联合处理后,增殖受到抑制,且联合用药组抑制作用更显著。经HE染色和免疫组化分析,联合用药组部分内膜癌类器官组织形态上有向正常内膜转化的趋势,孕激素耐药相关分子AKR1C1的表达水平显著降低。结论:成功建立了子宫内膜癌类器官培养体系,并利用类器官模型初步验证了Brusatol增强子宫内膜癌对孕激素的敏感性。

腹腔镜子宫肌瘤剔除术的疗效及对肌红蛋白、缺血修饰白蛋白、总抗氧化能力水平的影响

目的观察腹腔镜手术治疗子宫肌瘤的效果及对病人肌红蛋白(MYO)、缺血修饰白蛋白(IMA)、总抗氧化能力(TAC)水平的影响。方法选取上海市宝山区吴淞中心医院2017年3月至2018年5月接收的子宫肌瘤病人80例的临床资料进行分析。根据其手术方式分为腹腔镜组(40例)和开腹组(40例)。观察两组病人手术一般情况,比较两组病人IMA等应激指标的差异。结果腹腔镜组术中出血量(109.24±10.15)mL明显低于开腹组(132.15±8.62)mL、住院时间(4.35±1.11)d显著少于开腹组(6.98±1.03)d(均P<0.001)。术后,腹腔镜组病人的IMA(66.12±6.01)U/L、MYO(22.02±2.78)ng/mL低于开腹组的(74.89±5.49)U/L和(26.98±3.47)ng/mL,TAC(11.88±2.24)kU/L水平高于开腹组的(9.15±1.49)kU/L(均P<0.001)。结论腹腔镜手术对子宫肌瘤有较好的治疗效果,术后氧化应激反应较轻,利于病人术后恢复。

NO、NOS、BNP水平变化与剖宫产后出血的关系研究

目的探讨血清一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、脑钠肽(BNP)水平变化与剖宫产后出血的关系。方法选取2017年3月至2020年1月在上海市宝山区吴淞中心医院治疗的剖宫产后出血患者130例(产后出血组)。根据出血量多少,分为小出血量组(出血量500~1000 ml)100例,中出血量组(出血量>1000~1500 ml)21例,大出血量组(出血量>1500 ml)9例。同时选取女性健康志愿者153例作为对照组。采用硝酸还原酶法检测NO和NOS,ELISA法检测BNP。比较产后出血组和对照组治疗前、不同出血量组治疗前及产后出血组治疗前后血清NO、NOS、BNP水平变化。采用ROC曲线评估NO、NOS、BNP单独诊断及3项指标联合诊断剖宫产后出血的效能。结果治疗前产后出血组患者血清NO、NOS、BNP水平均明显高于对照组(均P<0.05);治疗前小出血量组患者血清NO、NOS、BNP水平均低于大出血量组患者与中出血量组患者(均P<0.05),中出血量组患者NOS水平低于大出血量组(P<0.05);产后出血组患者治疗后患者血清NO、NOS、BNP水平明显低于治疗前(均P<0.05)。NO+NOS+BNP联合诊断剖宫产后出血的特异度、灵敏度均高于单项指标检测(均P<0.05)。结论血清NO、NOS、BNP表达水平与剖宫产后出血的发生、发展密切相关,剖宫产时应密切关注患者血清NO、NOS、BNP表达情况,以便出血时及时止血。

白细胞介素-6、微小RNA-210与子痫前期的相关性及其临床价值

目的探讨子痫前期患者各孕期血清白细胞介素-6(IL-6)和微小RNA-210(miR-210)的变化规律及意义。方法收集82例子痫前期患者和82例正常妊娠女性孕早、中、晚期血清,采用酶联免疫吸附试验检测IL-6水平,采用SYBR Green实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测血清miR-210的表达水平,比较两组间不同孕期miR-210、IL-6水平的差异,并对miR-210和IL-6进行相关性分析。结果随着妊娠进程,正常妊娠早、中、晚期外周血miR-210、IL-6表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。子痫前期孕晚期miR-210表达水平明显高于孕早期和孕中期,差异均有统计学意义(P<0.05)。子痫前期孕中期和孕晚期miR-210表达水平明显高于正常妊娠孕中期和孕晚期,差异均有统计学意义(P<0.05)。子痫前期孕晚期IL-6表达水平明显高于孕早期和孕中期,差异均有统计学意义(P<0.05)。子痫前期孕晚期IL-6表达水平明显高于对照组孕晚期,差异有统计学意义(P<0.05)。子痫前期孕早期血清miR-210、IL-6表达水平与正常妊娠差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关分析显示,妊娠期血清IL-6和miR-210的表达呈正相关(r=0.57,P<0.01)。结论妊娠期血清miR-210与IL-6的表达呈正相关,孕中、晚期血清IL-6和miR-210可能是子痫前期预测、诊断的良好标志物。

血清外泌体、胎盘来源外泌体和外泌体miR-210与子痫前期的相关性

目的 探讨血清外泌体、胎盘来源外泌体[胎盘碱性磷酸酶(PLAP)]和外泌体微小RNA-210(miR-210)在子痫前期(PE)患者中的变化及临床意义。方法 选取PE患者30例(PE组)和健康孕妇30例(正常妊娠组),收集所有对象孕早期、孕中期和孕晚期的血清样本,检测血清外泌体数量、PLAP水平和外泌体miR-210相对表达量。采用Pearson相关分析评估PLAP与miR-210的相关性。结果 正常妊娠组和PE组血清外泌体数量、PLAP水平和外泌体miR-210相对表达量均随孕期逐步升高。PE组不同孕期血清外泌体数量、PLAP水平和外泌体miR-210相对表达量均高于正常妊娠组(P<0.05)。PLAP水平与外泌体miR-210相对表达量呈正相关(r=0.668,P<0.01)。结论 PE患者血清外泌体数量、PLAP水平和外泌体miR-210相对表达量在孕早期已发生变化,这3项指标或可作为预测和早期诊断PE的生物标志物。

多囊卵巢综合征患者血清DHEAS、TEST、sOB-R水平及临床意义

目的分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)、总睾酮(TEST)及可溶性瘦素受体(sOB-R)水平及临床意义。方法选取2017年1月至2020年4月复旦大学附属中山医院吴淞医院收治的PCOS患者180例(PCOS组),其中稀发或无排卵(OA)+高雄激素血症(HA)+卵巢多囊样改变(PCO)患者89例,OA+HA患者61例,OA+PCO患者30例;另择体检健康女性180例作为对照组。检测研究对象血清DHEAS、TEST、sOB-R水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果PCOS组患者血清DHEAS、TEST水平及HOMA-IR分别为(7.55±1.21)μmol/L、(1.60±0.43)nmol/L和2.03±0.82,均高于对照组(均P<0.05),而sOB-R为(22.32±3.11)ng/ml,低于对照组(P<0.05)。PCOS组OA+HA+PCO患者血清DHEAS水平为(8.54±1.02)μmol/L,明显高于OA+HA患者和OA+PCO患者(均P<0.05);OA+HA患者血清DHEAS水平为(7.32±1.07)μmol/L,高于OA+PCO患者(P<0.05);OA+PCO患者血清TEST水平和HOMA-IR分别为(1.10±0.33)nmol/L和1.75±0.66,明显低于OA+HA+PCO患者和OA+HA患者(均P<0.05),而sOB-R为(24.43±2.77)ng/ml,明显高于OA+HA+PCO患者和OA+HA患者(均P<0.05)。PCOS组患者治疗后血清DHEAS、TEST水平及HOMA-IR分别为(6.10±1.19)μmol/L、(1.42±0.29)nmol/L和1.34±0.27,均低于治疗前(均P<0.05),而sOB-R为(25.51±2.88)ng/ml,高于治疗前(P<0.05)。PCOS组患者血清DHEAS、TEST水平与HOMA-IR均呈正相关(r=0.455、0.412,均P<0.05),而sOB-R与HOMA-IR呈负相关(r=-0.389,P<0.05)。结论PCOS患者血清DHEAS、TEST水平升高,而sOB-R水平降低,3者与PCOS表型、胰岛素抵抗有一定关系。

二甲双胍联合来曲唑改善子宫内膜癌孕激素敏感性的机制研究

目的探讨二甲双胍联合来曲唑改善人子宫内膜癌裸鼠皮下移植肿瘤孕激素敏感性的机制。方法将40只雌性裸鼠随机分为对照组和雌激素组,每组20只。雌激素组和对照组又随机分为4个亚组,即生理盐水组(生理盐水灌胃)、甲羟孕酮(MPA)组(MPA 100 mg/kg腹腔注射,0.3 mL/只)、来曲唑联合MPA组(来曲唑7 mg/kg灌胃给药,0.1 mL/只;MPA用法用量同MPA组)、二甲双胍联合来曲唑及MPA组(二甲双胍200 mg/kg灌胃给药,0.1 mL/只;来曲唑、MPA用法用量同来曲唑联合MPA组),每组5只。治疗期间,定期测量裸鼠体质量及肿瘤大小。实验完成后,检测裸鼠血清性激素;取出移植癌细胞瘤,测定瘤体体积,并绘制瘤体增长速率图,从而分析药物对肿瘤细胞生长的抑制作用。采用免疫组化法检测肿瘤细胞中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、人源性长寿保障基因2(Lass2)的表达水平。结果在雌激素组与对照组的各亚组中,二甲双胍联合来曲唑及MPA组裸鼠血清雌激素水平均低于MPA组,差异有统计学意义(P<0.05)。雌激素组与对照组的各亚组裸鼠的体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在雌激素组中,MPA组、来曲唑联合MPA组、二甲双胍联合来曲唑及MPA组对Ishikawa细胞移植瘤生长抑制率分别为48.25%、67.97%、75.43%,均高于生理盐水组0%的肿瘤抑制率,差异均有统计学意义(P<0.05)。在对照组中,MPA组、来曲唑联合MPA组、二甲双胍联合来曲唑及MPA组对Ishikawa细胞移植瘤生长抑制率分别为49.46%、69.97%、75.96%,均高于生理盐水组0%的肿瘤抑制率,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示,在雌激素组中,来曲唑联合MPA组、二甲双胍联合来曲唑及MPA组中Nrf2、Lass2的表达低于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05);在雌激素组与对照组间,采取相同治疗方式的亚组裸鼠移植瘤中的ER表达差异无统计学意义(P>0.05);在雌激素组和对照组中,来曲唑联合MPA组、二甲双胍联合来曲唑及MPA组的PR表达均高于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍联合来曲唑可有效缓解人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的孕激素耐药性,其机制可能与下调Nrf2/Lass2表达有关。

妊娠囊内注射甲氨蝶呤联合水囊压迫对Ⅱ型剖宫产疤痕妊娠卵巢功能的影响

目的探讨孕囊内注射甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)联合水囊压迫对II型剖宫产痕痕妊娠患者卵巢功能的影响。方法回顾性分析2018年1月至2020年12月上海市宝山区吴淞中心医院吴淞中心医院确诊的48例II型剖宫产疤痕妊娠患者的临床资料,将22例行子宫动脉栓塞术+清宫术者纳入对照组,26例行妊娠囊内注射MTX+水囊压迫+清宫术者纳入试验组。比较两组患者术后HCG恢复情况、术后月经恢复情况、术后1个月、3个月、6个月、12个月抗苗勒管激素(AMH)、窦卵泡计数(AFC)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的变化。结果试验组患者术后HCG恢复情况、术后的月经恢复时间明显短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);术后1个月、3个月、6个月,试验组患者的AFC、AMH明显高于对照组,FSH值、FSH/LH比值明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);术后12个月,试验组与对照组患者的AFC、AMH、FSH、FSH/LH比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论孕囊内注射MTX联合水囊压迫治疗Ⅱ型剖宫产痕痕妊娠患者对卵巢功能影响小,值得临床推广应用。

来曲唑联合二甲双胍对子宫内膜癌细胞孕激素敏感性的影响

目的 探讨来曲唑联合二甲双胍对子宫内膜癌细胞孕激素敏感性的影响。方法 培养子宫内膜癌细胞系Ishikawa,分为四组。雌激素组加入雌激素0.001μmol/L、0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L,处理24、48、72 h;来曲唑组先加入雌激素1μmol/L,随后加入来曲唑0 mmol/L、0.001 mmol/L、0.01 mmol/L、0.1 mmol/L、1 mmol/L、10 mmol/L,处理24、48、72 h;二甲双胍组先加入雌激素1μmol/L,随后加入二甲双胍0 mmol/L、0.01 mmol/L、0.1 mmol/L、1 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L,处理24、48、72 h;来曲唑联合二甲双胍组依次加入雌激素1μmol/L、来曲唑0.01 mmol/L、二甲双胍0.01 mmol/L,处理72 h。Western blot法检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和人源性长寿保障基因2(LASS2)蛋白表达,MTT法检测细胞增殖。结果 随着雌激素浓度的升高,ER、PR、Nrf2和LASS2蛋白表达逐渐增加,细胞增殖率逐渐升高(P<0.05)。随着来曲唑浓度的升高,ER、PR、Nrf2和LASS2蛋白表达逐渐减少,细胞增殖率逐渐降低(P<0.05)。随着二甲双胍浓度的升高,ER、PR、Nrf2和LASS2蛋白表达逐渐减少,细胞增殖率逐渐降低(P<0.05)。来曲唑联合二甲双胍处理细胞后,ER、PR、Nrf2和LASS2蛋白表达减少,细胞增殖率降低(P<0.05)。结论 来曲唑联合二甲双胍可能通过下调Nrf2、LASS2蛋白表达降低细胞增殖,从而增加子宫内膜癌细胞对孕激素的敏感性。