卵母细胞体外培养系统的研究进展

近几年人类未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)成为辅助生殖技术(ART)的研究热点,但迄今各种培养系统的成熟率、受精率和妊娠率仍较低,IVM技术仍处于实验阶段,尚不能常规应用于临床。如何获得一个稳定的具有较高成功率的培养系统成为需要迫切解决的问题。现就IVM培养系统和有关影响因素的研究进展作一综述。

多囊卵巢患者行未成熟卵母细胞体外成熟、受精和胚胎发育观察

目的:探索在不用或小剂量使用促性腺激素条件下对多囊卵巢患者的未成熟卵母细胞体外培养至成熟、受精、卵裂和妊娠的可行性。方法:阴道B超引导下穿刺取卵后将卵子分别培养于3种不同培养基:基本培养基(f-HTF+75 mIU/mL rFSH+500 mIU/mL rhCG)+10%SPS(SPS组), 基本培养基+20% hFF(FF组)和基本培养基+20% hFF+2 ng/mL rEGF(FF+EGF组),共培养25-48 h,然后行体外受精和胚胎培养。结果:体外培养卵丘-卵母细胞复合体102个,成熟率65.69%,受精率83.58%,2PN率71.43%,卵裂率51.72%,优质胚胎率40.00%。FF组较SPS组有更高的成熟、受精、卵裂和优质胚胎率,再添加EGF后卵子的成熟、受精和优质胚胎率增加。刺激组和未刺激组在卵子成熟、受精、卵裂和优质胚胎率方面均无显著差异。PCO患者卵子的成熟、受精、卵裂和优质胚胎率均高于PCOS患者,ICSI组优质胚胎率增加,但均无统计学差异。随培养时间延长,卵子的成熟、受精、卵裂和优质胚胎率均升高,其中正常受精率和卵裂率有显著差异(P<0.05)。结论:PCO和PCOS患者行IVM可行,二者无明显差异。培养液中添加激素、FF、EGF以及延长培养时间至48 h,可促进卵子成熟。但有关临床用药、培养条件仍有待改善,进一步提高卵子和胚胎质量以获得妊娠。

小鼠窦前卵泡的体外培养

目的 观察性成熟前小鼠的窦前卵泡体外培养的形态学改变,同时评价激素及生长因子等添加物对窦前卵泡体外发育的影响。方法 机械法分离性成熟前小鼠卵巢中的窦前卵泡,分2组培养于20μL培养液滴内。(1)Gn组:α-MEM+10％FCS+100 mU/mL rFSH±ITS(5 μg/mL insulin,5 μg/mL transferrine,5 ng/mLselenium)±10 mU/mL rLH,第12天移入 α-MEM+1.5 U/mL rHCG+5 ng/mL rEGF+10％ FCS。(2)nGn组:α-MEM+10％ FCS。每天换液观察,记录GC增生、窦形成等形态学改变和卵母细胞成熟情况。结果 激素组窦前卵泡增长明显,92.92％存活,28.65％形成窦,培养14d后40.35％排出成熟卵;而无激素组窦前卵泡生长缓慢,生存6d后开始萎缩、变黑,存活率仅10.91％,无窦卵泡形成,仅11.11％排出成熟卵,差异有显著意义(P<0.01)。激素组在添加ITS、LH后,窦前卵泡的窦形成率和排出成熟卵母细胞率均显著上升(P<0.05)。结论 α-MEM可作为窦前卵泡体外培养液,但必须添加rLH/rFSH、ITS、rHCG/rEGF以促进膜细胞黏附、颗粒细胞增生和卵母细胞成熟。

影响辅助生殖技术的临床因素和对策

近几年,辅助生殖技术(assistant artificial technology,ART)已在多方面特别是实验室技术上取得较多进展,但临床上诸多因素如年龄、子宫、输卵管因素、子宫内膜异位症、原因不明性不孕等均影响ART成功率,需特别加以重视,本文就上述因素作分析讨论.

外科取精术后行卵细胞胞浆内单精子注射治疗梗阻性无精子症

Palermo等于1992年首次报道卵细胞胞浆内单精子注射(ICSI)获得妊娠成功,为男性不育症治疗提供了新的方法[1].同时,先进的外科附睾或睾丸取精术(microsurgical epididymal sperm aspiration, MESA/testicular sperm extraction,TESE)彻底改变了无精子症治疗的乏术局面.采用该方法只要在男性生殖道或睾丸内发现并分离到精子,利用ICSI技术就能获得高度有效的妊娠率.我们于2001年12月至2002年7月对6例男性不育患者采用外科取精术后卵细胞胞浆内单精子注射治疗,现将结果报告如下.