免疫抑制剂致肾移植患者十二指肠溃疡穿孔(附1例报告并文献复习)

目的:探讨肾移植术后免疫抑制剂致十二指肠溃疡穿孔的处理方法。方法:结合有关文献复习对1例此种患者的临床资料进行分析。结果:该例十二指肠溃疡穿孔行修补术后,出现穿孔愈合延迟、严重呼吸道感染,经治疗穿孔及呼吸道感染治愈而移植肾失功能。结论:免疫抑制剂应用是引起肾移植患者发生上消化道溃疡穿孔的主要因素;此种患者预后欠佳,早期诊断,应综合各器官情况,进行有效处理。

慢性移植肾肾病的治疗方法探讨

目的 :探讨治疗慢性移植肾肾病 (CAN)的有效途径。方法 :按照不同治疗方案将CAN2 34例患者分为 4组 ,比较各组的治疗效果。结果 :2 34例的总有效率为 34.2 % ,4组的有效率分别为 19.3%、32 .6 %、4 6 .9%、4 2 .9%结论 :随着免疫抑制方案的不同 ,临床上所见慢性排斥发生机制也有差别 ,治疗上宜根据患者具体情况 ,采取相应的综合措施 ,抗病毒、降血脂、降血压、治疗糖尿病等 ,可取得一定效果 ;结合传统中药治疗 ,可明显提高有效率。

抗Tac单抗诱导治疗对肾移植受者外周血淋巴细胞CD分子表达的影响

目的:探讨首次尸肾移植受者使用抗Tac单抗诱导治疗后外周血淋巴细胞CD分子的动态变化及其临床意义.方法:对首次尸肾移植的患者,在三联免疫抑制方案(激素+骁悉+新山的明)基础上,给予两剂抗Tac单抗诱导治疗,其中舒莱组30例,赛呢哌组28例.以流式细胞仪检测术前,术后第1天、1周、2周、4周、6周及8周外周血淋巴细胞CD分子的表达.结果:移植受者外周血淋巴细胞CD分子变化明显,其中CD25在术后明显下降(P＜0.05),并维持4～6周;CD40亦明显下降(P＜0.05),术后2周时开始回升;CD86、CD28、CD80、CD95等均有下降,但各组间差异无统计学意义.舒莱组和赛呢哌组CD分子表达差异亦无统计学意义.结论:抗Tac单抗可以有效地封闭外周血活化淋巴细胞表面的CD25,抑制其增殖和分化;通过某种机制,抗Tac单抗可以降低外周血淋巴细胞CD40的表达,可能起到抑制B淋巴细胞活化的作用.

CTLA-4单核苷酸多态性对肾移植受者近期急性排斥反应发生的影响

目的了解和评价细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxicTlymphocyteassociatedantigen-4，CTLA-4）蛋白的基因多态性位点-1722T／C、-1661A／G、-318C／T、＋49A／G、＋6230G／A对肾移植近期急性排斥反应的影响。方法采用测序法对上海市器官移植中心167例首次尸体肾移植受者进行CTLA-4-1722T／C、-1661A／G、-318C／T、＋49A／G、＋6230G／A位点检测。结果①肾移植术后6个月内，167例。肾移植受者45例发生急性排斥反应，发生率为26．9％，第1次排斥反应发生时间为术后5-140天，所有急性排斥反应经过抗排斥治疗均能逆转。②排斥组和非排斥组比较CTLA-4各个位点分布不同，有统计学意义的基因型为-1722TT。③各个位点的等位基因检测中，有统计学意义的等位基因为-1722T。结论CTLA-4中基因型-1722TT等位基因-1722T与肾移植受者近期急性排斥反应有关，可能为急性排斥反应的危险因素。

咪唑立宾在白细胞减少同种肾脏移植患者中的替代免疫抑制治疗

目的 探讨咪唑立宾在同种肾脏移植术后白细胞减少患者中替代硫唑嘌呤或骁悉的治疗效果。方法 选取 32例白细胞减少 (WBC <4× 10 9·L-1)患者 ,将硫唑嘌呤或骁悉替换为咪唑立宾进行免疫抑制治疗。其中 5例白细胞 <3× 10 9·L-1的患者 ,初始时加用集落细胞刺激因子 75 μg(GCSF)一次或两次。 结果 所有患者均随访 3月以上。 2 7例未用GCSF的患者 ,1周后WBC计数均上升 ,与转换前比较差异有极显著意义 [(3.4± 0 .3)× 10 9·L-1vs.(3.9± 0 .3)× 10 9·L-1,t=10 .7,P <0 .0 1) ],转换 1月及 3月前后对照比较差异均有极显著意义。 2例患者在转换后发生排斥 ,激素冲击治疗后逆转。结论 咪唑立宾具有较少的骨髓抑制作用 ,可替代硫唑嘌呤或骁悉 ,安全、有效地应用于白细胞减少的肾脏移植患者。

大鼠胰岛分离纯化技术的改进

目的探索成年大鼠胰岛的分离纯化理想方法,并对获得的胰岛进行体外功能鉴定。方法通过用胶原酶P液灌注分离成年SD大鼠胰岛,不连续密度梯度离心法纯化胰岛,STZ染色鉴定胰岛,AO/PI染色鉴定胰岛活率,胰岛素释放试验判定胰岛功能,光镜观察体外培养胰岛的形态学变化。结果纯化后每只大鼠胰岛收获量为(629±102)IEQ,胰岛纯度>90%,胰岛细胞活率>90%,胰岛细胞体外培养液中胰岛素含量在低糖和高糖刺激下的浓度分别为(3.701 5±0.492 0)mIU/L和(10.477 1±2.233 4)mIU/L,刺激指数为2.837 8±0.102 3,体外培养48h几乎完全贴壁,培养3周生长状况仍良好。结论分离条件把握好后,胶原酶P消化、Fi-coll400非连续密度梯度离心法可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。

终末期肾病患者的明天也美好

祖国医学认为，肾乃气血之源；现代医学的发展，也从各个方面论证了肾脏在全身新陈代谢、内分泌中所占的重要地位。它在人体中的作用举足轻重，是维持生命的重要器官。但是，危及生命的肾脏疾病发病率很高，据统计，每年每百万人口新发生的慢性肾功能衰竭患者达30～100人。

核因子κB诱骗剂处理的树突状细胞延长小鼠移植心脏存活时间

目的探讨核因子κB(NF-κB)诱骗剂处理供者树突状细胞(DC)对同种异体小鼠移植心脏存活时间的影响。方法在体外以NF-κB诱骗剂处理供者骨髓来源的DC,并于心脏移植术前7 d经门静脉输注2×10~6个DC给受者,术后1～7 d受者接受亚治疗量的环孢素A(10mg·kg^(-1)·d^(-1))腹腔注射(联合方案组),并设不作任何处理(对照组)、单用环孢素A(CsA组)、单纯输注未经处理DC (DC对照组)和单纯输注经处理DC(DC实验组)的对照组,另设接受来自第三方供者的对照组(第三供者组,受者的处理同联合方案组),所有受者均接受腹腔心脏移植。观察各组移植心脏的存活时间;采用酶联免疫吸附法检测术后第7天受者血清白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-10和γ干扰素(IFN-γ)的含量。结果移植心脏平均存活时间(MST),对照组为7 d,CsA组为10.3 d,DC对照组为7.6 d,DC实验组为21.4 d,联合方案组为53.6 d,第三供者组为9 d,DC实验组移植心脏MST明显长于对照组和DC对照组,差异有统计学意义(P<0.01);联合方案组移植心脏MST明显长于CsA组、DC实验组及第三供者组,差异有统计学意义(P<0.01)。联合方案组IL-2和IFN-γ的含量最低,而IL-4和IL-10的含量最高,与其它各组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组、DC对照组及CsA组相比,DC实验组IL-2及IFN-γ的含量也显著降低(P<0.05),而IL-4和IL-10则升高(P<0.05)。结论术前输注经NF-κB诱骗剂处理的供者DC可延长同种小鼠移植心脏的存活时间,若术后加用短程亚治疗量CsA,则移植心脏的存活时间得到进一步延长。

细胞核磁显像技术在胰岛细胞移植中的应用

一、成人胰岛细胞移植的现状 成人胰岛细胞移植作为1型糖尿病、青年人中的成年发病型糖尿病（MODY）以及重症2型糖尿病的一种新的替代治疗手段．正逐步从实验室走入临床。2000年加拿大的Shapiro经过1年的临床研究提出Edmonlon方案．使7例受苦1年胰岛索非依赖率达到100％。

霉酚酸、雷帕霉素及FTY720在体外对成人胰岛功能的影响

目的探讨霉酚酸、雷帕霉素及FTY720对体外培养的成人胰岛功能的影响。方法将分离、纯化后获得的成人胰岛细胞分别与不同浓度的霉酚酸、雷帕霉素和FTY720混合培养24h,然后测定经各药物作用后的胰岛细胞在低糖(2.8mmol/L)和高糖(16.7mmol/L)刺激下胰岛素的释放量,并计算刺激指数。结果对照组(未添加药物)的胰岛细胞在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放量分别为(7.37±1.74)ng/ml和(15.15±5.39)ng/ml,刺激指数为2.06±0.46。与对照组相比,添加霉酚酸的胰岛细胞在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放量均明显下降(P<0.01),刺激指数亦明显下降(P<0.05);添加雷帕霉素组,低糖和高糖刺激时胰岛素的释放量均有下降(P<0.05),但刺激指数仅在雷帕霉素浓度为1.0ng/ml时明显下降(P<0.05);添加FTY720组,低糖刺激时胰岛素的释放量明显低于对照组(P<0.05),高糖刺激时,胰岛素释放量仅在FTY720高浓度组有明显下降(P<0.05),刺激指数也有明显下降。结论相对来说,在体外雷帕霉素和FTY720对成人胰岛细胞的毒性作用较小;胰岛移植后,选择免疫抑制方案应遵循低剂量原则。

腺病毒载体转染人HO-1基因增强成人胰岛细胞抗凋亡和胰岛素释放功能的研究

目的了解腺病毒载体转染人HO-1基因对体外培养的成人胰岛的作用,探索基因治疗在胰岛移植中的潜在应用价值。方法将成人胰岛分离纯化后分为3组:转染人HO-1基因组(Ad-HO-1组)、转染EGFP基因组(Ad-EGFP组)及对照组,采用携带人HO-1基因及EGFP基因的腺病毒作为载体对体外培养的成人胰岛进行转染,通过形态学观察、胰岛素释放试验及肿瘤坏死因子(TNF)α及放线菌酮诱导48 h后流式细胞仪检测凋亡。结果Ad-HO-1组的胰岛在高糖刺激下胰岛素分泌量为270 m IU/L±89 m IU/L,高于对照组(182 m IU/L±59 m IU/L)和Ad-EGFP组(189 m IU/L±88 m IU/L,P<0.05);诱导后Ad-HO-1组凋亡细胞的发生率为63%±11%,对照组为91%±11%,两组比较,P<0.01。结论使用腺病毒作为载体对体外培养的成人胰岛转染HO-1基因能够增加胰岛的抗凋亡能力、促进胰岛素的分泌。

实验大鼠胰岛分离方法标准化研究

目的借鉴成人胰岛分离方法,采用商品化的试剂,建立较为稳定的实验大鼠胰岛分离方法。方法分别用传统方法和标准方法各消化12只大鼠的胰腺,比较消化后和纯化后的胰岛得率,以胰岛素释放试验比较两组胰岛的功能。对照组与标准组胰岛得率、活率和功能指标的比较,采用独立t检验分析。结果标准组消化后和纯化后胰岛数量为(891±53)个和(590±88)个,对照组为(888±115)个和(562±105)个(t=0.082,0.708;P=0.935,0.486);胰岛素释放指数为2.57±0.17和2.50±0.52,(t=0.443,P=0.662)差异无统计学意义。结论标准化的胰岛分离方法,可减少实验误差、利于尽快掌握分离技术,保证胰岛的得率和功能。特别是进行胰岛移植实验时,标准化的胰岛分离方案可提高移植效果,保证实验的可靠性。

胶体金免疫层析法视黄醇结合蛋白检测试剂对肾小管功能损伤的诊断价值评价

目的:对胶体金免疫层析法的视黄醇结合蛋白(RBP)检测试剂诊断肾小管损伤的价值进行评价。方法:选择上海柏纳生物技术有限公司生产的视黄醇结合蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法)与上海太阳生物技术有限公司生产的RBP含量测定试剂盒(酶联免疫法)进行对比试验,分别对临床选取的病例组和对照组的尿液样本进行检测。参考临床单位诊断标准,酶联免疫法结果浓度≥300ng/mL为阳性,<300ng/mL为阴性;胶体金免疫层析法检测结果检测线显色为阳性,不显色为阴性。对两组检验结果进行Kappa一致性检验,分析两种检测方法诊断结果的一致性,同时以临床通用诊断方法为参考,计算胶体金免疫层析法诊断肾小管功能损伤的灵敏度和特异度。结果:两种检测方法的诊断结果一致性良好(市一医院:K=0.9070,95%CI:0.8277～0.9863,P<0.01;市六医院:K=0.9391,95%CI:0.8714～1.000,P<0.01)。胶体金方法诊断肾小管损伤的灵敏度和特异度,市一医院:灵敏度=100%,精确95%CI为:92.45%～100.00%;特异度=91.80%,精确95%CI为:81.90%～97.28%;市六医院:灵敏度=100%,精确95%CI为:91.40%～100.00%;特异度=95.00%,精确95%CI为:86.08%～98.96%。结论:胶体金免疫层析法的视黄醇结合蛋白检测试剂与已批准上市的试剂等效,对肾小管功能损伤的诊断具有重大应用价值。