脂质体介导基因转染活体眼组织的研究

目的 了解活体内不同途径应用脂质体转染外源基因在眼组织的分布情况。方法 将包有 β 半乳糖苷酶基因质粒的脂质体DOSPER ,分别采用玻璃体腔内注射、尾静脉注射、表面点药及球后注射到小鼠体内 ,2h ,1,2天、1,2 ,4周后用 β gal染色法观察 β 半乳糖苷酶基因在眼组织内的分布情况。 结果 玻璃体腔内注射、尾静脉注射、表面点药及球后注射 4组的小鼠眼球组织包括角膜、虹膜、睫状体、视网膜 ,均有 β 半乳糖苷酶基因表达 ,除表面点药组外 ,其他 3组小鼠脉络膜也有 β 半乳糖苷酶基因表达。用药 1天后开始出现 β 半乳糖苷酶基因阳性表达 ,持续达 1个月以上。 结论 脂质体能有效、稳定地转染外源基因到活体眼组织的角膜、虹膜、睫状体、脉络膜、视网膜。

视网膜色素变性缓慢型视网膜变性基因突变的研究

视网膜色素变性（ＲＰ）是由视网膜光感受器和色素上皮细胞变性导致的，特征为夜盲和进行性视野缺损的一组常见致盲眼底病，同时又是具有遗传异质性的单基因遗传病，是遗传性视觉损害和致盲的最常见原因之一。目前全世界约有１５０万人患此病，其中中国人占１／４左右。由...

与缓慢型视网膜变性基因突变相关的弥漫型视网膜色素变性伴黄斑部病变的研究

目的研究有缓慢型视网膜变性（ＲＤＳ）基因突变的临床表型，以探讨视网膜色素变性（ＲＰ）的分型方法。方法对查出ＲＤＳ基因突变的ＲＰ病例进行家系分析，以及视力、裂隙灯显微镜、直接检眼镜、视网膜电图、动态和／或静态视野、Ｄ１５色相配列试验、暗适应、眼底荧光血管造影或彩色眼底照相等眼科临床检查。结果本研究４例ＲＰ患者在中青年时发病，夜盲及视力下降几乎同时出现，视力下降明显，视网膜视锥、视杆细胞功能明显受损，眼底表现为弥漫型ＲＰ，伴有黄斑部病变。结论ＲＤＳ基因２１６密码突变的ＲＰ患者，眼部临床表现是视力损害严重的弥漫型ＲＰ，伴有黄斑部病变。

组织型纤溶酶原激活物诱发玻璃体后脱离的实验研究

目的研究玻璃体内注射组织型纤溶酶原激活物(tPA)诱发玻璃体后脱离(posteriorvitreousdetachment,PVD)的效果及安全性。方法12只灰兔分为实验A、B、C3组,每组4只,正常对照组1只。tPA10U,15U,25U(0.1mL),分别注入实验A、B、C3组兔的左眼作为实验组,0.1mLBSS分别注入右眼作为实验对照组。实验后分别观察0.5h、1h、2h、1d、7d的情况。扫描电镜、眼底检查、超声波用于PVD观察,透射电镜和视网膜电图用于药物安全性判断。采用SPSS10.0进行统计学分析。结果眼底和超声波检查发现实验A、B、C3组PVD发生率分别为25%、50%、100%,实验组总PVD发生率为58.3%,对照组无PVD发生,差异有高度显著性(P=0.002)。扫描和透射电镜显示实验C组发生完全性PVD,A和B组内界膜表面有玻璃体胶原残留。透射电镜和光镜检查发现各实验组的视网膜组织细胞未见异常,用药前后的视网膜电图差异没有显著性(P>0.05)。结论tPA能诱发人工PVD,25U在兔眼能安全和有效地诱发完全性PVD。

激光诱导脉络膜视网膜吻合初步实验研究

目的 探讨不同激光能量诱导脉络膜视网膜静脉在家免视网膜分支静脉阻塞眼的吻合成功率及安全性。方法 通过光动力法建立 20只兔眼视网膜静脉阻塞模型,24h后以 50 m 光斑,0.1 s的氪红离子激光的不同能量(A组 800mW.B组 1000mW)诱导脉络膜视网膜静脉间的吻合。对侧无静脉阻塞眼以作对照。在实验1、2、4、6 周时进行眼底照相和荧光眼底血管造影检查,测定吻合成功率。结果 在建立 BRVO模型的 20只眼中。A组诱导成功率 30%,激光对周围组织损伤中等;B组诱导成功率 40%;但激光对周围组织的损伤重。在对照组眼中,1只眼形成脉络膜视网膜静脉吻合。A、B实验组与对照组相比,诱导成功率差异有非常显著性意义(P < 0.001);A、B组之间比较成功率差异没有显著性意义(P > 0.1)。结论 利用激光诱导脉络膜视网膜静脉吻合,在技术上可行,较为安全;但在提高成功率方面尚有待进一步研究。

荧光标记的反义寡核苷酸在人视网膜色素上皮细胞中的分布研究

目的 观察表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）反义寡核苷酸（ＡＳＯ）转染人视网膜色素上皮细胞（ＲＰＥ）后的分布。方法 将荧光素标记的硫代修饰型及非修饰型ＥＧＦＲ ＡＳＯ直接或在脂质体介导下转染人 ＲＰＥ，荧光显微镜观察细胞内的分布。结果 非修饰型 ＡＳＯ在直接转染或脂质体介导下均发现荧光在４ｈ后消失。修饰型直接转染 ８ｈ后消失。脂质体介导下，细胞内荧光数目明显增加，细胞核内荧光强度增强，１４～１６ｈ后细胞荧光消失。结论 脂质体增加修饰型 ＡＳＯ与ＲＰＥ结合的数量，延长在细胞内停留时间，同时使其在细胞核内分布聚积明显；硫代修饰ＡＳＯ具有更好的稳定性。

实验性视网膜脱离复位后的视网膜细胞超微结构观察

目的 研究视网膜脱离复位后视网膜超微结构改变，以探讨视功能恢复障碍的机制。方法 １２只灰兔通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法建立视网膜脱离模型。用透射电镜观察术后 １，２，３，４周的视网膜。结果 视网膜复位早期光感受器外节段缺失、断裂。内节、视细胞核、双极细胞、神经节细胞均可见胞浆水肿，线粒体肿胀和嵴断裂。复位３周后，视网膜细胞结构基本正常，但仍有部分外节变短，神经纤维空洞存在。结论 视网膜复位后不仅光感受器，而且视网膜其他细胞和神经纤维均有不可逆的改变，这些改变导致祝功能恢复不良。

视网膜脱离家系的遗传方式探讨

目的了解原发性视网膜脱离的遗传方式。方法对有家族史的４例视网膜脱离患者及其家系成员进行眼科检查，绘制家系图并进行遗传方式的分析、结果家系分析表明４个视网膜脱离家系均为常染色体遗传，其中２个家系为常染色体显性遗传，另２个家系为常染色体隐性遗传。结论部分原发性视网膜脱离具有常染色体遗传方式。

中心性渗出性脉络膜视网膜病变的经瞳孔温热治疗

目的 评价经瞳孔温热疗法 (transpupillary thermotherapy,TTT)治疗中心性渗出性脉络膜视网膜病变 (central exudative chorioretinopathy,CEC)的疗效。方法 对 12例 (12只眼 )黄斑区具有脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)的中心性渗出性脉络膜视网膜病变患者进行 TTT治疗 ,并随访观察治疗前后视力、眼底、眼底荧光血管造影 (fundus fluorescein angiography,FFA)及吲哚青绿眼底血管造影 (indocyanine greenangiography,ICGA )的变化。结果 12只眼中有 3只眼进行了二次治疗 ,最终所有患者眼底出血渗出的情况均得到改善 ,眼底造影显示 CNV缩小或闭塞 ,治疗后视力提高 3只眼 ,稳定 6只眼 ,下降 3只眼。结论 经瞳孔温热疗法可以减少因脉络膜新生血管膜而引起的出血及渗出 ,加速疤痕化 ,对黄斑区 CNV有一定的疗效 。

糖尿病视网膜病变振荡电位和荧光血管造影的相关性

目的 :研究在荧光素钠血管造影 (FA)和吲哚青绿血管造影 (ICGA)下糖尿病视网膜病变 (DR)在不同阶段、形态改变时的振荡电位 (OPs) ,了解DR的功能学与形态学改变的特点及其之间的联系。方法 :选择 4 9名糖尿病患者(89只患眼 ) ,按在FA下DR的不同阶段分 4组 (88眼 ) ,按ICGA分 2组 (6 0眼 ) ,选择 4 3只正常眼为对照组 ,对所有眼按国际标准化方法进行OPs检测。结果 :OPs总和振幅在FA有改变时下降 ,OP2 振幅在FA无改变时下降 ,有改变时进一步下降 ;无灌注期与新生血管期的OPs总和振幅及各子波振幅改变相同 ;ICGA晚期 ,部分眼出现晚期弥散性高荧斑和极晚期高荧伴低荧的“椒盐状”外观 ,与此相应 ,OP3 振幅和OP4潜伏期较对照组下降和延长。结论 :OP2 振幅较OPs总和振幅在DR早期诊断方面敏感 ,无灌注期和新生血管期的视网膜循环状态相似 ,无灌注区可与新生血管一样作为DR进展的质变标志 。

经瞳孔温热疗法治疗高度近视眼的脉络膜新生血管

目的:评价经瞳孔温热疗法(transpupillary ther-motherapy,TTT)治疗高度近视眼的黄斑区脉络膜新生血管膜(choroidal neovascularization,CNV)的疗效。方法:对17例21眼黄斑区具有CNV的高度近视患者进行TTT治疗,并定期随访,观察治疗前后视力、眼底、眼底荧光造影(fundus fluores-cein angiography,FFA)及吲哚青绿眼底血管造影(indocyaninegreen angiography,ICGA)的变化。结果:治疗后21眼中视力提高仅4眼,稳定8眼,下降9眼。治疗过程中有4眼发生脉络膜出血,1眼治疗后CNV仍反复生长。最终有16眼眼底出血渗出的情况得到改善。结论:经瞳孔温热疗法可以减少因脉络膜新生血管膜而引起的出血及渗出,加速疤痕化,对封闭黄斑区CNV有一定的疗效,但高度近视患者的CNV进行TTT治疗时能量较难控制,容易出血,对中心视力的恢复有一定的影响,应谨慎选择治疗方式。

高度近视眼的黄斑局部视网膜电图频谱分析

目的 :应用局部视网膜电图 (localelectroretingoram ,LERG)频谱分析方法 ,进一步了解高度近视眼黄斑部光感受器细胞与光感受器后神经元细胞功能异常的情况。方法 :6 6例高度近视眼患者 (12 8眼 )的LERG被记录研究。应用手提眼底镜式局部刺激器 ,通过放大的瞳孔直视眼底监控固视状况 ,闪烁光频率 31Hz。结果 :与对照组相比 ,高度近视眼底仅有豹纹状眼底改变和伴后巩膜葡萄肿两组闪烁LERG的 1f与 2f均有降低(P <0 .0 5 ) ,2f在后组中下降显著 (P <0 .0 1) ,且 1f/2f比值有明显增加。对屈光度分组的Fourier分析发现 :1f与 2f在各组均有降低 (P <0 .0 5 ) ,2f的下降在 - 10D以上组显著 (P <0 .0 1) ;1f/2f比值在早期RP病变表现正常或轻度异常 ,随发病病程增加有升高趋势。结论 :高度近视眼的黄斑功能早期以视网膜外层为主 ,随着病情的发展 ,黄斑部内层的受累有加重趋势。不同眼底改变与黄斑功能受损程度具有一致性。LERG频谱分析对高度近视眼黄斑功能的定位定性诊断具有临床意义。

上皮移植治疗严重的眼表面疾患

角膜缘上皮移植是治疗角膜缘功能缺陷产生的严重眼表面疾患的有效手术。在国外已逐渐应用于临床。本文就干细胞缺陷的理论基础，上皮移植治疗眼表面疾患的分类，角膜缘移植的手术方法，术后处理和预后等方面作一综述。

吲哚青绿眼底血管造影诊断视网膜大动脉瘤

目的 :评价吲哚青绿眼底血管造影 (IndocyanineGreenAngiography ,ICGA)在诊断视网膜大动脉瘤(RetinalMacroaneurysm)中的作用。方法 :使用德国HEIDELBERGENGINEERING生产的海德堡眼底血管造影仪(HRA) ,对两例临床分别诊断为老年性黄斑变性和眼底出血的患者 ,进行同步的眼底荧光血管造影 (FundusFluoresceinAngiography,FFA)和ICGA造影检查。结果 :由于出血的遮蔽 ,FFA未见动脉期瘤体充盈的典型表现 ,但与其同步进行的ICGA却显示出动脉主干上瘤样结节状高荧光。结论 :与FFA相比 ,ICGA可提高视网膜大动脉瘤的诊断率 ,是FFA的必要补充。

小包装全氟乙烷在玻璃体视网膜手术中的应用

目的 观察国产小包装全氟乙烷（C2F6）在玻璃体视网膜手术中的治疗作用。方法采用环扎和（或）加压联合玻璃体切割手术，全气液交换并注入国产小包装C2R，对22例视网膜脱离患眼进行治疗，观察视网膜的复位率．气体的眼内动力学及其对眼组织和眼压的影响。结果 经过3月～1a的随访，视网膜的复位率达72．73％，小包装气体对眼组织无毒性，术后第1d、2d、3d、6d的眼压分别为（32．02±10．17）mmHg、（23．21±5．82）mmHg、（20．00±4．14）mmHg、（17．44±4．56）mmHg（1kPa=7．5mmHg），眼内寿命为（29．44±3．69）d，眼内半衰期为（12．25±3．49）d。结论 小包装国产C2R不仅安全、可靠，临床使用方便、经济，而且便于携带、储存。

小包装国产全氟乙烷和全氟丙烷的浓度测定

目的测定钢瓶内和小包装内国产全氟乙烷(C2F6)和全氟丙烷(C3F8)的浓度。方法采用气像色谱法和质谱分析法对钢瓶内C2F6和C3F8测定,将钢瓶内C2F6和C3F8气体分别分装入15个专利小包装中,把15个C2F6和C3F8气体小包装分别平均分成3组,每组5个,常温下保存,用气像色谱法于分装后2周、3个月和1a后各测定其浓度。结果钢瓶内C3F8和C2F6的浓度均大于99.90%,无毒性成分,专利小包装中C2F6和C3F8气体在分装后2周浓度为93.05%和96.75%,3个月后为92.91%和97.29%,1a后为94.46%和95.32%.结论国产C2F6和C3F8气体纯度高,无毒性,专利小包装储存C2F6和C3F8,气体浓度稳定,可代替钢瓶储存气体应用于临床和科研。

玻璃体后脱离临床和超微结构诊断

目的 通过临床、B超和扫描电镜检查玻璃体后脱离 (posterior vitreous detachm ent,PVD)情况 ,评价各种检查手段诊断 PVD的价值。方法 16只新西兰白兔随机分为 A、B、C三组各 6、6、4只兔 ,均以右眼为实验眼 ,左眼为对照。A组实验眼玻璃体腔内注射纤溶酶 0 .1m l 1U联合透明质酸酶 2 0 U,B组注射 0 .1m l纤溶酶 1U ,C组注射透明质酸酶 2 0 U ,所有对照眼玻璃体腔内注射 0 .1m l BSS液。术后 7天内裂隙灯前置镜、直接检眼镜、B超观察 PVD,术后 7天摘除眼球扫描电镜检查 PVD。结果 A组实验眼临床诊断完全性 PVD6 6 .7% (4 / 6 ) ,B超诊断完全性 PVD87.5 % (5 / 6 ) ,扫描电镜确诊完全性 PVD10 0 % (6 / 6 )。临床和 B超诊断之间及它们分别与扫描电镜诊断PVD的非参数 Z检验无明显差异 (分别 P =0 .180 ,P =0 .317,P =0 .15 7)。 B组实验眼临床检查无 PVD(0 / 6 )。 B超仅发现一例部分性 PVD(1/ 6 ) ,扫描电镜确诊部分性 PVD87.5 % (5 / 6 ) ,一例完全性 PVD。临床和 B超诊断的非参数 Z检验无明显差异 (P =0 .317) ,它们分别与扫描电镜诊断部分性 PVD的非参数 Z检验差异显著 (分别 P =0 .0 2 0 ,P =0 .0 34 )。C组临床、B超及扫描电镜诊断均无 PVD。结论 临床结合 B超检查对于诊断伴有玻璃体液化的

小鼠慢性视网膜变性/盘膜边缘蛋白基因克隆及重组质粒构建(英文)

目的 克隆小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因 ,并构建其重组质粒载体。方法 以正常小鼠视网膜 RNA为模板 ,采用 RT- PCR方法扩增出 c DNA目的片段 ,PCR扩增 ,克隆至 p Bluescript II KS(+ )质粒 ,进行限制性内切酶 Bam H I和测序分析 ;再克隆到带有 CMV启动子的 pc DNA3质粒 Bam H I位点 ,Bam H I和 Eco R I限制性内切酶及测序证实。结果 限制性内切酶分析及测序证实 p Bluescript II KS(+ )质粒和 pc DNA 3质粒中插入的 1.2 kb片段 ,与小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因全部编码区相吻合。结论 获得小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因的全部编码区序列 ,并构建到带有CMV启动子的 pc DNA3载体中 ,为进一步研究打下基础。[眼科新进展 2 0 0 1;2 1(1)∶ 7- 11]