HLAⅠ类抗原的基因芯片分型技术研究

目的 采用DNA芯片技术进行汉族人群HLAⅠ类抗原A、B位点的DNA分型研究 ,并实现将A、B位点的DNA分型集中于一张芯片上 ,同时完成。方法 根据HLAⅠ类抗原A、B位点不同基因亚型的独特序列设计探针 ,制成分型芯片 ;待检测样品经PCR反应标记上荧光之后 ,与探针在芯片上进行杂交 ,通过对杂交产生的荧光信号值进行分析 ,确定样品的HLA A、B基因亚型。将这一方法应用于 2 2 0份样本的HLAⅠ类DNA分型并将部分样品进行基因测序。结果 所有样本的HLAⅠ类基因芯片分型均获得成功 ,无假阳性和假阴性出现 ,80份样本的重复率为 10 0 % ,总耗时 2 .5h。分型结果经双盲验证完全符合。可准确分辨出A位点等位基因 2 0个 ,B位点等位基因 4 1个 ,实际检出汉族人群A抗原特异性 13个、B抗原特异性 32个。结论 基因芯片用于HLAⅠ类A、B分型技术可行 ,其分辨率高、特异性强、重复性好、操作简便快速、结果直观 ,可以在一张芯片上同时检测HLA A、B位点 ,并实现一张芯片多人份 ,适合于临床应用。