人原发性肝癌和癌旁组织HBV存在状态的对照研究

本文报告了12对原发性肝癌(PHC)和癌旁组织HBV存在状态的研究结果。在11/12(91.5％)的PHC和9/12(75％)的癌旁组织有HBV DNA整合。整合没有特异性的位点。在2例癌旁组织有单纯游离型的HBV,而相应的PHC中却有HBV DNA的整合,提示HBV整合与PHC发生之间有一定的关系。PHC中整合HBV DNA的量多于癌旁组织,表明是克隆选择作用的结果。在4例病人肝组织内,检测到缺陷型游离HBV,虽然能够在肝内复制,但不能释放入血中。本文同时讨论了HBV整合在PHC发生中的作用。

过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中的差异性表达

目的检测过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中有无差异性表达且有无突变。方法用半定量RT- PCR,Western blot,FISH,PCR-SSCP等方法进行鉴定。结果用半定量RT-PCR检测,有8/14为癌中高表达;Western blot 方法检测,9/15为癌中高表达。免疫组化显示PPARγ在所有的癌旁组织中定位于细胞浆中;而在5个癌组织中定位于细胞核中;突变热点PPARγ外显子3和5在34对肝癌标本中没有突变。结论过氧化物酶体增殖激活性受体γ在肝癌组织中有差异性表达并且在肝癌标本中没有突变。提示PPARγ可能与肝癌的发展有一定的相关性。

前列腺素D合酶基因在卵巢癌组织中的表达

目的 研究Lipocalin型前列腺素D合酶的基因在卵巢癌中的表达及其意义。 方法 用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法和原位杂交技术对 5 4例卵巢癌组织中的L PGDS基因进行检测。结果 从卵巢癌组织中克隆的L PGDS的cDNA ,经测序证明与基因库所报道的L PGDS的基因序列完全一致。 5 4例卵巢组织标本中 ,肿瘤细胞均有不同程度L PGDS基因mRNA表达 ,经统计学分析 ,不同型别间表达差异有显著意义 (P <0 .0 1)。结论 卵巢癌中存在L PGDS的mRNA表达 ,且与卵巢癌分型和分级有关 ,L PGDS的表达差异预示其在卵巢癌发生。

视网膜母细胞瘤易感基因（Rb基因）抑制人肝癌细胞的生长

利用流式细胞学检查及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ、Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交技术对中国人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１进行分析，发现该细胞ＤＮＡ指数为０．８ｌ，为亚倍体细胞。该细胞Ｒｂ基因的５′端存在内部缺失，Ｒｂ基因失活，没有Ｒｂ蛋白产生。将正常人ＲｂｃＤＮＡ正向插入逆转录病毒载体ＤＯＬ，得到重组逆转录病毒载体ＤＯＬＲＢ。用电穿孔转染技术把ＤＯＬＲＢ转入ＳＭＭＣ７７２１细胞，发现Ｒｂ基因导致约７５％的肝癌细胞死亡，另外２５％的肝癌细胞则因外源性Ｒｂ基因突变失活而继续存活。

视网膜母细胞瘤Rb基因表达

利用抗Ｒｂ基因蛋白产物的多克隆抗体对１５例视网膜母细胞瘤Ｒｂ基因表达水平进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析，并采用激光密度分析仪对结果进行进一步精确的定量分析，表明１５例视网膜母细胞瘤中仅有两例的Ｒｂ基因蛋白表达量与正常视网膜相似，其余１３例几乎没有Ｒｂ基因的表达产物。提示在大多数视网膜母细胞瘤中，Ｒｂ基因的蛋白质产物缺乏。

Rb基因在肝癌组织及细胞中存在缺失

利用ＰＣＲ技术对４２对肝癌及癌旁正常肝组织、４个肝癌细胞株的Ｒｂ基因的两个数量可变的重复序列（ＶＮＴＲ）区进行分析，发现８例肝癌组织（１９．０２％）和２株肝癌细胞存在Ｒｂ基因的杂合性丧失（ＬＯＨ），表明Ｒｂ基因的缺失在肝癌的发生发展中起着一定作用。对ＰＣＲ－ＶＮＴＲ技术在快速检测Ｒｂ基因缺失上的价值进行了讨论。

抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ－39轻链可变区基因的克隆与序列分析

从抗人脑胶质瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总ＲＮＡ，并以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）柱纯化ｍＲＮＡ，经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）直接扩增出３１８ｂｐ的轻链可变区（ＶＬ）ｃＤＮＡ片断，经核苷酸序列分析研究，证实已获得了ＳＺ－３９单抗轻链可变区基因。这为今后进一步制备基因工程抗体打下基础。