精子膜处理方法对精子介导的外源质粒转基因效率的影响

目的探讨超声、NaOH和溶血卵磷脂三种小鼠精子膜处理方法对转染质粒与精子共孵育后卵胞质内单精子注射（ICSI）授精，观察质粒转染的效率。方法采用上述三种方法对小鼠精子进行膜处理，通过Transgreen／PI荧光染色，观察小鼠精子质膜的完整性；通过流式细胞仪检测小鼠精子DNA的完整性；将处理后的小鼠精子与带GFP的转染质粒共孵育，再采用ICSI与促排卵后成熟小鼠卵子授精，统计各组受精率、卵裂率及荧光囊胚率，观察三种方法对小鼠精子作为质粒载体ICSI后转基因效率的影响。结果溶血卵磷脂方法处理小鼠精子膜的效果显著优于超声和NaOH组（99．2％vs94．7％％，90．9）（P〈0．05）。三种方法对小鼠精子DNA结构的损伤无显著性差异（P〉0．05），行ICSI后三组小鼠胚胎发育率差异不显著（P〉O．05），各组之间荧光胚胎的形成率无显著性差异（P〉0．05o结论三种小鼠精子膜处理方法的效率均能达到90％以上，且对小鼠精子DNA的损伤、行ICSI后小鼠胚胎的发育率和转基因效率无显著差异，因此，三种方法均可用于ICSI法小鼠转基因研究。

孕前超重、孕期过度增重与巨大儿发生风险的前瞻性队列研究

目的 探讨巨大儿发生与孕前超重、孕期过度增重的直接关联及关联强度。方法 2015年1月起在上海市浦东新区妇幼保健院建立孕妇队列，创建孕妇健康档案，收集孕期及分娩信息，包括一般人口学特征、孕前体重、孕期增重、分娩体重、孕期健康状况及各种孕期并发症、分娩情况等，计算孕前BMI及孕期增重，收集新生儿出生体重，了解巨大儿发生与孕前超重、孕期过度增重之间的关系。结果 巨大儿发生率为6.6%（149/2 243）。不同孕前BMI组巨大儿发生率差异有统计学意义（P=0.001）。在控制了孕妇年龄、孕产史等因素后，logistic回归分析结果显示，与孕前BMI适宜的孕妇比，孕前BMI超重以及肥胖的孕妇生产巨大儿的风险均增加（OR=3.12，95%CI：1.35~7.22，P=0.008； OR=2.99，95%CI：1.17~7.63，P=0.022）。不同孕期增重组巨大儿发生率差异有统计学意义（P=0.002）。在控制了孕妇年龄、孕产史、孕期并发症等因素后，logistic回归分析结果显示，与孕期增重适宜的孕妇比，孕期增重不足的孕妇生产巨大儿的风险降低（OR=0.52，95%CI：0.30~0.90，P=0.019）。而孕期过度增重在调整了各种孕期指标后，与孕期增重适宜的孕妇比，巨大儿发生风险差异有统计学意义（OR=1.41，95%CI：0.96~2.09，P=0.084）。结论 孕前超重或肥胖是巨大儿发生的风险因素。