液相色谱-串联质谱法测定尿酸及与常规检测方法的比较

目的：建立液相色谱－串联质谱（LC－MS／MS）检测血清尿酸的方法，并与临床常规生化方法进行比较，为临床实验室不同检测系统尿酸检测结果的一致性提供参考。方法血清添加同位素内标尿酸－15 N2，经乙腈处理吹干重组后采用 LC－MS／MS 测定。以 Capcell C18 MGⅢ为分析柱进行反相色谱分离，以5 mmol／L 乙酸铵＋0．1％乙酸水溶液和甲醇（90∶10，v／v）为流动相，等度洗脱，流速0．3 mL／min，电喷雾离子化串联四极杆质谱，负离子多反应监测，尿酸离子通道为167／124 amu（定量）、167／96 amu（定性）；尿酸－15 N2离子通道为169／125 amu。LC－MS／MS 进行方法学评价后与临床尿酸常规检测方法（酶紫外法和酶比色法）进行比较。结果 LC－MS／MS 检测尿酸的线性范围为30～952μmol／L，批内和批间精密度分别为2．01％～6．23％和4．55％～8．08％，准确度为96．5％～103．4％。尿酸的色谱保留时间为1．5 min，单份样品的分析时间为3 min。酶紫外法、酶比色法与LC－MS／MS 的平均偏差分别为－10．02％、－9．88％；线性相关方程分别为 Y酶紫外法＝0．898XLC－MS／MS ＋2．15，r ＝0．978；Y酶比色法＝0．845XLC－MS／MS ＋22．15，r ＝0．983。 LC－MS／MS 与美国标准技术研究所（NIST）定值参考物质的平均偏差为1．56％＆#177;0．65％，与卫生部临床检验中心2014年代谢物正确度验证样品的定值的偏差为－0．34％～3．05％。结论采用 LC－MS／MS 可简便、准确地定量检测尿酸。酶紫外法、酶比色法的血清尿酸测定结果与LC－MS／MS 具有较好的可比性。

液相色谱-串联质谱法测定地高辛及其室间质量评价

目的：建立液相色谱－串联质谱（LC－MS／MS）检测血清地高辛的方法，用于临床开展地高辛治疗药物监测（TDM）。方法采用同位素稀释 LC－MS／MS 测定血清地高辛浓度并进行方法学评价。样品采用特丁基甲醚提取，反相色谱分离，正离子电喷雾质谱仪检测。分析参加卫生部临检中心地高辛 TDM 室间质量评价（EQA）的结果，并与电化学发光法进行初步比较。结果 LC－MS／MS 的线性范围为0．05～5．00 ng／mL，精密度为1．0％～4．3％，准确度为101．3％～108．9％，回收率为95．8％～97．5％，基质效应为95．7％～97．6％。单份样品的分析检测时间为3 min。血清样品反复冻融3次、放置室温24 h、处理后放置自动进样器36 h 的稳定性良好。 EQA样品的 LC－MS／MS 测定结果与靶值的偏差为－4．09％，线性方程为 YLC－MS／MS ＝1．01XEQA靶值－0．09，r ＝0．99。电化学发光法测定结果比 LC－MS／MS 平均高36．9％。结论 LC－MS／MS 测定血清地高辛简便、特异。测定结果符合全国室间质量评价要求，但与电化学发光法存在较大的差异。