宋内志贺菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性研究

目的检测宋内志贺菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药情况,探讨染色体介导DNA旋转酶A亚单位(gyrA)和拓扑异构酶ⅣC亚单位(parC)基因突变或(和)质粒介导qnrA基因存在与宋内志贺菌耐喹诺酮类药物的相关性。方法用K-B纸片扩散法对58株宋内志贺菌进行耐药性检测;PCR法检测宋内志贺菌喹诺酮耐药决定区(QRDR)相关gyrA、parC基因,并根据药敏结果挑选5株菌扩增片段进行DNA测序;PCR法扩增qnrA基因片段。分析宋内志贺菌gyrA、parC基因突变或(和)qnrA基因存在与喹诺酮类药物耐药性的关系。结果宋内志贺菌对萘啶酸的耐药率高达94.8%。58株宋内志贺菌中,8株检出qnrA基因,5株测序gyrA、parC基因的菌株中,4株萘啶酸耐药菌株均在gyrA83位发生有义突变TCG(Ser)→TTG(Leu),但未发生parC基因突变,gyrA基因突变菌株对萘啶酸全耐药。qnrA基因阳性菌株对5种喹诺酮类药物抑菌圈中位数比较都缩小;对NAL、氧氟沙星的耐药率高于qnrA基因阴性菌株(P<0.05),差异有统计学意义。结论gyrASer83→Leu突变是导致宋内志贺菌临床分离株对喹诺酮类药物耐药的关键突变,宋内志贺菌若携带质粒介导qnrA基因则会导致对喹诺酮类药物的敏感性下降,若两者同存也可引起喹诺酮类药物耐药增强,除萘啶酸耐药外对其他喹诺酮类药物也可呈中介。

绝经后妇女骨转换生化标志物与骨密度相关性分析

目的分析绝经前后妇女骨转换生化标志物水平的变化及与骨密度的关系,同时探讨骨密度降低妇女绝经前期及绝经后期骨代谢生化指标的水平。方法用双能X线骨密度仪测定225例骨质疏松症门诊女性就诊者腰椎(L1~L4)及股骨颈骨密度,选取其中185例45~65岁的绝经女性根据骨密度值分为骨量正常组(50名)、骨量减少组35例和骨质疏松组(100例);选取其中45例51~70岁的骨密度降低者作为绝经后期骨密度降低组,选取其中25例42~50岁的未绝经骨密度降低者作为绝经前期骨密度降低组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有受检者血清组织蛋白酶K(Cathe K)、骨碱性磷酸酶(B-ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平;同时用电化学发光免疫分析法检测骨钙素、β-胶原降解产物(β-crosslaps)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PⅠNP)水平。结果骨质疏松组绝经后妇女血清Cathe K、PⅠNP、β-crosslaps、骨钙素、TRAP水平明显高于骨量正常组(P<0.05),且与腰椎(L1~L4)或股骨颈骨密度呈明显负相关(P<0.05);B-ALP水平稍低于骨量正常组,但差异无统计学意义(P>0.05)。绝经后期骨密度降低组血清Cathe K、TRAP水平明显低于绝经前期妇女(P<0.01),血清PⅠNP、骨钙素水平明显高于绝经前期骨密度降低组(P<0.01),而2个组之间腰椎(L1~L4)、股骨颈骨密度及β-crosslaps、B-ALP水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论绝经后女性骨质疏松症为高转换型。血清骨钙素、β-crosslaps、PⅠNP、B-ALP、TRAP、Cathe K水平变化可反映骨代谢活动。骨密度及骨转换生化指标联合检测有利于骨质疏松症患者的预防、治疗和疗效观察。

某院住院患者抗菌药物使用量与细菌耐药分析

目的:分析抗菌药物使用量及临床分离菌对常用抗菌药物耐药情况,为临床合理用药提供参考。方法:统计和分析2012-2013年住院患者抗菌药物用药频度(DDDs)及主要临床分离菌对常用抗菌药物的耐药性。结果:2年间临床选择以头孢菌素类、喹诺酮类、头霉素类及其他β-内酰胺类抗菌药物为主,2013年较2012年DDDs变化显著的抗菌药物主要有头孢呋辛、头孢曲松、头孢美唑、头孢西丁、帕珠沙星、磷霉素等。与2012年比较,2013年大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对头孢呋辛、头孢美唑、磷霉素耐药率均呈现上升(P<0.05~P<0.01);鲍曼不动杆菌对头孢美唑和磷霉素耐药率均超过80%,均呈现上升(P<0.05和P<0.01);金黄色葡萄球菌对左氧氟沙星耐药率明显上升(P<0.01)。结论:抗菌药物DDDs与细菌耐药性有一定相关性,DDDs升高,细菌耐药性明显升高;DDDs下降,部分细菌耐药性有所降低。医院应积极开展细菌耐药性监测,采取有效措施控制抗菌药物的用量,促进临床合理使用抗菌药物,减少细菌耐药性的产生。

药敏试验在泌尿生殖道支原体感染治疗中的作用分析

目的了解本地区非淋菌性尿道(宫颈)炎患者解脲脲原体(UU)和人型支原体(MH)的耐药情况,评价支原体药敏试验对临床治疗的意义。方法对231例患者进行支原体培养鉴定药敏一体化试剂盒检测、按照药敏结果选择用药的144例设为试验组,经支原体培养鉴定试剂盒检测、参照部颁治疗方案用药的87例设为对照组,进行相关数据的统计分析。结果试验组UU和MH对药物敏感性高的为美满霉素、强力霉素、交沙霉素和司帕沙星,而对大观霉素、阿奇霉素和环丙沙星的耐药率均达50%以上。试验组的治愈率和病原体清除率均显著高于对照组(P<0.005和P<0.001)。结论支原体药敏试验对临床筛选药物和提高治愈率作用确切,在支原体感染病例的治疗中普及药敏试验是必要的。

血清组织蛋白酶K在骨质疏松症诊断中的应用

目的：探讨血清组织蛋白酶K（Cathe K）在骨质疏松症中的应用价值及意义。方法采用双能X线骨密度仪测定受检者腰椎及股骨颈的骨密度，根据骨密度值将187例受检者分为骨量减少组63例、骨质疏松症组124例。骨质疏松症组中有32例女性患者接受药物疗效监测。另选取体检者142名作为正常对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测所有受检者血清Cathe K、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）水平；同时采用电化学发光法检测骨钙素（N-MID）、β-胶原降解产物（β-crosslaps）、Ⅰ型前胶原氨基端前肽（PⅠNP）水平。各组按年龄再分为35～45岁组、46～55岁组、56～65岁组、66～70岁组、≥71岁组。结果骨质疏松症组35～45、46～55和56～65岁3个年龄段血清Cathe K水平均明显高于正常对照组同年龄段（P〈0.01），而66～70及≥71岁与正常对照组同年龄段比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。骨量减少组血清Cathe K水平除35～45岁与正常对照组同年龄段相比明显增高（P〈0.01）外，其余各年龄段与正常对照组同年龄段比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。对各组46~65岁人群的骨转换标志物进行分析，骨质疏松症组血清Cathe K、PⅠNP、β-crosslaps、N-MID、TRAP水平与骨量减少组及正常对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）；而骨量减少组与正常对照组之间各项指标差异均无统计学意义（P〉0.05）。骨质疏松症患者按治疗方案治疗3个月后，血清β-crosslaps、Cathe K明显低于治疗前（P〈0.05）。结论血清Cathe K可用于骨质疏松症的诊断及疗效观察。

2型糖尿病患者伴下肢血管病变的危险因素分析

目的 探讨2型糖尿病患者伴下肢血管病变的危险因素。方法 2型糖尿病患者伴下肢血管病变79例（LEAD组），元下肢血管病变67例（NLEAD组），分别记录其性别、年龄、糖尿病病程、血压，测定其空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TC）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B（APOB）及24h尿白蛋白，并行下肢彩色多普勒超声检查。结果 LEAD组与NLEAD组比较，平均年龄、平均病程、24h尿白蛋白、收缩压、舒张压、TC、TG、LDL-C、HDL-C、APOA1、APOB、HbA1c差异均有统计学意义（P〈0．01或〈0．05）。2型糖尿病患者伴下肢血管病变各危险因素的Logistic回归分析结果表明，TC、年龄、收缩压、24h尿白蛋白四项是其独立危险因素。结论 TC、年龄、收缩压、24h尿白蛋白是2型糖尿病患者伴下肢血管病变的独立危险因素。

寻常性天疱疮的实验室诊断

寻常性天疱疮 (PV)是一种自身免疫性大疱性皮肤和粘膜疾病 ,实验室检查对本病的确诊起着至关重要的作用。本文综述了PV的几种常见的实验室诊断方法及分子生物学技术在诊断PV方面的应用。

早期梅毒TRUST检测的临床意义

对 145例经TPPA试验和 (或 )D F检查证实的早期梅毒治疗前后进行甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)。结果 :145例早期梅毒治疗前TRUST阳性 135例 ,阳性率 93.1%。滴度达 1∶16以上的二期梅毒患者比例 ( 45 .8% )高于一期梅毒 ( 2 0 .6 % )和早期潜伏梅毒 ( 15 .4% ) ,提示二期梅毒血清学反应水平相对较高 ,TRUST滴度与病情活动性呈正相关。梅毒治疗后 1年内的血清阴转率 ,一期梅毒 ( 10 0 % )和早期潜伏梅毒 ( 88.9% )均高于二期梅毒 ( 76 .9% ) ,说明二期梅毒血清学阴转时间相对较长。TRUST具有简易、快速、敏感性与特异性均较好等特点 。

甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐的合成及临床应用

目的合成甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)的底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐,并探讨其临床应用。方法采用DCC-HOB t脱水合成多肽方法制备甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐;采用连续检测法测定血清GPDA的活性。结果获得高纯度底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐,纯度为98.5%。血清GPDA活性在358.1 U/L以下线性良好,标本批内、批间平均变异系数分别为3.01%、5.04%。应用于临床检测表明,肝癌组GPDA活性增高而胃癌组和慢性胃炎组GPDA活性则下降,与正常组比较均有显著差异(P<0.05,P<0.01)。结论所合成的底物符合临床诊断肝癌、胃癌及慢性胃炎的要求。

β-D-半乳糖苷酶动力学测定方法探讨及初步临床应用

目的建立β-D-半乳糖苷酶（GAL）自动化分析方法。方法用2-氯4-硝基苯基-β-D-半乳糖苷（CNP—GAL）为底物，在pH值4．8柠檬酸-柠檬酸钠缓冲体系下，在405nm处测定产物吸光度值的变化，得出GAL活性。用此方法检测了58名正常体检者及88例患者（包括急性肾功能衰竭15例、尿毒症32例、糖尿病肾病18例、高血压肾病23例）的GAL水平。结果本方法最适pH值为4．8，基质浓度为2．5mmot／L。批内、批间平均变异系数（CV）分别为3．44％、5．17％。米氏常数（Km）为0．45mmol／L。正常对照组GAL中位数（范围）为6．2（4．8～7．8）U／gCr，急性肾功能衰竭组为190（74．2～285．6）U／gCr，尿毒症组为39．6（8．9—161．0）U／gCr，糖尿病肾病组为11．3（5．5～67．0）U／gCr，高血压肾病组为16．1（4．1～137．5）U／gCr，与正常对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．001、P〈0．05）。结论该法简便、快捷、精确，可用于自动化分析，并且留样方便，适宜临床常规应用。GAL可作为评价肾小管疾病及肾实质性疾病的一项指标。

调节激活正常T细胞表达及分泌因子和单核细胞趋化蛋白-1在急性冠状动脉综合征中的作用及诊断价值

目的探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP1)、调节激活正常T细胞表达及分泌因子(RANTES)在急性冠状动脉综合征(ACS)中的作用及诊断价值。方法对临床确诊的48例ACS患者及32名正常对照采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清MCP1和RANTES的含量。结果ACS患者组血清RANTES的含量[(37.97±24.89)ng/ml]明显高于正常对照组[(29.28±15.68)ng/ml,P<0.05]。ACS患者血清MCP1含量为(175.28±144.82)pg/ml,正常对照组为(199.08±112.66)pg/ml,两组间差异无显著性(P>0.05)。结论MCP1及RANTES都不是理想的心肌损伤标志物。

对杨磷酶动力学测定方法探讨及初步临床应用

目的 建立对杨磷酶（PON-1）自动化分析方法.方法 以对硝基苯磷酸二乙酯（对氧磷,paraoxon）为底物,在甘氨酸-氢氧化钠（Glycine-NaoH）缓冲液系统下生成色源对硝基酚.通过测定对硝基酚在405 nm处的吸光度变化率,可计算出PON-1的活性.结果 最适pH值为10.2,最适底物浓度为4.2 mmol/L,Ca2＋浓度为2.5 mmol/L,米氏常数（Km）为0.4 mmol/L.批内、批间变异（CV%）分别为1.07%和2.20%.健康对照组血清PON-1活性为（422.1±78.2）U/L;非冠心病组和冠心病组PON-1活性分别为（411.9±66.9）U/L和（284.1±48.3）U/L,冠心病组PON-1活性显著低于非冠心病组,差异具有统计学意义（P〈0.01）,非冠心病组和健康对照组检测结果无显著差异.结论 该法简便、快捷、精确,可用于自动化分析,可用于心血管疾病诊断的诊断及疗效观察.

哮喘儿童分区管理及其血中IgE、SIL-2R的变化

本文对208例哮喘儿童进行分区管理并检测其血清IgE、SIL-2R,研究显示,绿区、黄区、红区的IgE均值均高于本院正常值(<400U/ml),分别为668.12±429.29U/ml,962.48±464.47U/ml、1493.03±623.06U/ml,相差有高度显著性(P<0.01),SIL-2R均值绿区和黄区高于本院正常值(<200U/ml),分别为342.08±246.80U/ml、269.84±106.36U/ml,相差有高度显著性(P<0.01),红区虽高于正常值为229.56±60.48U/ml,无显著性差异(P>0.05)。提示IgE水平与哮喘发病程度呈相关,SIL-2R水平与发病程度呈负相关。

环指蛋白6对胰岛素受体底物1泛素化作用的研究

目的构建环指蛋白6(RNF6)真核表达载体,并探讨其对胰岛素受体底物1(IRS-1)的泛素化作用。方法以人cDNA为模板,PCR扩增RNF6全长编码基因,并将其克隆至载体质粒pcDNA3.1-CHA中,将重组质粒转染肝癌细胞株HepG2,利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、免疫印迹(Western blot)检测细胞内IRS-1mRNA水平及其蛋白表达水平。结果携带RNF6目的基因的质粒转染HepG2细胞48h后IRS-1的mRNA表达水平降低,为对照组的69%,显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 RNF6引起IRS-1的表达下调,这一泛素化过程可能导致胰岛素信号转导障碍。

医院抗菌药物应用与病原菌耐药性变迁

目的了解医院抗菌药物应用与病原菌耐药现状,探讨抗菌药物用量与病原菌耐药性变迁之间的关系,指导临床合理用药。方法收集、统计对比分析2007-2008年住院部常用抗菌药物应用频度与病原菌的耐药率。结果 2年来,11种抗菌药物应用频度(DDDs)增长迅速,增长率>20.0%;送检标本阳性率55.9%,检出革兰阴性杆菌占56.5%,革兰阳性球菌占43.5%,主要分布于呼吸道、泌尿道、皮肤与组织;分离率排序前5位的病原菌分别是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌和铜绿假单胞菌,多药耐药菌株分离率及耐药率以不同程度逐年上升。结论加强临床抗菌药物应用管理与细菌耐药谱的监测,延缓及防止细菌耐药菌株的产生与传播。

同型半胱氨酸代谢异常与原发性高血压的病例对照研究

目的 探讨同型半胱氨酸代谢异常与原发性高血压的关系。方法 从上海市一个社区中随机选取 12 7例 35～ 75岁的原发性高血压病人和 170例正常血压者。使用高效液相色谱结合电化学方法检测血清中同型半胱氨酸总浓度 ,使用放射免疫法同时测定血清中叶酸和B12 浓度。采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因多态性。结果 调整年龄和性别后 ,病例和对照组同型半胱氨酸水平分别为 10 .5 6 μmol/L和10 .34 μmol/L ,差异无显著性 (F =0 .2 34 ,P =0 .6 3)。在未服降压药的对象中同型半胱氨酸浓度与收缩压和舒张压亦无关联。该人群MTHFR不耐热性基因突变频率为 13.1% ,突变等位基因频率为 38.7%。病例组与对照组基因型分布和突变等位基因频率差异无显著性。然而 ,病例组叶酸和B12 浓度高于对照组。结论 本研究未发现升高的同型半胱氨酸水平、MTHFR基因突变是原发性高血压的独立危险因素。高血压病人较高的叶酸和B12 水平可能降低了同型半胱氨酸的危险性。

冷球蛋白血症致假性血小板增多一例

患者男,80岁,2010年12月29日因“胸闷、气促、不能平卧”,拟诊“急性心力衰竭合并肺部感染”入住上海市第二人民医院.

结核病患者细胞因子检测及其保护性免疫机制研究

目的探讨细胞因子及趋化性细胞因子在结核患者保护性免疫中的作用。方法用ELISA方法检测结核患者及正常人外周血单个核细胞(PBMC)经重组人白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)及脂多糖(LPS)刺激后培养上清液中调节激活正常T细胞表达及分泌因子(RANTES)和巨噬细胞炎性蛋白1-α(MIP1-α)的含量。结果结核患者PBMC用TNF-α或IFN-γ加LPS刺激组RANTES的分泌量[TNF-α组(1731．86±925．60)ng／L、IFN-γ组(2 120．78±1 120．72)ng／L]明显高于单用LPS刺激组[(1 102．56±873．44)ng／L,P<0．01)]。用重组人IL-4加LPS刺激,结核患者PBMC RANTES的分泌量[(1 333．90±621．82)ng／L]与单加LPS刺激组[(1 102．56±873．44)ng／L]相比两组的差异无统计学意义(P>0．05)。正常人及结核患者的PBMC经IL-4、TNF-α、IFN-γ及LPS刺激后MIP1-α分泌量无明显变化。结论TNF-α、IFN-γ及RANTES在结核患者的保护性免疫中可能起着重要的作用。