病毒性心脏病小鼠心肌细胞凋亡的动态变化

目的探讨急、慢性病毒性心肌炎和感染性扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的动态变化。方法以柯萨奇病毒B3感染Balb/c小鼠建立急、慢性心肌炎和扩张型心肌病的系列动物模型,同期设正常对照;经组织病理学方法和超声心动图验证模型后,以缺口末端标记法(TUNEL)检测各组小鼠心肌细胞凋亡。结果各期感染小鼠心肌细胞凋亡率较同期对照组明显增高,心肌细胞凋亡率依次分别为(8.2±1.4)%vs(1.3±0.5)%,(15.3±1.1)%vs(2.7±0.7)%,(13.9±2.1)%vs(3.1±0.6)%,(均P<0.01)。结论心肌细胞凋亡贯穿病毒性心脏病全程,可能对其病程和预后产生深远影响。

慢性心力衰竭患者血清中cTnI/T与不同心血管疾病的关系

目的探讨血清心肌肌钙蛋白(Tn)I/T(cTnI/cTnT)在慢性心力衰竭(心衰)中的意义以及其对心血管疾病发生发展的影响.方法110例临床诊断为慢性心衰患者,根据病因分为高血压、冠心病、扩张型心肌病3组,用化学发光法测定血清cTnI/T水平,用超声心动图测定左心室射血分数(LVEF)及左心室大小(LVDd、LVDs),同时进行肝、肾功能的常规检测.其中20例患者在临床治疗期间跟踪随访3～6个月,观察心功能的变化与cTnI/T的关系.结果血清cTnI在扩张型心肌病慢性心衰患者中显著高于其他组(P＜0.05),cTnI的阳性率在LVEF 31%～40%段明显增高,与LVEF≤30%、LVEF 41%～50%段比较,差异有显著性(P＜0.05);血清cTnT升高与血肌酐异常者呈显著相关,(r=0.345,P=0.005),而血清cTnI的升高与肌酐的高低无关.随访发现,经治疗后心功能改善的患者,血清cTnI/T显著下降;但是,若疗效不佳,心功能有恶化时,血清cTnI/T较治疗前有所升高,有显著统计学差异.结论扩张型心肌病患者可能存在慢性心肌损伤,其损伤程度在LVEF 30%～41%可能较重;慢性心衰患者肾功能损害对血清cTnT的影响较大,而cTnI不变,因此血清cTnI可作为评判慢性心肌损伤的特异指标.

Balb/c小鼠CVB_3病毒性扩张型心肌病并心力衰竭模型的建立

目的 建立慢性病毒性心肌炎、扩张型心肌病并心力衰竭的实验模型。方法 用CVB3 反复感染Balb/c小鼠 ,分别于感染后第 1、3、6、9个月不同时点 ,采用超声心动图观察小鼠左心室收缩期及舒张末期内径及射血分数。取心肌经HE染色观察其病理形态特征 ,VG染色观察心肌纤维化 ,及原位末端标记法观察细胞凋亡。结果 B超发现 ,感染病毒后小鼠左心室收缩末期及舒张末期内径增大 ,左心室射血分数 (EF)下降 ,与正常小鼠相比P <0 .0 5。反复感染病毒 3个月内组织病理学特征与慢性心肌炎类似 ,而 3个月后则呈现出典型的扩张型心肌病理特征。在慢性期主要是病变部位的炎症细胞及心肌细胞凋亡 ,而扩张型心肌病期出现心肌细胞散在性凋亡。结论 Balb/c小鼠反复感染病毒可能是慢性心肌炎演变为扩张型心肌病并心力衰竭的良好的实验模型 ;

穿孔素介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎小鼠发病中的作用

目的探讨穿孔素（ＰＦＰ）介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎（ＶＭＣ）发病中的作用。方法４０只小鼠等分为ＣＶＢ３感染组及非感染组；所有小鼠于感染后第１０天处死并取其心脏；采用免疫组化技术检测心肌浸润细胞中ＰＦＰ的表达，原位杂交方法检测心肌中ＣＶＢ３ＲＮＡ；半定量分析ＰＦＰ抗原及ＣＶＢ３ＲＮＡ水平，并分析ＰＦＰ抗原水平与ＣＶＢ３复制及心肌病变程度的关系。结果ＰＦＰ抗原阳性信号指数与ＣＶＢ３ＲＮＡ杂交阳性信号指数呈显著负相关（ｒ＝－０．８２，Ｐ＜０．０５），与心肌病变积分呈显著正相关（ｒ＝０．９１，Ｐ＜０．０５）。结论ＰＦＰ介导的细胞毒效应在ＶＭＣ发病中可能具有抗病毒及致心肌损害双重作用。

应用合成肽检测病毒性心肌炎患者血清中柯萨奇B组病毒抗体

目的研究应用合成肽代替完整病毒检测柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）抗体及其在病毒性心肌炎（ＶＭＣ）病因诊断中的作用。方法从ＣＶＢ衣壳蛋白ＶＰ１及ＶＰ３的保守区及ＣＶＢ３衣壳蛋白ＶＰ２的非保守区各选出一段多肽（分别称为ＶＰ１－１肽、ＶＰ３－１肽、ＶＰ２－１肽）进行化学合成，应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测这几条多肽与型特异性ＣＶＢ１～６抗体的结合反应。以ＶＰ１－１肽、ＶＰ３－１肽作包被抗原，用间接ＥＬＩＳＡ检测患者血清中ＣＶＢＩｇＧ及ＶＣＢＩｇＭ抗体。结果ＶＰ１－１肽和ＶＰ３－１肽与型特异性ＣＶＢ１～６抗体均有良好的结合反应。８５例健康人、６７例急性ＶＭＣ、３９例慢性ＶＭＣ患者血清ＣＶＢＩｇＧ阳性率分别为２３．５％、５３．７％、３８．５％，ＣＶＢＩｇＭ阳性率分别为７．１％、４９．３％、２８．２％。ＣＶＢＩｇＭ抗体与中和抗体检测结果之间有良好的相关性（Ｐ＜０．００１），阳性率无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论应用合成肽抗原检测ＣＶＢＩｇＭ抗体有较好的敏感性和特异性。

Cathepsin B与扩张型心肌病发病关系的初步探讨

目的 探讨溶酶体中CathepsinB与扩张型心肌病发病的关系。 方法 收集我院因终末期扩张型心肌病行心脏移植术的受体标本 2 0例为实验组及脑死亡 3h内排除心脏疾患的心脏标本 5例为正常对照组 ,通过免疫组织化学 ,RT -PCR和WesternBlotting等方法自不同水平对CathepsinB进行检测。 结果 发现两组心肌组织中的CathepsinB均有阳性信号 ;RT PCR半定量检测CathepsinBmRNA的表达示扩张型心肌病组CathepsinB与 β actin条带面积积分比值明显高于对照组 ,分别为 0 .92 6± 0 .30、0 .4 4 2± 0 .2 5 ,两组间有显著差异 (P <0 .0 1) ;同时从蛋白水平检测CathepsinB的表达 ,显示扩张型心肌病组CathepsinB与 β actin条带面积积分比值明显高于正常组 ,分别为 0 .4 5 4± 0 .0 8及 0 .131± 0 .0 3,两组间有显著差异 (P <0 .0 1)。结论 与对照组相比 ,扩张型心肌病心肌标本中CathepsinBmRNA与蛋白质的表达量均明显增高 ,提示CathepsinB可能参与了扩张型心肌病的发生、发展过程 。