父系表达基因10蛋白在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的研究父系表达基因10(PEG10)在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法收集2006年3月至2011年5月52例肝细胞癌组织,采用免疫组织化学法检测组织中PEG10表达,分别以31例癌旁组织、10例正常肝组织标本和10例胎盘组织作为对照。回顾52例肝细胞癌患者各项指标检测结果,并分析各项指标与PEG10表达的关系。结果 PEG10在肝细胞癌组织中阳性表达率为90.38%(47/52),显著高于癌旁正常组织[67.74%(21/31)]和正常肝组织(0),差异有统计学意义(P<0.01)。PEG10表达的阳性程度与肝细胞的分化程度呈正相关(r=0.441,P<0.01)。PEG10表达在肿瘤大小、不同年龄和性别患者间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PEG10在肝细胞癌组织中表达的阳性程度与肿瘤分化程度有关,对肝细胞癌的敏感性好,但其特异性不强。

Golph2蛋白质的原核表达及多克隆抗体制备

目的:新近发现Golph2蛋白与肝癌关系密切,制备Golph2重组蛋白质和多克隆抗体,建立Western blot检测技术,为后续研究提供基础。方法:RT-PCR从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列,PCR回复突变制备全长完整基因(1206bp),将其插入至原核表达载体pET-21、转化大肠杆菌DH5a,IPTG诱导表达,镍柱亲和层析纯化蛋白,SDS-PAGE鉴定。将纯化蛋白质免疫家兔,制备多克隆抗血清。建立Western blot鉴定重组蛋白和抗血清特异性,测定临床血清标本中Golph2蛋白水平。结果:从肝癌细胞中钓取的基因,出现2个碱基置换突变和1个碱基缺失突变,经回复突变,获得与NM177937完全一致序列。SDS-PAGE和Western blot证实,重组Golph2蛋白质与预期结果一致。抗血清能够特异地识别52kD重组蛋白质和73kD血清蛋白质。结论:Golph2蛋白质表达和抗血清制备完全成功。

采血位置造成甲状旁腺激素结果假性增高1例报道

近年来,随着慢性肾功能衰竭(简称慢性肾衰)患者透析时间的延长,继发性甲状旁腺功能亢进症的发病率越来越高[1]。本文报道1例采血位置造成慢性肾衰继发甲状旁腺功能亢进患者甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)结果假性增高的病例。

血清Ⅱ型高尔基体膜蛋白与人类肝细胞癌的关系

目的探讨血清Ⅱ型高尔基体膜蛋白（Golph2）在肝癌诊断中的价值。方法应用逆转录聚合酶链反应技术，从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列，聚合酶链反应回复突变制备全长完整基因（1206bp），将其插入原核表达载体pET21、转化大肠杆菌DH5α，应用异丙基硫代β-D-半乳糖苷诱导其表达，镍柱亲和层析纯化，并经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。用纯化的蛋白质免疫家兔，制备多克隆抗血清。建立Western blot鉴定重组蛋白和抗血清特异性，建立双抗体夹心酶联免疫吸附法测定150例肝癌、120例其他肝病、200名健康体检者血清Golph2水平。均值比较采用ONO-WAY ANOVA法。结果从肝癌细胞中凋取的基因，出现2个基因置换突变和1个碱基缺失突变，经回复突变，获得与NM 177937完全一致的序列。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot证实，重组Golph2与预期结果一致。抗血清能够特异地识别相对分子质量为5．2×10^4的重组蛋白质和7.3×10^4的血清蛋白质，与预期结果一致。建立的酶联免疫吸附试验方法检测肝癌、其他肝病患者、对照组血清Golph2，其吸光度值均数相差显著。以吸光度值≥0．40为阈值，其敏感度和特异性分别为44．5％和82．0％。结论Golph2在各组人群中均有表达，在肝癌组最高，在肝癌诊断中有一定价值，但特异性和敏感度不高。

胎盘来源的miRNAs在子痫前期发生发展的作用及临床价值

子痫前期(PE)是危害孕产妇和新生儿生命的严重疾病,其病理生理机制尚未完全揭示。微小RNA(miRNAs)是一类小分子单链RNA,在机体生理和病理过程中发挥重要作用。近年来有学者对孕妇胎盘组织中的miRNAs进行分类,探究了这些miRNAs在PE发病过程的作用及不同来源miRNAs在子痫前期早期预测、诊断中的价值。本文就胎盘来源的miRNAs在PE发病过程中的作用机制及诊断价值作一综述。