人类血小板抗原1～4系统基因分型

目的 :建立人类血小板抗原 1～ 4系统序列特异性引物 (PCR SSP)分型方法。方法 :合成 14条引物 ,采用PCR SSP方法对 2 5名健康献血者的HPA 1～ 4系统进行基因分型 ;分型结果与采用等位基因特异性寡核苷酸点杂交 (PCR ASO)获得的结果进行比较。结果 :以PCR SSP方法对HPA 4个系统进行分型均取得了明确、满意的结果 ,且与PCR ASO方法获得的结果完全一致。结论 :人类血小板抗原PCR SSP基因分型方法具有简便、快速、准确等优点 ,具有广泛的应用前景。

孕妇外周血中胎儿红细胞比例对新生儿ABO溶血病的产前诊断价值

目的评价流式细胞仪检测孕妇外周血中胎儿红细胞比例对新生儿ABO溶血病的产前诊断价值。方法对27例丈夫为A型、B型或AB型的O型血孕妇,初次产前检查时抽取外周血,应用流式细胞仪检测胎儿红细胞比例,同时应用新鲜正常脐血作校正。新生儿出生后采集脐血,血清学试验明确新生儿血型及有无溶血(HDN),以最大(灵敏度+特异度)确定孕妇外周血胎儿红细胞比例诊断HDN的最佳临界点。结果(1)新生儿脐血证实为A/B型血,发生HDN者为溶血组,共10例;新生儿未发生HDN者为无溶血组,包括7例脐血证实新生儿为A/B型血(无溶血组1)及10例脐血证实新生儿为O型血(无溶血组2)。(2)胎-母红细胞比例经校正后,溶血组为2.312±0.303,明显低于无溶血组7.168±1.050(P<0.01),而校正前两者差异无显著性(P>0.05)。无溶血组1和无溶血组2的胎-母红细胞比例,无论校正与否,两者差异均无显著性(P>0.05)。(3)校正胎-母红细胞比例诊断HDN的最佳临界点为每10000个孕妇血细胞中3.035个胎儿红细胞。结论溶血组的校正胎-母红细胞比例明显低于无溶血组。每10000个孕妇血细胞中3.035个胎儿红细胞可作为产前诊断新生儿ABO溶血病的最佳临界点。

单克隆抗体生产技术的现状与前景

自从 Ko¨ hler和 Milstein于 1975年发明杂交瘤技术以来 ,该技术已广泛应用于医学基础研究 ,临床诊断治疗及其他科学领域的研究。随着机械化工、计算机学科的发展 ,单克降抗体(m Ab)的生产技术日益丰富。本文对体内外生产 m Ab的技术及其优缺点作一综述 ,力图展示近年来 m Ab技术的最新动态及发展前景。

PCR-限制性酶切片段-单链构象多态合并异源二聚体分析中国人群的Kell血型系统

目的分析中国人群的Keu血型系统的多态性，寻找合适的筛选方法。方法建立聚合酶链反应-限制性酶切片段-单链构象多态性方法（polymerase chain reaction-restriction fragment-single strand conformation polymorphism，PCR-RF-SSCP）合并异源二聚体分析，筛选找出KEL基因第7～9外显子区域中具有不同格局的样品，并对其测序，找出突变位点。结果500份标本中发现两个突变，分别是KEL基因第9外显子上966G〉A和第7内含子的第67位C〉A点突变，但没有涉及氨基酸序列的变化；突变率为4／1000；没有发现PCR-RF-SSCP合并异源二聚体分析有漏检情况。结论PCR-RF-SSCP合并异源二聚体分析可以作为有效的经济简便的筛选方法，适用于基因背景不明了、没有阳性对照品的群体。中国人群的Keu血型系统有自己的特征，多态性有别于其他民族，值得进一步研究。

限制性片段长度多态性分析人血小板抗原5系统基因型

目的 建立人类血小板抗原 (HPA) 5系统限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)分析方法。方法 采用PCR RFLP方法对 2 5名健康献血员的HPA 5系统进行基因分型。分型结果与采用等位基因特异性寡核苷酸点杂交 (PCR ASO)获得的结果进行比较。结果 以PCR RFLP方法对 2 5名献血员的HPA 5系统分型 :2 4名为a/a型 ,1名为a/b型 ,未发现b/b纯合子个体 ,结果与PCR ASO方法获得的结果完全一致。结论 使用PCR RFLP方法对HPA 5系统进行基因分型 ,具有简便、快速、准确等优点 ,有利于新生儿同种免疫血小板减少性紫癜。