吉非替尼和西妥昔单抗联合治疗非小细胞肺癌的体外实验研究

背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在非小细胞肺癌中高度表达并且参与其病理过程。目前针对于表皮生长因子受体开发了两种治疗肺癌的药物,一种是EGFR小分子抑制剂吉非替尼(Gefitinib),另一种是EGFR单克隆抗体西妥昔单抗(Cetuximab)。然而,Gefitinib、Cetuximab联合治疗肺癌的效果以及具体机制还不是很清楚。本实验旨在研究Gefitinib、Cetuximab对人肺癌细胞A549、H460、H1299、SPC-A、95C、95D细胞增殖、细胞周期与凋亡、侵袭转移及相关蛋白表达的影响,并探讨其相应的分子机制。方法:CCK8法检测各细胞对Gefitinib、Cetuximab的IC50。流式细胞技术观察细胞凋亡状况;Transwell实验检测细胞侵袭和迁移黏附情况;Westernblot检测Gefitinib、Cetuximab对增殖相关信号通路蛋白表达的变化。结果:1nmol/LGefitinib和5μmol/LCetuximab对A549细胞生长抑制率大概为30%和40%,而两者联合使用的抑制率能够达到50%以上。5μmol/LGefitinib和10nmol/LCetuximab单独及联合作用对A549细胞迁移率降低约为18%、22%和35%。通过Westernblot检测到Gefitinib、Cetuximab处理组的p-AKT、p-EGFR、p-MAPK蛋白量较对照组明显下降。结论:Gefitinib和Cetuximab能够抑制肺癌细胞生长和迁移,并且有着良好的协同作用,提示两药联合使用临床肺癌治疗可能具有很大的潜力。