黄精枸杞胶囊延缓秀丽隐杆线虫衰老作用研究

目的以秀丽隐杆线虫为模式生物,探讨黄精枸杞胶囊的抗衰老活性。方法将野生型N2秀丽隐杆线虫同步化处理后分为对照组和药物干预组,观察黄精枸杞胶囊对秀丽隐杆线虫寿命、应激抵御能力、生殖能力、咽部泵送能力和运动能力的影响,同时对抗氧化相关指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)进行检测,考察对突变体线虫TJ356 DAF-16基因核转位和对线虫AM141多聚谷氨酰胺(polyQ)聚集的影响。结果黄精枸杞胶囊能显著延长野生型秀丽隐杆线虫的寿命,增强其抗氧化应激和热应激、咽部泵送和运动能力,提高秀丽隐杆线虫体内SOD活性并降低其体内MDA水平,但对其生殖能力无明显影响;可促进TJ356线虫体内DAF-16的核转位,抑制polyQ在AM141线虫体壁细胞中聚集。结论黄精枸杞胶囊能延长线虫的健康寿命,其作用机制可能与通过调控DAF-16/FOXO通路,增强应激抵御能力有关。

小鼠异种皮肤移植模型的建立及对免疫抑制药物的药效评价

目的建立小鼠异种皮肤移植模型,以期为免疫抑制药物提供研究模型。方法将C57BL/6小鼠耳部皮肤移植到BALB/c小鼠背部,同时设立同种移植对照(BALB/c小鼠耳部皮肤移植到BALB/c小鼠背部)。选用环孢素A作为抑制异种移植引起的免疫排斥反应的免疫抑制剂,利用该模型评价环孢素A免疫抑制效果。在移植和给药后,对移植排斥评分和移植皮肤的存活率进行统计。移植手术4 d和9 d后,ELISA法对血清中IL-4、IL-12和IFN-γ的水平进行测定。12 d后,计算胸腺和脾脏系数,对脾脏T细胞中CD4^+和CD8^+的比例进行分析,同时将移植皮肤进行病理观察。结果皮肤移植后,排斥评分逐渐增加,移植皮肤的存活率逐渐下降,有明显的水肿、炎症细胞浸润等炎症反应。环孢素A可明显降低移植排斥评分,提高移植皮肤的存活率,使小鼠胸腺和脾脏系数明显降低,高剂量可明显降低脾脏T细胞中CD4^+和CD8^+细胞的比例。同时,环孢素A处理可明显降低移植皮肤的炎症反应。结论小鼠经异种皮肤移植后会出现急性移植排斥反应,环孢素A可有效抑制移植排斥反应,并呈现出明显的剂量依赖性。

杜蛭丸灌胃对缺血性脑卒中大鼠的保护作用及其机制探讨

目的评价杜蛭丸灌胃对缺血性脑卒中大鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法将142只健康雄性SD大鼠随机分为7组:A组(正常对照组,16只,给予等量氯化钠溶液灌胃)和B组[6只,给予中剂量杜蛭丸溶液,1.0g/(kg·d)灌胃];C组、D组、E组和F组各24只,依次分别予等量氯化钠溶液、低剂量杜蛭丸溶液[0.5g/(kg·d)]、中剂量杜蛭丸溶液[1.0g/(kg·d)]、高剂量杜蛭丸溶液[2.0g/(kg·d)]灌胃;G组(阳性对照组,24只)第1~7天不予任何处理,第8天时在大鼠尾静脉注射依诺肝素钠(500U/kg),除G组外余各组均1次/d,连续7d进行药物干预。第8天除A组和B组外,余各组均采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血再灌注24h后,评价各组大鼠神经行为学评分和脑梗死百分率,检测大鼠血小板聚集率、血细胞比容、凝血和血液黏度等。结果本研究共有102只大鼠造模成功。各组大鼠神经行为学评分和脑梗死百分率比较差异均有统计学意义(P<0.05),其中F组和G组大鼠神经行为学评分、脑梗死百分率低于C组(P<0.01)。体外实验时,血小板同腺苷二磷酸在不同浓度的杜蛭丸水溶液(0.1mg/mL,0.3mg/mL和1.0mg/mL)中充分反应时,随着杜蛭丸溶液浓度的逐渐升高,血小板聚集率逐渐下降(均P<0.01)。各组MCAO模型大鼠血细胞比容比较差异有统计学意义(P<0.01),其中C组大鼠血细胞比容明显高于A组(P<0.01),G组、F组大鼠血细胞比容明显低于C组(P<0.01)。各组大鼠低切和高切全血黏度比较差异有统计学意义(P<0.05),其中B组低于A组(P<0.05),C组高于A组(P<0.05);各组大鼠低切全血相对黏度比较差异有统计学意义(P<0.05),其中D组、E组和G组低于C组(P<0.05)。各组大鼠凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)水平比较差异有统计学意义(均P<0.01),其中B组和C组TT、FIB水平高于A组(P<0.05)。结论高剂量杜蛭丸溶液灌胃对MCAO模型大鼠缺血性脑卒中具有保护作用,可能与其降低血细胞比容及抑制血小板聚集有关。

秀丽隐杆线虫模型在肌肉萎缩症研究中的应用

肌肉萎缩症目前尚无有效的治疗方法,良好的实验动物模型是研发治疗肌肉萎缩药物的基础。在临床前研究中,可用的肌肉萎缩动物模型有小鼠、犬等,秀丽隐杆线虫以通体透明、生命周期短、基因与人类基因具有高度同源性等优势得到研发人员的关注。该文对现有肌肉萎缩线虫模型的特点及其在肌肉萎缩症研究中的应用进行综述。

三种饲料建立大鼠缺铁性贫血模型的比较

目的探讨三种不同饲料配方对建立Wistar大鼠缺铁性贫血模型的影响。方法将3—4周龄Wistar大鼠分为4组，即A、B、c和正常对照组，A、B、c组分别饲喂3种不同配方饲料，正常对照组饲喂正常饲料。实验持续35d，实验期间每周称量各组大鼠体质量及摄食量同时观察大鼠行为、外观体征等变化。35d后取血，检测相关血常规指标包括血红蛋白（Hb）含量、红细胞压积等。结果A组大鼠Hb含量降到90g／L以下，且行为和体态表现也符合缺铁贫血特征，达到造模要求；B纽大鼠Hb含量没有降低；C组大鼠Hb含量有所降低但未达到90g／L以下。结论A组饲料配方可以成功建立大鼠缺铁性贫血模型，B、c组配方均不适用于缺铁性模型的建立。

不同级别蛹虫草子实体菌粉对免疫低下小鼠非特异性免疫功能的调节作用比较

目的比较超Ⅴ星虫草和Ⅰ星虫草子实体菌粉对地塞米松诱导的免疫低下小鼠非特异性免疫功能的调节作用。方法 50只健康♂BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、超Ⅴ星虫草(1 g·kg^(-1))组、Ⅰ星虫草(1 g·kg^(-1))组和虫草胶囊(阳性药,1 g·kg^(-1))组。除对照组外,其余各组于实验d 22、23腹腔注射地塞米松20 mg·kg^(-1)。末次给药后24 h解剖,测血常规,计算脏器指数,分析NK细胞和腹腔巨噬细胞功能及细胞因子分泌水平。结果地塞米松会导致小鼠体质量明显下降,脏器指数降低以及免疫细胞功能降低等免疫低下状态。超Ⅴ星虫草和Ⅰ星虫草均可明显拮抗地塞米松导致的免疫功能低下,在提高脾脏指数,增强NK细胞杀伤能力,提高巨噬细胞分泌TNF-α水平方面,超Ⅴ星虫草作用明显优于Ⅰ星虫草。结论超Ⅴ星虫草对地塞米松诱导的免疫功能低下的各个环节的改善作用均明显优于Ⅰ星虫草。

新型AMPA受体正向变构调节剂抗疲劳活性筛选

目的寻找以AMPA(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid)受体为靶点的新型抗疲劳化合物。方法以胡椒酸、3,4,5-三甲氧基苯甲酸、3,4-二甲氧基苯甲酸,这3个化合物分别作为母体结构,对苯甲酰胺的酰胺氮原子引入基团进行结构修饰,设计合成43个化合物,结构经1H-NMR确认。采用MTT法评价新化合物的细胞毒性,通过戊巴比妥钠镇静催眠实验进行中枢兴奋性筛选,最后采用小鼠负重游泳实验评价目标新化合物抗疲劳活性。结果化合物2j细胞毒性低,具有一定的中枢兴奋性与抗疲劳活性。结论化合物2j具有较好的抗疲劳作用,具有进一步开发潜力。

感染加重慢性呼吸道疾病的小鼠模型研究进展

哮喘、慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)和肺部囊性纤维化(cystic fibrosis,CF)是3种常见的慢性呼吸道疾病,有证据表明,呼吸道疾病的恶化与呼吸道病毒和细菌的感染相关。综合目前的研究发现,生命早期的呼吸道感染会改变机体的免疫反应和肺部结构,从而加重哮喘,成年期感染甚至会使哮喘患者抵抗类固醇的治疗。COPD患者呼吸道感染会加重肺部炎症和气道重塑水平。呼吸道铜绿假单胞菌感染会诱导和加重肺部CF。然而,目前尚缺乏有效的治疗措施能够阻止或逆转感染诱导的呼吸道疾病恶化,所以,需要建立能够模拟人类疾病特征的小鼠模型,帮助研究感染在疾病恶化中的作用。该文对近年来关于感染加重呼吸道疾病的小鼠模型研究进展进行综述,重点概述通过小鼠模型发现的3种呼吸道疾病的病理改变,并探讨基于这些小鼠模型可以发展和验证的治疗方法,为后续的呼吸道疾病研究和临床治疗提供参考。

细胞因子与炎症免疫疾病的研究进展

细胞因子是由免疫细胞和相关细胞产生的具有调节细胞功能的高活性、多功能的小蛋白质。细胞因子通过结合相应的受体,调节各种细胞的生长、分化和功能,调控免疫应答,参与生物体的固有免疫和适应性免疫应答进程,在炎症免疫性疾病,如哮喘、类风湿性关节炎、鼻炎、肠炎等疾病发展中发挥重要作用。本文阐述细胞因子与疾病的相关研究进展,介绍了获批用于部分疾病治疗的细胞因子药物,并阐述了细胞因子研究的特点。

新型冠状病毒肺炎药物进展

本文简述新冠肺炎的临床概况,介绍临床所用药物及特点,结合SARS药物研发进展探讨新冠肺炎可能的新药研发靶点。

7种植物精油对糠秕马拉色菌抑制效果比较及樟树精油抑菌作用研究

通过比较7种精油的抗糠秕马拉色菌活性,筛选作用效果最佳的植物精油并进一步分析其对糠秕马拉色菌的抑制作用。采用K-B纸片扩散法和微量肉汤稀释法筛选抑菌作用效果最佳的植物精油,同时利用气相色谱-质谱联用仪(GCMS)对效果最佳的植物精油的挥发性成分进行鉴定,进一步对其主要化学成分与抗糠秕马拉色菌活性进行相关性分析,然后利用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察糠秕马拉色菌形态变化,最后采用流式细胞术检测其对糠秕马拉色菌细胞凋亡的影响。结果表明樟树精油抗糠秕马拉色菌的活性强于其他6种精油;GC-MS共鉴定出14个化学成分且抗糠秕马拉色菌活性来源于3-蒈烯、松油烯-4-醇、α-松油烯、异松油烯;SEM显示樟树精油使糠秕马拉色菌细胞轻度损伤,局部细胞膜凹陷;TEM显示樟树精油使糠秕马拉色菌质壁分离,胞内基质变淡;樟树精油会使糠秕马拉色菌凋亡明显增加。综上,樟树精油对糠秕马拉色菌作用效果显著,其可通过破坏菌体细胞壁与细胞膜,实现其抑菌效果。

基于Biacore T200分析系统研究阿达木单抗生物学活性

目的利用Biacore T200生物分子相互作用分析系统研究阿达木单抗的生物学活性。方法将人源阿达木单抗偶联于CM5传感芯片,利用Biacore T200系统观察重组人肿瘤坏死因子α(TNF-α)和食蟹猴TNF-α与阿达木单抗结合的动力学常数,并采用不同种属的重组TNF-α验证种属特异性,进一步研究阿达木单抗抑制重组TNF-α的细胞毒作用,以确认阿达木单抗的生物活性。结果阿达木单抗与重组人TNF-α的结合常数(K_a)为(2.114±0.007)×105,解离常数(K_d)为(5.315±0.220)×10^(-5),亲和力常数(K_D)为(2.515±0.107)×10^(-10);与重组食蟹猴TNF-α的K_a为(2.574±0.068)×105,K_d为(1.554±0.124)×10^(-5),K_D为(5.320±1.271)×10^(-10)。阿达木单抗与50 nmol/L重组人TNF-α、重组食蟹猴TNF-α、重组小鼠TNF-α和重组大鼠TNF-α结合的响应值分别为84.3、66.4、1.3和-0.8 RU,呈现明显的种属差异。阿达木单抗可抑制重组人TNF-α和重组食蟹猴TNF-α对L929细胞的毒性作用,其半数有效浓度分别为194.0和685.5 pmol/L,但对重组小鼠或重组大鼠TNF-α导致的细胞毒作用无影响,细胞水平检测结果与Biacore T200系统检测结果一致。结论用Biacore T200生物分子相互作用分析系统研究抗原抗体结合简便快速准确,该方法适合用于重组人TNF-α单抗生物学活性分析与药效学评价。

类风湿关节炎生物标记物的研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种以慢性滑膜炎、关节软骨及骨质破坏、关节畸形及功能丧失等为主要特征的自身免疫性疾病,其病因和发病机制尚不明确,尚无特效的治疗方法。生物标记物作为重要的辅助诊疗指标,已广泛应用于RA的诊断、分型以及预后评估等诊疗过程中。蛋白类生物标记物是最早应用于临床的RA诊断标记物,炎性细胞因子水平对RA影响的研究也不断取得进展,近年来肠道菌群与RA的相关性也引起研究者的广泛关注。本文简要综述RA的蛋白类生物标记物、炎性细胞因子与RA的关系以及其他标记物的研究进展,旨在为RA的多途径、多因素早期发现RA,精准治疗RA提供理论参考。

丙戊酸钠缓释颗粒剂在Beagle犬体内的药动学和相对生物利用度

考察丙戊酸钠缓释颗粒(受试与参比制剂)在Beagle犬体内的药动学及其相对生物利用度。6条Beagle犬进行双周期交叉试验,每条犬单次口服给予受试或参比制剂400 mg。建立了LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中的丙戊酸钠,用非房室模型分析得到受试和参比制剂的主要药动学参数,分别为c_(max)(5.01±1.39)和(5.10±1.42)mg/ml,t_(max)(3.00±0.63)和(3.00±0.63)h,AUC_(0→t)(28.83±7.62)和(30.31±6.79)mg·ml^(-1)·h,AUC_(0→∞)(31.65±10.78)和(33.28±7.78)mg·ml^(-1)·h,t1/2(2.87±1.39)和(3.27±0.98)h。受试制剂的相对生物利用度为(95.5±13.9)%。

鸡矢藤提取物对尿酸钠诱导的大鼠急性痛风性关节炎的影响

为探讨鸡矢藤提取物是否具有良好的治疗痛风性关节炎的效果,将SD大鼠分为模型(0.9%氯化钠溶液)组、鸡矢藤提取物低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组和秋水仙碱(0.2 mg/kg)组,给予微晶型尿酸钠混悬液造模,测定关节肿胀度、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的含量,观察关节组织的病理学变化。结果显示与模型组相比,不同剂量的鸡矢藤提取物均可降低大鼠尿酸钠晶体导致的关节肿胀,并呈现一定的时间和剂量依赖性,且高剂量组的抑制关节肿胀效果与阳性对照相似;鸡矢藤提取物能降低TNF-α和IL-1β的表达水平,对关节病理损伤也有一定的改善作用。以上结果提示鸡矢藤提取物对尿酸钠晶体诱导的大鼠急性痛风性关节炎具有一定的防治作用。

候选药物HY152-J大鼠在体肠吸收动力学研究

目的:研究候选药物HY152-J在大鼠不同肠段的吸收动力学特性。方法:采用大鼠在体单向肠灌流模型考察HY152-J在大鼠不同肠段的吸收动力学特性;利用HPLC法测定肠灌流液中HY152-J含量;考察不同肠段、不同质量浓度、不同p H介质以及P-糖蛋白(P-gp)抑制剂4个因素对HY152-J肠吸收的影响。结果:HY152-J在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收速率常数(Ka)和表观渗透系数(Papp)无显著性差异(P>0.05);与低浓度(25μg·m L^(-1))组相比,高浓度(100μg·m L^(-1))组中HY152-J的Ka和Papp均存在非常显著性差异(P<0.01),中浓度(50μg·m L^(-1))组中HY152-J的Papp有显著性差异(P<0.05);不同p H的介质对Ka和Papp均无显著性影响(P>0.05);P-gp抑制剂对HY152-J的肠吸收没有显著性影响(P>0.05)。结论:HY152-J在不同肠段均有吸收,且无明显的特定吸收部位;在25~100μg·m L^(-1)范围内,随浓度增大,其吸收有逐渐饱和趋势,初步推断HY152-J的吸收机制为主动转运;HY152-J可能不是P-gp的底物。

虫草素制剂对百草枯致大鼠肺纤维化的作用研究

目的研究虫草素制剂对百草枯致大鼠肺纤维化的治疗作用。方法 90只健康雄性SD大鼠随机分为:对照组、模型组,地塞米松(阳性药,1 mg/kg)组,虫草素制剂低、中、高剂量(125、250、500 mg/kg)组,虫草活力素A(500 mg/kg)组,虫草活力素B(500 mg/kg)组。除对照组外,其余各组于实验第1天ip百草枯溶液17 mg/kg,1次染毒,并开始给药30 d,期间称量动物体质量,记录动物大体状况及死亡情况。给药结束,取肺观察动物肺脏大体情况,检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)水平,并进行Masson染色观察肺纤维化病理变化。结果虫草素制剂可改善肺纤维化大鼠状态,促进大鼠体质量恢复;虫草素制剂各个剂量组均能降低肺组织中HYP水平,其中高剂量组、虫草活力素A和B组与模型组比较差异显著(P<0.01);地塞米松组和虫草素制剂高剂量组以及虫草活力素A、B组均不同程度的减少了纤维化组织,与模型组比较,纤维化程度较轻。结论虫草素制剂能有效降低肺纤维化大鼠肺组织中HYP水平,改善肺的组织结构和纤维化病理变化。

SD大鼠烫伤铜绿假单胞菌感染模型的建立

目的以新型台式超级控温烫伤仪建立SD大鼠烫伤铜绿假单胞菌感染模型,并采用磺胺嘧啶银乳膏验证其用于外用烫伤感染制剂的评价效果。方法采用台式超级控温烫伤仪建立SD大鼠接触性烫伤模型(单纯烫伤组),烫伤20 min后,以1×109 CFU/ml铜绿假单胞菌涂抹于大鼠创面(0.1 ml/只),建立烫伤感染模型(烫伤感染组)。在烫伤感染组基础上,给予磺胺嘧啶银乳膏,一日1次,涂抹于创面,厚度约为1.5 mm(磺胺嘧啶银组)。记录或检测大鼠创面起痂时间、愈合面积、痂下铜绿假单胞菌数量及病理组织学等指标评价模型。结果与单纯烫伤组相比,烫伤感染组大鼠创面起痂时间显著延长,创面愈合缓慢,创面收痂面积明显减小,创面组织上铜绿假单胞菌数显著增多,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与烫伤感染组相比,磺胺嘧啶银组上述各项指标均明显改善,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。HE染色结果表明,烫伤感染组血管扩张,皮肤表皮坏死,炎症细胞浸润明显,而磺胺嘧啶银组上述症状均有明显改善。结论本研究建立的烫伤铜绿假单胞菌感染模型具有一定的敏感性和有效性,可用于外用烫伤感染制剂的评价。

抗结核候选化合物HY152-J与转运蛋白P-gp相互作用的LC-MS/MS法考察

HY152-J（1）是一个体外具有抗耐药结核活性的候选化合物。本试验建立了Caco-2细胞单层模型,采用LCMS/MS法考察了1与转运蛋白P-gp的相互作用。结果表明,用于转运试验的Caco-2细胞能够形成致密、完整以及功能良好的均匀单层细胞;不同浓度1从基底侧（BL）到肠腔侧（AP）的表观渗透系数与AP到BL的表观渗透系数的比值（Papp,BL-AP/Papp,AP-BL）为0.99-1.27,提示1很可能不是P-gp的底物;与阴性对照组相比,1在0.625-10μmol/L范围内并没有显著降低Caco-2细胞单层模型中地高辛的外排比（ER值）,据此初步推断1并非P-gp的抑制剂。

肌肉萎缩症治疗的研究进展

肌肉萎缩症是一组进行性骨骼肌细胞退化疾病,该病患者的骨骼肌再生反应无法满足肌细胞退化后修复过程的需求。其发病机制和诊断治疗研究近年取得了重大进展,但临床尚无成熟有效的治疗方法,基因治疗、干细胞治疗以及抗炎药物等治疗方案为肌肉萎缩症治疗的主要研究方向。本文简要综述肌肉萎缩症的治疗研究现状。