MAP4K4对肝癌细胞生物学活性的影响及机制

目的检测MAP4K4对肝癌细胞生物学活性的影响并初步探讨其作用机制。方法选取四种肝癌细胞(Hep3B,HepG2,SMMC7721,Huh-7)采用实时定量PCR和Western blot方法分别检测MAP4K4 mRNA和蛋白水平的表达。设计靶向MAP4K4的特异性siRNA核苷酸序列质粒转染组及空载体质粒转染组,用Lipofectamine 2000法分别转染到MAP4K4蛋白表达活性最强的肝癌细胞,QRT-PCR和Western blot方法检测干扰效率,并对转染后肝癌细胞进行WST-8细胞增殖实验,平板克隆形成实验,PI染色法细胞周期检测,Annexin V法细胞凋亡检测;对干扰组及对照组细胞进行基因芯片检测,以进一步探究MAP4K4基因在肝癌细胞中可能的作用机制。结果 MAP4K4在各细胞株的表达依次为:HepG2>Hep3B>Huh-7>SMMC7721;MAP4K4的干扰效率达50%以上;MAP4K4基因敲减后细胞生长减慢;平板克隆形成能力减弱;细胞周期阻滞于S、G2期;细胞凋亡明显增加;MAP4K4基因敲减后,其上游的基因:TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、MyD88、IRAK、TRAF6、TIRAP的表达明显下调,下游基因TAK1(MAP3K7)和MKK3的表达也明显下调。结论 MAP4K4基因敲减可以阻滞细胞周期的进程,抑制肝癌细胞的恶性增殖,其机制可能是通过NF-κB信号转导途径、JNK信号转导途径发挥作用。

MAP4K4在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨MAP4K4蛋白在肝细胞癌中的表达及临床病理学意义。方法用400例肝细胞癌蜡块标本构建肝细胞癌组织芯片,采用免疫组织化学技术检测MAP4K4蛋白在含400例配对肝细胞癌及癌旁组织的表达,并分析不同临床病理参数中MAP4K4蛋白表达水平的差异。结果在正常肝、肝炎和肝硬化组织中MAP4K4呈一致阴性或弱阳性表达,周围结缔组织、血管和胆管无MAP4K4阳性着色,Kuffer细胞和淋巴细胞生发中心可见阳性染色;异型增生结节的肝细胞中MAP4K4的表达明显强于正常肝、肝炎和肝硬化组织,肝细胞癌组织中MAP4K4表达显著增强,其中过度表达194例(48.5%),灶性阳性或阴性206例(51.5%);HBsAg阳性患者MAP4K4阳性率51.5%(157/305)显著高于阴性患者的38.8%(37/95)(P=0.033),肿瘤直径≤2cm的MAP4K4阳性率为31.6%(18/57)显著低于肿瘤直径>2cm的51.3%(176/343)(P=0.006),MAP4K4在不同组织学分级中的阳性率差异有统计学意义(P<0.001),肝内转移病例的MAP4K4阳性率为55.5%(152/274)显著高于未转移者的33.3%(42/126)(P=0.002),MAP4K4表达在患者年龄、血清甲胎蛋白浓度、肝硬化、包膜浸润方面差异无统计学意义。结论 MAP4K4在肝细胞癌组织中高表达,并且其表达水平与HBV感染状态、肿瘤大小、组织学分级及转移情况可能有一定关系。

乳腺疾病中的一些梭形细胞病变

乳腺肿瘤中最常见的是发生于上皮组织的一类肿瘤,其中一部分肿瘤或瘤样病变可能会出现类似于间叶肿瘤的以梭形细胞为特征的形态学表现。然而此类形态学表现由于缺乏典型的组织病理学特征,在临床病理实践中易于混淆。本文拟对在临床病理实践中遇到的一些乳腺梭形细胞病变进行归纳综述,为乳腺肿瘤和瘤样病变的鉴别诊断提供理论基础。