三种固定液对眼球组织固定效果的比较研究

目的从甲醛-戊二醛混合液、Davidoson液和10％福尔马林三种固定液中优选一种，用于对眼球组织的固定。方法取SD大鼠和新西兰兔的双侧眼球，分别用三种固定液固定，然后做成5μm厚的切片并HE染色，观察各自的组织结构及染色效果。结果用甲醛一戊二醛混合液固定的眼球组织，大鼠眼球切片厚度5μm，而新西兰兔切片时厚度8μm，才能切出完整的切片；Davidoson液和10％福尔马林固定的眼球，切片厚度5μm即可。HE染色后，10％福尔马林固定的眼球组织结构不完整，而Davidoson液固定后的眼球，结构清晰、组织完整。结论Davidoson液对大鼠和新西兰兔的眼球固定效果均佳，甲醛-戊二醛混合液对大鼠眼球固定效果也较佳。

环磷酰胺致SD大鼠胎仔脊髓神经细胞凋亡的研究

目的:观察脊髓凋亡细胞,明确环磷酰胺对SD大鼠胎仔脊髓神经细胞凋亡作用。方法:大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中,妊娠第10天给予尾静脉注射不同剂量环磷酰胺(7.2 mg/kg和9.0 mg/kg),于妊娠第20天解剖将胎仔脊髓制成病理切片,并行HE和免疫组化染色。结果:实验结果显示实验组脊髓神经出现大量凋亡细胞;与生理盐水组胎仔胸髓和腰髓前角细胞的Bax和Bcl-2表达比较,环磷酰胺低剂量组胎仔胸髓和腰髓前角细胞的Bax表达明显增强,Bcl-2蛋白表达减弱。结论:在大鼠孕第10天给予7.2 mg/kg环磷酰胺尾静脉注射,其对大鼠胎仔脊髓神经细胞凋亡有促进作用。

雷公藤甲素抗肿瘤作用机制研究进展

雷公藤甲素是从中药雷公藤中提取的环氧化二萜内酯化合物,是雷公藤发挥抗肿瘤作用的主要活性成分,具有广谱、高效抗肿瘤作用。作者从雷公藤甲素诱导肿瘤细胞凋亡、干预细胞周期、抑制新生血管形成等方面,对其抗肿瘤作用机制研究进展进行了综述。

雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响

目的探讨雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响。方法选用雄性SD大鼠随机分为37组,分别为:35个不同雌/雄激素比例组、正常和去势对照组。给药组分别注射不同配伍剂量的雌/雄激素、对照组均注射生理盐水各一个月。最后一次注药后24h取血、处死、取材,称取前列腺重量,测量体积,并计算脏器系数。结果当丙酸睾丸酮给药剂量分别为每只鼠0.02、0.5、2.5和12.5mg时,均未见器官增生程度与苯甲酸雌二醇注射剂量呈负相关。丙酸睾丸酮给药剂量每只鼠为0.1mg时,随着苯甲酸雌二醇注射量增加,前列腺体积及其系数均增大,而当每只鼠苯甲酸雌二醇注射量达到50μg/kg时,器官增生程度不再随苯甲酸雌二醇注射剂量增加而增加。结论雌激素发挥作用需以雄激素存在为前提,雌激素并非总是呈现对抗雄激素促进前列腺增生的作用,而是在一定范围内协同雄激素促进前列腺增生。

睾丸组织固定法优选研究

目的:从福尔马林-蔗糖-醋酸混合液(FSA固定液)、Bouin液和福尔马林3种固定液中优选一种,用于对睾丸组织的固定。方法:取健康SD大鼠双侧睾丸,分别用3种固定液固定,然后制成5μm厚切片并行HE染色,观察不同方法固定睾丸组织结构及染色效果。结果:经福尔马林-蔗糖-醋酸混合液和福尔马林固定的睾丸组织结构较清楚,但组织易收缩,而经Bouin固定液固定的睾丸组织结构和染色效果俱佳。结论:3种固定液都可用于固定睾丸组织,以Bouin效果最好。

孕三烯酮对大鼠血清雌孕激素及在位和异位子宫内膜雌孕激素受体的影响

目的:探讨孕三烯酮(gestrinone)治疗子宫内膜异位症的作用机理。方法:用自体移植术建立大鼠子宫内膜异位症动物模型,随机分组给药,3周后剖腹,取血测定雌二醇(E2)、孕酮(P)浓度,取出子宫及移植物,固定、切片,免疫组化SP法测定各组动物子宫及移植物的雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达。结果:孕三烯酮高剂量使大鼠血清E2、P水平降低,而中低剂量对E2、P水平影响不大。免疫组化结果则显示移植物的ER、PR含量较子宫内膜低,孕三烯酮高、中剂量可下调在位和异位子宫内膜ER、PR表达,而低剂量孕三烯酮则不能明显改变ER、PR的表达量。结论:孕三烯酮可通过降低体内雌孕激素水平以及下调在位及异位子宫内膜ER、PR的表达,发挥对子宫内膜异位症的治疗作用。

人OC-3-VGH卵巢癌细胞裸小鼠肿瘤模型的建立

目的建立人OC-3-VGH细胞株卵巢癌裸小鼠模型并观察该肿瘤生物学生长特性。方法OC-3-VGH细胞株复苏后加入10 mL RPMI-1640培养液,放入培养箱,传2～3代后,取细胞悬液,均以4×106个细胞,每只0.2 mL分别接种至BALB/c雌性裸小鼠皮下,2月后处死取材,观察肿瘤生长特性和转移情况。结果皮下接种一周后,裸鼠长出肿瘤,并随时间而增大,体积呈指数增长,第42天始,明显增大(P<0.05)。组织学检查发现裸鼠皮下肿瘤细胞均细胞体积较大,细胞核大而染色深,核分裂相较多、异型性明显,接种2个月时,未发生其他组织转移。结论建立了新的卵巢癌动物模型,并初步研究了其生物学特性,为卵巢癌治疗方法的研究拓宽了道路。

MC004对雄性大鼠生育能力的影响

目的:研究新型雷公藤甲素衍生物MC004对雄性大鼠生育能力的影响。方法:雄性Wistar大鼠48只,随机分为4组。隔日尾静脉注射,分别给予0,0.25,0.50,0.75mg·kg-1的MC004,共28d。观察临床症状,记录动物体重,进行生育力检查并观察孕鼠各项妊娠指标变化。结果:与对照组相比,0.25mg·kg-1剂量组大鼠各项指标均未见明显变化;0.75mg·kg-1组大鼠生育率明显降低(P<0.01);与0.75mg·kg-1剂量组雄性大鼠交配的雌性大鼠子宫重,胎盘重,卵巢重,平均着床数,活胎窝数,总活胎数,窝均活胎数,活胎率均明显降低(P<0.05或P<0.01),着床前死亡率和着床后死亡率显著升高(P<0.01);与各剂量组雄性大鼠交配的雌鼠在平均黄体数和吸收胎数上差异无显著性(P>0.05)。结论:雄性大鼠隔日尾静脉注射给药28d0.75mg·kg-1剂量的MC004,对生殖系统产生明显毒性,导致雄性大鼠生育力降低。

利用基因芯片法探索人前列腺癌细胞PC-3M在裸鼠体内淋巴道转移相关基因

背静与目的:前列腺癌是欧美国家最常见的一种男性恶性肿瘤,近年来在我国该病也有明显上升趋势。目前认为肿瘤转移是由于一部分肿瘤细胞在肿瘤生长过程中发生基因水平的变化而改变性质变成“转移克隆的细胞”,这部分细胞能突破机体防御系统最终到达远处组织器官形成转移灶。本实验旨在探索人前列腺癌细胞PC-3M在裸鼠体内淋巴道转移的相关基因,为进一步研究前列腺癌淋巴道转移机制打下一定的基础。方法:将PC-3M细胞原位接种于裸鼠体内两个月后分别从原发灶和淋巴结转移灶分离肿瘤细胞,通过体外侵袭和粘附实验,比较两者体外侵袭和粘附能力的差异,并应用基因芯片技术,检测两细胞在转移相关基因丰度水平上的差异。结果:淋巴结转移灶分离的肿瘤细胞的体外侵袭及粘附能力显著高于原发灶内分离的肿瘤细胞,大约分别为后者的2.5倍和1.5倍;而且前者在一些转移相关基因丰度水平上明显高于后者,这些基因按其编码产物的属性和功能可划分为:①编码降解细胞外基质(ECM)的蛋白水解酶包括组织蛋白酶、基质金属蛋白酶;②编码转录因子家族成员;③编码参与肿瘤细胞异质性粘附的分子;④编码细胞表面受体。结论:原发灶内的前列腺癌细胞和淋巴结转移灶内的肿瘤细胞在侵袭和粘附能力上存在显著差异,经鉴定的差异表达分子可能在前列腺癌细胞由原发灶迁移到远处组织器官的转移过程中发挥重要作用。

非人灵长类动物胚胎-胎仔毒性实验阳性药物的选择

生物技术药物研发的蓬勃发展促使越来越多的生物制品需要进行非人灵长类动物生殖与发育毒性研究,而国内开展该实验项目的机构和案例均较少,如何成功建立该实验体系,阳性药物的选择至关重要。对于大小鼠、家兔可引起胚胎畸形的药物积累了很多案例和经验,而非人灵长类动物的实验及案例报道较少,本文针对可引起非人灵长类动物胚胎发育畸形的药物展开综述。

敌枯双和环磷酰胺对SD大鼠胚胎致畸作用比较

目的:寻找作为SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验(Ⅱ段生殖毒性)较理想的阳性对照药物。方法:在大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中,分别在妊娠第10日给予不同剂量敌枯双和环磷酰胺,于妊娠第20日解剖观察胎仔畸形,从致畸种类、致畸率等指标分析比较致畸作用。结果:敌枯双11.0mg/kg组和13.8mg/kg组外观畸形率分别为84.62%和86.84%(P<0.01),而且种类较多,如:脊柱裂、心脏外露、尾畸形、肛门闭锁、骨骼畸形等;环磷酰胺组发生的畸形较少,以骨骼发育迟缓为主。结论:敌枯双对大鼠的致畸率高、致畸种类多,是较好的阳性对照药物。

MC004对大鼠睾丸组织结构和酶活力的影响

目的探讨新型雷公藤甲素衍生物MC004对大鼠睾丸组织结构及睾丸酶活力的影响。方法雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组。隔日尾静脉注射,溶剂对照组和低、中、高剂量组分别给予生理盐水和0.25、0.50、0.75 mg/kg的MC004,共28 d。末次给药24 h后剖杀,制备睾丸病理切片并测定睾丸中乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸脱氢酶x(LDH-x)、酸性磷酸酶(ACP)和山梨醇脱氢酶(SDH)的活力。结果与对照组相比较,MC004 0.75 mg/kg组大鼠体重增长缓慢;各剂量组睾丸、附睾的绝对重量及相对重量均显著降低(P<0.01);MC004可引起大鼠睾丸组织匀浆中LDH、LDH-x、SDH和ACP酶活力的显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论雄性大鼠隔日尾静脉注射给药28 d 0.25 mg/kg剂量的MC004时,即能引起大鼠睾丸组织病理学改变且对睾丸酶活力具有显著抑制作用,从而产生雄性生殖毒性。